改造的HEK293T细胞及制备方法、载药外泌体及制备方法技术

本发明专利技术涉及一种制备改造HEK293T细胞的方法、经过改造的HEK293T细胞、制备载药外泌体的方法及载药外泌体。该制备改造HEK293T细胞的方法包括以下步骤：S1：构建质粒：利用pcDNA3.1表达载体作为质粒骨架，分别构建3个质粒：pcDNA3.1‑STEAP3，pcDNA3.1‑SDC4，pcDNA3.1‑NadB片段；S2：将S1中3种质粒按照1‑3：1‑3：1‑3的比例转染到HEK293T细胞中，筛选稳定细胞株，获得改造后的HEK293T细胞株。通过采用上述技术方案，由于这三种质粒的协同作用，能够对自身外泌体分泌量较大的HEK293T细胞进行改造，从而进一步提高其外泌体分泌量，为临床试验提供更多的选择。

【技术实现步骤摘要】
改造的HEK293T细胞及制备方法、载药外泌体及制备方法
本专利技术涉及药物载体制备领域，具体涉及改造的HEK293T细胞及制备方法、载药外泌体及制备方法。
技术介绍
向各种特定类型的细胞靶向递送药物分子是精准医学中的主要面临的主要挑战，天然外泌体具备生物功能化纳米囊泡，该囊泡可通过基因工程的手段展示多种靶向蛋白或者多肽的配体并直接包装药物以行使药物靶向递送能力。外泌体是一种活细胞在生理或病理状态下主动分泌到细胞外的膜性囊泡，其携带蛋白，运送RNA，其内容物包括蛋白质、短链肽、DNA片段、lncRNA、磷脂以及miRNA。研究发现肥大细胞、树突状细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、间充质干细胞及肿瘤细胞等都可以产生并释放外泌体。外泌体可递送化学药物、蛋白质及肽配基和基因药物等多种药物，以外泌体为基础的治疗方法已被广泛研究用于药物递送，以获得更好的结果。最近的研究表明，它们具有低免疫原性、高耐受性、可生物降解性和无毒等特性，因此它们是理想的药物递送载体，与现有的合成递送系统相比具有各种优势。此外，它们有助于提供保护性屏障，可以延长药物的血浆半衰期本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备改造HEK293T细胞的方法，所述包括以下步骤：/nS1：构建质粒：利用pcDNA3.1表达载体作为质粒骨架，分别构建3个质粒：pcDNA3.1-STEAP3，pcDNA3.1- SDC4，pcDNA3.1- NadB片段；/nS2：将S1中3种质粒按照1-3：1-3：1-3的比例转染到HEK293T细胞中，筛选稳定细胞株，获得改造后的HEK293T细胞株。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备改造HEK293T细胞的方法，所述包括以下步骤：
S1：构建质粒：利用pcDNA3.1表达载体作为质粒骨架，分别构建3个质粒：pcDNA3.1-STEAP3，pcDNA3.1-SDC4，pcDNA3.1-NadB片段；
S2：将S1中3种质粒按照1-3：1-3：1-3的比例转染到HEK293T细胞中，筛选稳定细胞株，获得改造后的HEK293T细胞株。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤2中，所述比例为1:1:1。


3.一种经过改造的HEK293T细胞，其能够通过根据权利要求1或2所述的方法获得。


4.一种利用权利要求3所述的经过改造的HEK293T细胞制备载药外泌体的方法：所述方法包括以下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：王程，董鸣，何慧琼，
申请(专利权)人：承启医学深圳科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44