微生物发酵液中代谢产物的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种微生物发酵液中代谢产物的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：(1)取待测微生物发酵液，置于‑70℃～‑90℃条件下4h～8h后，隔夜真空冷冻干燥，再用N,N‑二甲基甲酰胺溶解，涡旋震荡、离心所得上清液即为代谢产物溶液；(2)取所述代谢产物溶液，加入内标液混匀，再加衍生剂进行硅烷化衍生处理；(3)取所述衍生处理过的代谢产物溶液，进行GC‑MS检测。本发明专利技术通过对待测微生物发酵液的上述处理，能够尽可能保留所含代谢物并使这些代谢物尽可能多种类的提取出来，提取效率高。

【技术实现步骤摘要】
微生物发酵液中代谢产物的检测方法
本专利技术属于分析化学
，涉及一种微生物发酵液中代谢产物的检测方法。
技术介绍
发酵技术指的是人们利用微生物的发酵作用，运用一些技术手段控制发酵的过程，从而进行大规模生产发酵产品的技术。利用微生物的代谢活动，原材料在这种发酵环境下，生产人们所期望的食物，在食物中产生新的能够促进人体健康的化合物，同时去除具有不利健康潜力的物质，因此微生物被认为是决定发酵食品品质好坏的关键因素。发酵将有机物质转化成食品，使食品能抑制腐败菌和一般病原菌的生长，提高原有的未发酵食品的营养价值，使其原来的色泽，形状，风味按着人们的意愿去改变、日益被人们接受并喜欢。发酵食品之所以具有独特的风味且营养丰富，与其中发酵菌种发酵原材料产生种类丰富繁杂的代谢产物有极大关系。某些发酵食品中独特的风味及营养成分主要是原材料在微生物及酶的作用下转化形成代谢产物而产生的。这些代谢产物互相作用影响，产生独特的发酵产品风味。微生物的代谢产物有很多，已知的有37个大类，其中16类属于药物。在菌体对数生长期所产生的产物，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂肪本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括如下步骤：/n(1)取待测微生物发酵液，置于-250℃～-50℃条件下4h～8h后，隔夜真空冷冻干燥，再用N,N-二甲基甲酰胺溶解，涡旋震荡、离心所得上清液即为代谢产物溶液；/n(2)取所述代谢产物溶液，加入内标液混匀，再加衍生剂进行硅烷化衍生处理；/n(3)取所述衍生处理过的代谢产物溶液，进行GC-MS检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括如下步骤：
(1)取待测微生物发酵液，置于-250℃～-50℃条件下4h～8h后，隔夜真空冷冻干燥，再用N,N-二甲基甲酰胺溶解，涡旋震荡、离心所得上清液即为代谢产物溶液；
(2)取所述代谢产物溶液，加入内标液混匀，再加衍生剂进行硅烷化衍生处理；
(3)取所述衍生处理过的代谢产物溶液，进行GC-MS检测。


2.根据权利要求1所述的微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的加衍生剂进行硅烷化衍生处理包括：加衍生剂，混匀、密封后于37℃～90℃条件下水浴1h～5h；所述衍生剂为双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷按体积比为(95～99.5)：(0.5～5)的混合溶液。


3.根据权利要求2所述的微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，所述水浴的温度为78℃～82℃，所述水浴的时间为1.5h～2.5h，所述衍生剂为双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷按体积比为(98.5～99.5)：(0.5～1.5)的混合溶液。


4.根据权利要求1至3任一项所述的微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，所述GC-MS检测采用的色谱条件包括：
色谱柱：以5％二苯基1％乙烯基94％二甲基聚硅氧烷为填料的弱极性毛细管柱；载气：氦气；分流比：4.5～5.5；升温程序为：70℃保持8min；在8min～48min，以每分钟升温2.5℃～3.5℃的速度升温至190℃；48min～59min，以每分钟升温9.5℃～10.5℃的速度升温至300℃；以300℃保持31min。


5.根据权利要求4所述的微生物发酵液中代谢产物的检测方法，其特征在于，所述GC-MS检测采用的色谱条件包括：
色谱柱：HP-5(0.25μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘亮明，赵国忠，孔德华，潘志辉，高琦豆，冯宜旭，姚云平，
申请(专利权)人：广州致美斋食品有限公司，广州市致美斋酱园有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44