一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法技术

本发明专利技术提供一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法，属于精神类药物及代谢物检测技术领域，主要使用9种稳定同位素内标，并针对每一个待检测物质，分别选择一对定量离子对，以其对应保留时间作为定性依据，以标准品制作标准曲线定量，并且应用低、中、高三个水平的质控品考察方法的准确性、有效性，可有效避免基质效应；本发明专利技术提供的检测方法具有样本前处理简单方便、所需样本体积少、灵敏度高、准确度高、及通量高的特点。及通量高的特点。及通量高的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法


[0001]本专利技术属于精神类药物及代谢物检测
，具体涉及一种基于LC
‑
MS/MS技术对人血清中23种精神类药物及代谢物浓度同时定量分析的方法。

技术介绍

[0002]在精神科，过去60年间相继开发出来的可以使用的药物大约有200种,这些药物已经成为治疗精神障碍和精神症状有效且必不可少的药物。治疗药物监测(Therapeutic drug monitoring，TDM)是针对不同患者个体，量体裁衣式地制定给药方案的一种很有效的方法。使用TDM指导精神药物治疗的主要原因是患者在药代动力学方面所存在的显著个体差异。在药物剂量几乎相同的情况下，不同个体的体内稳态药物浓度可以相差20倍以上，其原因可能是患者在共患疾病、年龄、合并用药和遗传特性方面的不同导致的药物在吸收、分布、代谢、排泄方面的差异。同一药物的不同剂型，也会因吸收程度和吸收方式不同，造成体内药物浓度不同。TDM采用定量测定血浆或血清中药物浓度来进行患者个体的剂量滴定，以便获得最佳的疗效、更好的耐受性，同时还可以降低中毒的风险。通过TDM还可以及时发现病人在治疗过程中是否停药、减量或超量服药，帮助病人正确认识服用药物,目前临床上已经有相当数量的精神药物可以根据其血浆浓度来调整用药剂量。
[0003]基于免疫的检测法是最常用的TDM方法，具有准确、快速、方便的特点。其采用待测物抗原与抗体的特异反应，通过酶与底物或荧光标记等方法产生可供检测的化学反应来进行定量测定。然而，当临床待测药物与其他具有类似结构的干扰物一起进行检测时，免疫法则具有一定的局限性。因为药物之间化学结构相似，且有着类似的抗原表区，均可发生抗原抗体反应，采用免疫法较难将其完全区分开，从而导致检测出的药物浓度与实际情况存在偏差，无法较好地预测疗效和评估不良反应。
[0004]近年来，液相色谱串联质谱法(LC
‑
MS/MS)在TDM中被广泛使用，其特异性高、运行时间短并可以同时测定分析多种化学结构。现有方法中，比如中国专利CN111077239A公开的“一种测定人血清中阿立哌唑、氯氮平、氯丙嗪、利培酮和9
‑
OH利培酮药物浓度的方法”和中国专利CN106918675A公开的“一种血浆中利培酮及9
‑
羟基利培酮的检测方法”，大多数通量小，仅能针对一种或几种药物同时测定，极少涉及到几十种，影响了检测的效率。现有部分方法，比如中国专利CN109655568A公开的“高效液质联用同时测定35种精神药物的方法及试剂盒”和中国专利CN109668979A公开的“一种同时检测血液样品中17种抗精神病药物的方法”，采用外标法测定多种药物浓度，不仅存在基质效应，不能准确定量，还会由于检测药物种类过多，造成成本过高，形成资源浪费，不易于大批量临床检测，同时检测多种药物的过程中，灵敏度低下，存在多种目标物灵敏度相对较低的问题，影响检测的准确度，因此要结合临床需求，开发合理的方法。此外，部分方法无法同时检测药物和活性代谢物，有些药物不仅自身具有药理活性，其代谢物也具有与原药相同的药理作用，例如，氯氮平和去甲基氯氮平，阿立哌唑和脱氢阿立哌唑，文拉法辛和O
‑
去甲基文拉法辛，氟西汀和去甲氟西汀，喹硫平和N
‑
脱烷基喹硫平等，因此将药物的活性代谢物也纳入到监测的范围，可以更好
的解释患者血药浓度与治疗效果的相关性。
[0005]总的来说，现有技术中关于精神药物检测的临床检验过程中主要缺陷在于：
[0006]存在基质效应：部分方法仍采用外标法进行药物浓度检测，存在基质效应，不能精准定量，目前大多数LC
‑
MS/MS的方法都采用同位素代替等内标用来校正基质效应等影响，外标法已经被逐渐淘汰。
[0007]检测药物种类不适用临床：检测药物种类单一或过多，检测药物种类单一，通量低，影响了检测的效率，不利于开展更多检测项目；检测药物种类过多，造成成本过高，形成资源浪费，都不易于大批量临床检测。
[0008]线性范围不适宜：现有技术的测量方法中多种药物的线性范围不合理，未经过临床样本的验证，不适合临床检验。
[0009]灵敏度低下：在同时检测多种药物的过程中，存在多种目标物灵敏度相对较低的问题，影响检测的准确度。
[0010]部分方法无法同时检测药物和活性代谢物：有些药物不仅自身具有药理活性，其代谢物也具有与原药相同的药理作用，因此将药物的活性代谢物也纳入到监测的范围，可以更好的解释患者血药浓度与治疗效果的相关性。

技术实现思路

[0011]基于现有技术中存在上述问题，本专利技术提供一种测定人血清样本中23种精神药物及主要代谢物的检测方法，具有样本前处理简单方便、所需样本体积少、灵敏度高、准确度高及通量高的特点。
[0012]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0013]一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法，先对待测人血清样本进行样本前处理，经前处理后的各样本分别进行液相色谱串联质谱检测，同时准确定量分析人血清中23种精神类药物及代谢物；所述精神类药物及代谢物包括利培酮、9
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羟利培酮、奥氮平、喹硫平、N
‑
脱烷基喹硫平、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、氨磺必利、氯氮平、N
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去甲基氯氮平、齐拉西酮、文拉法辛、O
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去甲文拉法辛、左乙拉西坦、拉莫三嗪、奥卡西平、10
‑
羟基卡马西平、氟西汀、去甲氟西汀、米氮平、艾司西酞普兰、舍曲林、度洛西汀的一种或多种；所述的液相色谱串联质谱检测中，质谱采用多反应监测，化合物MRM参数如下：：
[0014][0015][0016]采用ESI离子源、正离子模式分段扫描分析。
[0017]根据以上方案，所述的一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法采用内标法，使用到的稳定性同位素内标物有9种，分别是喹硫平
‑
d8、利培酮
‑
d4、奥氮平
‑
d8、阿立哌唑
‑
d8、氨磺必利
‑
d5、齐拉西酮
‑
d8、氟西汀
‑
d6、西酞普兰
‑
d4和左乙拉西坦
‑
d6。
[0018]根据以上方案，所述的一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法包括以下详细步骤：
[0019]步骤S1，配制系列浓度的校准品溶液、质控品溶液和内标工作液；
[0020]步骤S2，向待测样本加入内标工作液，涡旋混合；
[0021]步骤S3，取步骤S2中混合好的各样本进行离心，离心后取上清液加入稀释液进行稀释，再进行LC
‑
MS/MS分析。
[0022]根据以上方案，所述的步骤S2中，内标工作液为含有内标的甲醇或乙腈溶液，按2
‑
5倍于待测样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法，其特征在于，先对待测人血清样本进行样本前处理，经前处理后的各样本分别进行液相色谱串联质谱检测，同时准确定量分析人血清中23种精神类药物及代谢物；所述精神类药物及代谢物包括利培酮、9
‑
羟利培酮、奥氮平、喹硫平、N
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脱烷基喹硫平、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、氨磺必利、氯氮平、N
‑
去甲基氯氮平、齐拉西酮、文拉法辛、O
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去甲文拉法辛、左乙拉西坦、拉莫三嗪、奥卡西平、10
‑
羟基卡马西平、氟西汀、去甲氟西汀、米氮平、艾司西酞普兰、舍曲林、度洛西汀的一种或多种；所述的液相色谱串联质谱检测中，质谱采用多反应监测，化合物MRM参数如下：
采用ESI离子源、正离子模式分段扫描分析。2.根据权利要求1所述的一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法，其特征在于，其采用内标法，使用到的稳定性同位素内标物有9种，分别是喹硫平
‑
d8、利培酮
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d4、奥氮平
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d8、阿立哌唑
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d8、氨磺必利
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d5、齐拉西酮
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d8、氟西汀
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d6、西酞普兰
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d4和左乙拉西坦
‑
d6。3.根据权利要求1所述的一种测定人血清中23种精神类药物及代谢物的检测方法，其特征在于，其包括以下详细步骤：步骤S1，配制系列浓度的校准品溶液、质控品溶液和内标工作液；步骤S2，向待测样本加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢永明，刘喜艳，王芳，
申请(专利权)人：上海中科新生命生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：