【技术实现步骤摘要】
基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法
本专利技术涉及生物检测
，具体涉及一种基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法。
技术介绍
胰岛素由胰岛β细胞分泌的内源性激素，由A链和B链通过链间二硫键连接，共含有51个氨基酸。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，缺乏会导致糖尿病，外源性胰岛素可用于糖尿病的治疗。胰岛素的含量对糖尿病的诊断和治疗监测很重要，因此需要建立可靠而且准确的定量胰岛素的检测方法。
技术实现思路
基于现有技术存在上述问题，本专利技术的目的是提供一种基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法，其采用抗体亲和富集生物样品中的重组人胰岛素，通过高分辨质谱仪定量生物样品中完整重组人胰岛素的含量，适用于临床前和临床的血清/血浆样品的定量分析，具有灵敏度高和特异性强的优点。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法，包括如下步骤：步骤S1，采用空白基质配制系列浓度梯度的重组人胰岛素标准品溶液；<...
【技术保护点】
1.基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n步骤S1，采用空白基质配制系列浓度梯度的重组人胰岛素标准品溶液；/n步骤S2，采用内标稀释液配制门冬胰岛素溶液，作为内标工作溶液；/n步骤S3，分别取相同体积的空白样品、系列浓度中的各浓度的重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品，重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品分别加入内标工作溶液，空白样品加入与内标工作液体积相同的内标稀释液；/n步骤S4，活化预包被有胰岛素抗体的载体，并承载空白样品、系列浓度中的各浓度的重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品，富集重组人胰岛素，再使用磷酸缓冲盐溶液和水对载体进行...
【技术特征摘要】
1.基于免疫亲和的重组人胰岛素生物分析的质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1，采用空白基质配制系列浓度梯度的重组人胰岛素标准品溶液；
步骤S2，采用内标稀释液配制门冬胰岛素溶液，作为内标工作溶液；
步骤S3，分别取相同体积的空白样品、系列浓度中的各浓度的重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品，重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品分别加入内标工作溶液，空白样品加入与内标工作液体积相同的内标稀释液；
步骤S4，活化预包被有胰岛素抗体的载体，并承载空白样品、系列浓度中的各浓度的重组人胰岛素标准品溶液和待检测样品，富集重组人胰岛素，再使用磷酸缓冲盐溶液和水对载体进行多次清洗，最后使用含15μg/mL促肾上腺皮质激素，33％乙腈和0.4％三氟乙酸的水溶液洗脱，收集洗脱液；
步骤S5，将步骤S4中获得的各样品进行色谱-质谱分析，并对质谱数据进行分析，定量分析重组人胰岛素。
2.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆剑虹，
申请(专利权)人：上海中科新生命生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
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