一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种(2S,3S)‑2‑羟基‑4‑苯基丁烷衍生物的制备方法，将(3S)‑3‑(叔丁氧羰基)氨基‑1‑氯‑4‑苯基‑2‑丁酮、羰基还原酶和过量的异丙醇进行生物酶催化反应获得转化液，再经连续浓缩结晶获得目标产物结晶；该羰基还原酶通过定向突变具有高浓度异丙醇耐受的特点，从而实现过量异丙醇对底物增溶，进而增加底物投量，提高了转化率，产品收率不低于95%，手性纯度不低于99.95%。本发明专利技术对转化液通过连续浓缩结晶，获得的产物结晶度95%以上，晶体均一，杂质纯度不低于99.95%，含量不低于99%。

【技术实现步骤摘要】
一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法
本专利技术涉及生物酶催化工艺领域，具体地说涉及一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法。
技术介绍
非肽类HIV蛋白酶抑制剂（PI），是治疗HIV首选药物，如沙奎那韦、奈非那韦、福沙那韦、地瑞那韦等，例如地瑞那韦可通过阻断从受感染的宿主细胞表面释放新的、成熟的病毒粒子的形成过程，抑制病毒的蛋白酶而起作用，2006年6月，FDA批准地瑞那韦与其他抗逆转录病毒药物联合用于治疗HIV感染的成年患者，2007年3月地瑞那韦在欧盟的27个成员国上市。上述化合物的核心结构都为(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物结构。例如地瑞那韦主要通过式III化合物（化学名称：(2S,3S)-N-叔丁氧羰基-3-氨基-1-氯-2-羟基-4-苯基丁烷）为中间体制备得到，该分子结构复杂，化学合成污染严重且难度较高。该结构存在两个手性中心，其中一个手性中心来源于天然的苯丙氨酸，另一个手性中心可将前手性的酮还原成手性醇，从而引入BOC-环氧化物上的第二个手性中心。若引入的第二个手性中心为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：将底物、羰基还原酶和过量的有机溶剂在含有再生供氢辅因子的缓冲液中进行生物酶催化反应获得转化液，再经连续浓缩结晶获得目标产物结晶；/n所述底物为式（I）所示化合物，所述目标产物为式（II）所示化合物，其中，式（I）和式（II）中的R为相同的氨基保护基团；/n

【技术特征摘要】
1.一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：将底物、羰基还原酶和过量的有机溶剂在含有再生供氢辅因子的缓冲液中进行生物酶催化反应获得转化液，再经连续浓缩结晶获得目标产物结晶；
所述底物为式（I）所示化合物，所述目标产物为式（II）所示化合物，其中，式（I）和式（II）中的R为相同的氨基保护基团；



其中，所述羰基还原酶与SEQIDNo.1所示氨基酸序列的同源性不低于95%；所述有机溶剂在反应体系的浓度为15-60%(m/V)。


2.根据权利要求1所述的一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：所述羰基还原酶来源于谷糠乳杆菌（Lactobacillusfarraginis），且与SEQIDNo.1所示氨基酸序列的同源性不低于99%。


3.根据权利要求1或2所述的一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为异丙醇、乙醇、正丁醇的任意一种或多种的组合。


4.根据权利要求3所述的一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂在反应体系的浓度为20-50%(m/V)，所述底物的投料浓度为100~400g/L，生物催化反应24小时的转化率不低于95.0%，所述目标产物的de值不低于99.5%。


5.根据权利要求4所述的一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：所述羰基还原酶与底物的质量比为0.03~0.1:1，所述羰基还原酶催化反应的温度为35-45℃，缓冲液的pH为7~9。


6.根据权利要求5所述的一种(2S,3S)-2-羟基-4-苯基丁烷衍生物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为异丙醇，底物的投料浓度为80~200g/L，生物催化反应2...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨卫华，谈聪，张利坤，钱敏帆，金力，倪建洲，葛文强，
申请(专利权)人：长兴制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33