一种辅助判读KI67增殖指数的标准比对卡制造技术

本发明专利技术涉及免疫组化检测领域，具体公开了一种辅助判读KI67增殖指数的标准比对卡的制备方法，包括如下步骤：1)全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的肿瘤组织切片，得到图像数据；2)选取图像数据中的热点区域，使用计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数；3)截取1个以上已知KI67增殖指数的热点区域的图片。本发明专利技术的标准比对卡准确性好，且不容易受医生资历年限的影响，能辅助医生对KI67增殖指数进行稳定的判断。

【技术实现步骤摘要】
一种辅助判读KI67增殖指数的标准比对卡
本专利技术涉及免疫组化检测领域。
技术介绍
KI67是一种非组蛋白核皮质蛋白，在细胞周期G1，S，G2和M期细胞核中表达，而不在G0期(细胞静止状态)表达。因此，肿瘤细胞中检测表达KI67的细胞的比例(也称“KI67增殖指数”)能反映肿瘤细胞中正在进行分裂的细胞的比例，经常用于判断肿瘤的恶性程度，KI67增殖指数越高，通常恶性程度越高。KI67增殖指数已成为乳腺癌(BC)的预测和预后因素。根据St.Gallen的指南，高增殖KI67是雌激素受体(ER)阳性HER2阴性BC复发风险增加的特征之一，间接支持了这些患者在内分泌治疗中加入化疗的价值。2013年圣加仑共识建议在ER阳性HER2阴性BC中KI67指数截止值为20％，而2015年大多数小组接受的阈值在20％-29％范围内。目前缺乏KI67判读的标准化方法，导致不同观察者或实验室得到的KI67判读结果出现较大差别，其结果可靠性得不到保证。因此，美国临床肿瘤学会(ASC0)肿瘤标记指南和国际KI67工作组不建议常规使用KI67作为新诊断BC患者的预后评估。为了降低来自观察者和实验室差异带来的主观误差，提高KI67判读结果的可信度，需要建立辅助K167标准化判读的方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，提供一种用于辅助判读乳腺癌K167增殖指数的标准比对卡。本专利技术的技术方案包括：一种辅助判读K167增殖指数的标准比对卡的制备方法，包括如下步骤：1)全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的肿瘤组织切片，得到图像数据；2)选取图像数据中的热点区域，使用计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数；3)截取1个以上已知KI67增殖指数的热点区域的图片；所述热点区域指图像数据中KI67阳性细胞占比为1％-99％的图像区域。如前述的制备方法，步骤1)所述的肿瘤为乳腺癌。如前述的制备方法，步骤3)所截取的热点区域中，至少1个区域的KI67增殖指数在20％-29％范围内。如前述的制备方法，步骤3)所截取的热点区域中，对应的KI67增殖指数包括5％、10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％中至少1个。如前述的制备方法，步骤3)所截取的热点区域中，对应的KI67增殖指数为5％、10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％。如前述的制备方法，它还包括打印步骤3)所得图片。前述方法制备得到的辅助判读KI67增殖指数的标准比对卡。本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的标准比对卡相比常规判读方法，准确性更高，可重复性更高，不易受主观因素的影响。本专利技术的标准比对卡以图片方式呈现KI67的判读标准，成本低，使用方便。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为基线与各医生第一、二、三遍判读所得KI67增殖指数散点图。图2为第一、二、三遍判读中各医生所得KI67增殖指数两两比较的散点图。具体实施方式实施例1本专利技术的标准比对卡的制作和使用方法使用PRECICE600系列型号全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的乳腺癌肿瘤切片，并转换成整个载玻片图像数据。选择KI67阳性细胞比例最高的区域作为“热点”区域，由计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数，选取KI67增殖指数分别为5％，10％，15％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％的区域，截取该图片的区域，彩色打印，即得。使用时，只需对比待检的乳腺癌KI67免疫组化染色切片与各标准比对卡进行比较，寻找最接近的标准比对卡，待检样本的KI67增殖指数即处于最接近标准比对卡对应KI67增殖指数左右。实施例2本专利技术的标准比对卡的制作和使用方法使用PRECICE600系列型号全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的乳腺癌肿瘤切片，并转换成整个载玻片图像数据。选择KI67阳性细胞比例最高的区域作为“热点”区域，由计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数，选取KI67增殖指数分别为15％，20％，30％，50％，80％的区域，截取该图片的区域，彩色打印，即得10张不同的标准卡片。使用时，只需对比待检的乳腺癌K167免疫组化染色切片与各标准比对卡进行比较，寻找最接近的标准比对卡，待检样本的KI67增殖指数即处于最接近标准比对卡对应KI67增殖指数左右。本专利技术的标准比对卡所对应KI增殖指数并不限于实施例中所列举的KI67增殖指数，该增殖指数可根据实际情况、实际需求设置。以下将用实验例的形式对本专利技术的有益效果进一步说明。实验例1本专利技术的标准比对卡的效果验证本实验例的目的是比较使用常规判读方法(方法1)、使用常规标准比对卡的方法(方法2)和本专利技术标准比对卡的方法(方法3)受判读人员的影响的大小。所述方法1为：病理医师日常工作中，无任何辅助工具，通过显微镜下选取KI67免疫组织化学染色载玻片中一个热点区域，人工判读KI67阳性细胞占比，即为乳腺癌KI67增殖指数；所述方法2是在实施例1的基础上，将计算机判读KI67增殖指数，改为人工计数，具体为：使用PRECICE600系列型号全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的载玻片并转换成整个载玻片图像数据，选取KI67免疫组织化学染色载玻片中一个热点区域，人工计数，得每500个细胞里KI67阳性细胞的比例，即为KI67增殖指数，将KI67增殖指数分别为5％，10％，15％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％的区域截图，彩色打印，即得10张常规标准比对卡。使用时，对比待检的乳腺癌KI67免疫组化染色切片与各标准比对卡进行比较，寻找最接近的标准比对卡，待检样本的KI67增殖指数即处于最接近标准比对卡对应KI67增殖指数左右。所述方法3同实施例1。1.方法1)选取乳腺浸润性癌标本100例经过KI67免疫组化染色，由5名年资不同病理医师判读，从A医生到E医生分别参加工作5年，3年，2年，1年，＜1年。这100例标本均被各个医师判读3次，第一遍使用方法1，第二遍使用方法2，第三遍使用方法3；第一、二、三遍判读的时间间隔为1周。2)在计算机图像上人工计数每张切片上所有肿瘤细胞，计算阳性细胞数/肿瘤细胞总数，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种辅助判读K167增殖指数的标准比对卡的制备方法，包括如下步骤：/n1)全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的肿瘤组织切片，得到图像数据；/n2)选取图像数据中的热点区域，使用计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数；/n3)截取1个以上已知KI67增殖指数的热点区域的图片；/n所述热点区域指图像数据中KI67阳性细胞占比为1％-99％的图像区域。/n

【技术特征摘要】
1.一种辅助判读K167增殖指数的标准比对卡的制备方法，包括如下步骤：
1)全自动数字切片扫描系统扫描KI67免疫组织化学染色的肿瘤组织切片，得到图像数据；
2)选取图像数据中的热点区域，使用计算机判读热点区域的KI67阳性细胞占热点区域内肿瘤细胞的比例，为KI67增殖指数；
3)截取1个以上已知KI67增殖指数的热点区域的图片；
所述热点区域指图像数据中KI67阳性细胞占比为1％-99％的图像区域。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的肿瘤为乳腺癌。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)所截取的热点区域中，至少1个区域的KI67增...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘月平，
申请(专利权)人：河北医科大学第四医院，
类型：发明
国别省市：河北;13