【技术实现步骤摘要】
一种检测试纸条在制备检测PLA2R抗体的试剂盒中的应用本申请是申请日为2018年01月30日、专利技术名称为“一种PLA2R抗体的检测试纸及检测方法”、申请号为201810091384.0的专利技术的分案申请。
本专利技术属于生物检测
,具体涉及一种PLA2R抗体的检测试纸条及检测方法。
技术介绍
膜性肾病(MN)是成人肾病综合征最常见的病理类型之一,其特征性的病理学改变是肾小球毛细血管袢上皮侧可见大量免疫复合物沉积。MN按发病原因可分为特发性膜性肾病(IMN)和继发性膜性肾病(SMN)两大类。IMN是一种肾小球慢性炎症性疾病,大多与抗磷脂酶A2受体抗体相关,抗磷脂酶A2受体抗体与足细胞上的相应抗原结合,形成原位免疫复合物,继而通过旁路途径激活补体,形成C5b-9膜攻击复合物,损伤足细胞,破坏肾小球滤过屏障,其典型特征是蛋白尿,随着尿蛋白含量的增加,有肾衰竭的发展趋势。而SMN与IMN不同,是继发性疾病或并发性疾病,药物治疗、滥用毒品、感染性疾病、其他的自身免疫疾病和肿瘤都可能导致SMN的发生。如系统性红斑狼疮 ...
【技术保护点】
1.一种检测试纸条在制备检测PLA2R抗体的试剂盒中的应用,其中所述检测试纸条,包括在粘性底板上依次搭接样品垫、结合垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫1上喷涂有PLA2R生物素化偶联物,所述结合垫2喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物,所述硝酸纤维素膜上包被有捕获体作为检测线,所述硝酸纤维素膜上还包被有抗DNP-BSA抗体作为质控线。/n
【技术特征摘要】
1.一种检测试纸条在制备检测PLA2R抗体的试剂盒中的应用,其中所述检测试纸条,包括在粘性底板上依次搭接样品垫、结合垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫1上喷涂有PLA2R生物素化偶联物,所述结合垫2喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物,所述硝酸纤维素膜上包被有捕获体作为检测线,所述硝酸纤维素膜上还包被有抗DNP-BSA抗体作为质控线。
2.根据权利要求1所述的应用,所述PLA2R生物素化偶联物中PLA2R为PLA2R分子全长或部分片段的蛋白,或能起到PLA2R蛋白类似作用的变异体、类似物、替代物。
3.根据权利要求1所述的应用,所述检测试纸条中荧光微球的粒径为200nm;所述捕获体为抗人IgG抗体或能与人IgG抗体结合的物质。
4.权利要求1所述的应用,所述检测试纸条的制备方法,包括以下步骤:
A、将PLA2R蛋白生物素化获得PLA2R生物素化偶联物,喷涂在结合垫1上;
B、分别将预处理的亲和素和DNP-BSA与活化的荧光微球偶联,获得亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物喷涂在结合垫2上;
C、将捕获体包被到硝酸纤维素膜上作为检测线,将抗DNP-BSA抗体包被到硝酸纤维素膜上作为质控线;
D、在粘性底板上依次搭接样本垫、喷涂有PLA2R生物素化偶联物的结合垫1、喷涂有亲和素荧光微球偶联物和DNP-BSA荧光微球偶联物的结合垫2、包被捕获体和抗DNP-BSA抗体的硝酸纤维素膜、吸水纸。
5.根据权利要求4所述的应用,所述检测试纸条的制备方法步骤B所述偶联为将活化的荧光微球离心去上清后,用pH7.0~8.050mMMES缓冲液洗涤后,按每100μl微球加入0.1mg~0.2mg亲和素或0.2~0.4mgDNP-BSA,室温混匀反应1~2h。
6.根据权利要求4所述的应用,所述检测试纸条的制备方法所述步骤C具体为分别用包被液稀释捕获体和抗DNP-BSA...
【专利技术属性】
技术研发人员:王洪涛,张永顶,张大准,
申请(专利权)人:深圳市伯劳特生物制品有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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