一种化学发光液的应用方法技术

本发明专利技术公开了一种化学发光液的应用方法，包括如下步骤：十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶电泳操作和电转膜操作，将转印好的膜从转膜装置上取下来，利用封闭膜上的非特异结合位点，置于摇床上在室温下震荡封闭1小时或在2‑8摄氏度温度下震荡封闭8小时；用ECL工作液充分覆盖膜后在室温下孵育1分钟；吸弃多余的ECL工作液，将膜置于两层保鲜膜之间，赶走膜与保鲜膜之间的气泡；将膜片吸附蛋白的面朝上置于暗盒中，在暗室中，取出胶片覆于膜表面后进行曝光操作或使用成像系统对所述膜片进行扫描成像。本实施例所提供的化学发光液的应用方法，可用于实现实验中检测辣根过氧化物酶标记的探针或者抗体。

An application method of chemiluminescent liquid

【技术实现步骤摘要】
一种化学发光液的应用方法
本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种化学发光液的应用方法。
技术介绍
目前，临床检验用体外诊断检测试剂领域应用的最为广泛的检测方法，主要是化学发光免疫分析法。化学发光免疫分析法是临床免疫检验技术发展的较高诊断技术，它可以进行定量检测，与放射性免疫分析法和酶联免疫分析法相比，具有放射性免疫分析法和酶联免疫分析法的所有优点，同时克服了放射性免疫分析法和酶联免疫分析法的缺点。其中化学发光免疫分析法所用到的化学发光底物液是最重要的试剂，是限制化学发光检测的关键物质。化学发光底物液的灵敏度、发光值测定范围以及稳定性等显著影响化学发光免疫分析检测。现有技术中的化学发光液及其应用方法，工作液混合后10分钟之内使用，超出该时间后发光值和发光梯度就严重下降，导致检测范围变窄，线性变差，灵敏度降低，不能满足检测需要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种化学发光液的应用方法，包括如下步骤：S1十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳操作和电转膜操作，将转印好的膜从转膜装置上取下来，利用封闭膜上的非特异结合位点，置本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化学发光液的应用方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳操作和电转膜操作，将转印好的膜从转膜装置上取下来，利用封闭膜上的非特异结合位点，置于摇床上在室温下震荡封闭1小时或在2-8摄氏度温度下震荡封闭8小时；/nS2去除闭液，加入一抗工作液，室温下摇晃孵育1小时或2-8摄氏度温度下静置孵育8小时；/nS3用洗膜缓冲液在摇床上震荡漂洗膜4-6次，每次至少5分钟，洗掉一抗工作液；/nS4加入标记辣根过氧化物酶的二抗工作液，在室温下摇晃孵育1小时；/nS5用洗膜缓冲液在摇床上震荡漂洗膜4-6次，每次至少5分钟，洗掉二抗工作液；/nS6用ECL工作液充分覆盖膜后...

【技术特征摘要】
1.一种化学发光液的应用方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳操作和电转膜操作，将转印好的膜从转膜装置上取下来，利用封闭膜上的非特异结合位点，置于摇床上在室温下震荡封闭1小时或在2-8摄氏度温度下震荡封闭8小时；
S2去除闭液，加入一抗工作液，室温下摇晃孵育1小时或2-8摄氏度温度下静置孵育8小时；
S3用洗膜缓冲液在摇床上震荡漂洗膜4-6次，每次至少5分钟，洗掉一抗工作液；
S4加入标记辣根过氧化物酶的二抗工作液，在室温下摇晃孵育1小时；
S5用洗膜缓冲液在摇床上震荡漂洗膜4-6次，每次至少5分钟，洗掉二抗工作液；
S6用ECL工作液充分覆盖膜后在室温下孵育1分钟；
S7吸弃多余的ECL工作液，将膜置于两层保鲜膜之间，赶走膜与保鲜膜之间的气泡；
S8将膜片吸附蛋白的面朝上置于暗盒中，在暗室中，取出胶片覆于膜表面后进行曝光操作或使用成像系统对所述膜片进行扫描成像。


2.如权利要求1所述的化学发光液的应用方法，其特征在于，所述曝光操作包括如下步骤：
S81按照1分钟的时间进行第一次曝光操作的步骤；
S82根据第一次曝光操作的结果评估出第二次曝光时间；
S83按照评估出的第二次曝光时间进行第二次曝光。


3.如权利要求2所述的化学发光液的应用方法，其特征在于，所述将膜片吸附蛋白的面朝上置于暗盒中，在暗室中，取出胶片覆于膜表面后进行曝光操作或使用成像系统对所述膜片进行扫描成像的步骤在孵育完成后30分钟内完成。


4.如权利要求3所述的化学发光液的应用方法，其特征在于，所述S1中所述的电转...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟军，刘阳，
申请(专利权)人：上海循益生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31