【技术实现步骤摘要】
用于检测TPMT基因多态性的引物组及其应用方法
本专利技术涉及基因检测
,特别涉及用于检测TPMT基因多态性的引物组及其应用方法。
技术介绍
硫嘌呤类药物早已在临床广泛应用。其中,硫鸟嘌呤和6-巯基嘌呤用于炎症性肠病(IBD)稳定期的诱导和维持治疗,同时也是治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)最为广泛应用的药物之一,前体硫唑嘌呤则在自身免疫性疾病和器官移植后排斥反应的治疗中发挥着重要的作用。巯基嘌呤甲基转移酶(ThiopurineS-methyltransferase,TPMT)是硫嘌呤类药物在体内代谢的关键酶,其活性的高低可直接影响该类药物的临床疗效和毒性程度。目前,常规PCR测序法的每个PCR反应通常针对TPMT基因的一个多态性位点进行基因突变检测,故TPMT基因多态性的检测通量低。
技术实现思路
本专利技术实施例提供了用于检测TPMT基因多态性的引物组及其应用方法,能够提高TPMT基因多态性的检测通量。为了达到上述目的,本专利技术是通过如下技术方案实现的:目前,由于TP ...
【技术保护点】
1.用于检测TPMT基因多态性的引物组,其特征在于,包括下述三个引物对中的至少一个引物对:/n用于检测TPMT基因的rs1800462位点的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;/n用于检测TPMT基因的rs1800460位点的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;/n用于检测TPMT基因的rs1142345位点的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。/n
【技术特征摘要】
1.用于检测TPMT基因多态性的引物组,其特征在于,包括下述三个引物对中的至少一个引物对:
用于检测TPMT基因的rs1800462位点的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;
用于检测TPMT基因的rs1800460位点的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;
用于检测TPMT基因的rs1142345位点的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。
2.一种权利要求1所述的引物组在制备检测TPMT基因的rs1800462位点、rs1800460位点和rs1142345位点的试剂盒中应用。
3.一种权利要求1所述的用于检测TPMT基因多态性的引物组的应用方法,其特征在于,包括:
设计权利要求1所述的引物组;
从待测样本中提取基因组DNA作为扩增模板;
配制包含所述引物组和所述扩增模板的多重聚合酶链式反应PCR反应体系;
对所述多重PCR反应体系进行多重PCR扩增反应,得到PCR产物;
根据所述PCR产物,确定所述待测样本的TPMT基因的热点突变位点的基因突变情况。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,
所述根据所述PCR产物,确定所述待测样本的TPMT基因的热点突变位点的基因突变情况,包括:
电泳检测所述PCR产物,获得所述PCR产物的扩增片段大小;
当所述PCR产物的扩增片段大小正确时,对所述PCR产物进行核苷酸序列...
【专利技术属性】
技术研发人员:智慧芳,解娜,倪君君,
申请(专利权)人:北京和合医学诊断技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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