EGFR基因缺失突变检测用组合物、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开一种EGFR基因缺失突变检测用组合物、试剂盒及检测方法。该组合物包括突变型检测用组合物和/或野生型检测用组合物，所述突变型检测用组合物包括上游引物F1、上游引物F1‑1、水解探针P1和下游引物；所述野生型检测用组合物包括上游引物F2、上游引物F2‑1、水解探针P2和下游引物；其中上游引物F1和F2均是由不匹配区和匹配区组成，上游引物F1和F2的匹配区分别特异性结合待检测序列区域。上游引物F1和F2的不匹配区上均有相对应检测用上游引物和水解探针的相同序列。与现有技术相比，本发明专利技术具有显著提高的灵敏度和高度特异性，并且大幅降低了引物和测试成本，具有极高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
EGFR基因缺失突变检测用组合物、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及生物医学核酸检测
，具体涉及EGFR基因缺失突变检测用组合物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
长期以来，组织病理学诊断是肿瘤诊断的金标准和临床治疗的基础。然而对组织学类型、分期相同的肿瘤患者采取相同的治疗方案，往往只有一部分肿瘤患者有反应。据统计，传统医疗在肿瘤治疗上用药无效率高达75％。恶性肿瘤的疗效不好在于难以从组织诊断水平上对其恶性特征和药效特征进行判断。研究表明，肿瘤病变的分子特征决定了其恶性特征，转移特征，复发特征和耐药特征，是肿瘤愈后判断和对化疗药物反映的基本依据。因此，基于分子差异的个体化治疗是肿瘤精准治疗的方向，分子分型是实现个体化精准治疗的基础。表皮生长因子受体EGFR是一种跨膜酪氨酸激酶受体，该受体激酶域激活与癌细胞增殖、转移和凋亡等多种信号传导通路有关。该EGFR基因位于7号染色体短臂7p12-14区，由28个外显子组成。EGFR基因的突变种类繁多，主要发生在18～21号外显子之间的酪氨酸激酶活性位点处。其最常见的敏感突变为19外显子缺失突变(约本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种EGFR基因缺失突变检测用组合物，其特征在于：该组合物包括突变型检测用组合物和/或野生型检测用组合物；/n所述突变型检测用组合物包括上游引物F1、上游引物F1-1、水解探针P1和下游引物；/n所述野生型检测用组合物包括上游引物F2、上游引物F2-1、水解探针P2和下游引物组成；/n其中，/n所述上游引物F1从5’端至3’端依次由下述两部分组成：/n(1)不匹配区：与突变型和野生型的序列均不发生互补配对；该不匹配区的序列从5’端至3’端包括与上游引物F1-1相同的序列，和与水解探针P1相同的序列；/n(2)匹配区：仅与突变型的突变位点上下游序列连续互补配对；/n所述上游引物F2从5’端至...

【技术特征摘要】
1.一种EGFR基因缺失突变检测用组合物，其特征在于：该组合物包括突变型检测用组合物和/或野生型检测用组合物；
所述突变型检测用组合物包括上游引物F1、上游引物F1-1、水解探针P1和下游引物；
所述野生型检测用组合物包括上游引物F2、上游引物F2-1、水解探针P2和下游引物组成；
其中，
所述上游引物F1从5’端至3’端依次由下述两部分组成：
(1)不匹配区：与突变型和野生型的序列均不发生互补配对；该不匹配区的序列从5’端至3’端包括与上游引物F1-1相同的序列，和与水解探针P1相同的序列；
(2)匹配区：仅与突变型的突变位点上下游序列连续互补配对；
所述上游引物F2从5’端至3’端依次由下述两部分组成：
(1)不匹配区：与突变型和野生型的序列均不发生互补配对，该不匹配区的序列从5’端至3’端包括与上游引物F2-1相同的序列，和与水解探针P2相同的序列；
(2)匹配区：仅与野生型的突变位点及其上下游序列连续互补配对。


2.根据权利要求1所述的EGFR基因缺失突变检测用组合物，其特征在于：所述突变型检测用组合物和野生型检测用组合物中的下游引物相同。


3.根据权利要求1或2所述的EGFR基因缺失突变检测用组合物，其特征在于：所述水解探针P1的5’端和3’端上分别修饰报告基团和淬灭基团；所述水解探针P2的5’端和3’端上分别修饰报告基团和淬灭基团；优选地，水解探针P1和水解探针P2上的报告基团分别释放不同的检测信号。


4.根据权利要求1～3任意一项所述的EGFR基因缺失突变检测用组合物，其特征在于：所述上游引物F1的3’端第2～9个碱基处添加1～20个错配碱基；所述上游引物F2的3’端第2～9个碱基处添加1～20个错配碱基。


5.根据权利要求1～4任意一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵雨航，葛志琪，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51