一种索玛鲁肽前体的制备方法技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，特别涉及一种索玛鲁肽前体的制备方法，本发明专利技术采用基因重组技术，与化学合成相比，减少了杂质的产生，纯度和收率相对较高；其主要的步骤包括：首先利用基因重组技术将带有GLP‑1(9‑37)基因序列且为串联表达序列的质粒导入到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中，构建重组工程菌，经过高密度发酵诱导后获得表达GLP‑1(9‑37)的串联表达蛋白，后进过变性、复性酶切、纯化等步骤后得到索玛鲁肽前体GLP‑1(9‑37)。

【技术实现步骤摘要】
一种索玛鲁肽前体的制备方法
本专利技术属于基因工程
，特别涉及一种索玛鲁肽前体的制备方法。
技术介绍
索玛鲁肽(Semaglutide)是一种通过基因重组技术生产的GLP-1类似物，与人GLP-1具有较高的氨基酸序列同源性，与天然的GLP-1不同的在于索玛鲁肽在人体中的药代动力学以及药效动力学两方面更适用于每周一次的给药方案，其有较高的药物稳定性。当索玛鲁肽药物进行皮下注射后，其主要通过如下机理来延长药物的作用时间：一是通过药物蛋白的交联作用使其吸收能够减慢，二是能够与白蛋白结合，同时对DPP-Ⅳ等酶类等具有较为稳定的防止降解的能力，从而能管理具有较长的血浆内半衰期。在2型糖尿病患者中，其临床给药表现为单次给药索玛鲁肽可以检测到胰岛素分泌率以葡萄糖浓度依赖的模式的增加。目前索玛鲁肽作为新型的GLP-1类似物药物，具有较好的半衰期，能够降低糖尿病患者的给药次数，经济负担以及降低患者的给药痛苦。索玛鲁肽作为胰高血糖素肽GLP-1类似物的较为先进的药物之一，在美国地区作为2型糖尿病患者经二甲双胍单药或其他抗糖尿病口服药物治疗失败后的二三本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白质，其特征在于，包含如SEQ ID No.1所述的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质，其特征在于，包含如SEQIDNo.1所述的氨基酸序列。


2.一种编码如权利要求1所述蛋白质的编码基因，其特征在于，包含如SEQIDNo.2所述的DNA序列。


3.一种包含权利要求2所述编码基因的重组载体。


4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，将所述编码基因插入质粒pET-27b(+)相应的酶切位点中。


5.一种包含如权利要求2所述编码基因的重组工程菌。


6.权利要求2所述编码基因在合成索玛鲁肽中间体多肽中的应用。


7.权利要求6中所述的应用，其特征在于，包含如下步骤：
(1)合成编码基因，所述编码基因包含SEQIDNo.2所述的DNA序列；
(2)将编码基因连接到表达载体中；
(3)将带有编码基因的表达载体转化到大肠杆菌中，构建重组工程菌；
(4)重组工程菌发酵诱导表达以包涵体形式存在的串联表达蛋白，所述串联表达蛋白包含SEQIDNo.1所述的氨基酸序列；
(5)菌体破碎收集包涵体、包涵体洗涤、变性和复性；
(6)酶切、分离纯化获得索玛鲁肽前体GLP-1(9-37)...

【专利技术属性】
技术研发人员：文良柱，韩宇鹏，辛中帅，赵珊珊，平康康，陈慧梅，张明义，王玉刚，杨桦，赵梅，
申请(专利权)人：万新医药科技苏州有限公司，江苏万邦医药科技有限公司，江苏万邦生化医药集团有限责任公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32