一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法技术

一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法，属于生物工程技术领域。其包括以下步骤：将梭热杆菌按照1%的接种量接种到种子培养基中培养；将种子液进行发酵培养，得到发酵液；将发酵液进行固液分离，去除菌体，将滤液进行浓缩，浓缩至原体积的20%，再进行硫酸铵沉淀，得到纤维素酶粗品，然后对它进行凝胶层析进行纯化，干燥后得到耐高温的纤维素酶制剂。

A preparation method of high temperature resistant cellulase

【技术实现步骤摘要】
一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法
本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法。
技术介绍
木质纤维素原料来源广泛，是储量丰富的可再生资源。纤维素酶是一类能够降解纤维素为葡萄糖的一组酶的总称，木质纤维素可以通过纤维素酶水解产生糖，可以直接用于微生物的发酵，能够将纤维素转化为有价值的初级代谢产物，纤维素酶常被应用于食品及饲料工业、造纸工业、医药方面、生物能源等行业，具有良好的应用前景。生产纤维素酶的微生物包括细菌、真菌、放线菌等，在这些微生物中有一种梭热杆菌（细菌的一种），以其高纤维素分解活性而闻名，纤维素降解速率与里氏木霉相当。具有可利用底物广泛，环境适应性强，不易污染等特点，其自身可以产生一种降解纤维素的复杂酶系，包括内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶、半纤维素酶等，是具有积极经济影响的最大潜力的菌株。目前纤维素酶的应用常常受限于其高昂的生产成本，纤维素酶生产成本之所以高昂的原因主要集中在两个方面，首先产纤维素酶的菌株，它的酶活不高，远远达不到生产的要求，所以筛选出高纤维素酶活的菌株是一个关键点。第二点，目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：/n1）将梭热杆菌按照1%的接种量接种到种子培养基中，60℃活化培养，按照同样的方式活化2-3代，继续于种子培养基中培养，得到种子液；/n2）将步骤1）得到的种子液按照2%的接种量接种到发酵培养基中，得到一级种子液，将一级种子液以2.5%的接种量接种到装有发酵培养基的发酵罐中，厌氧培养，罐温控制为40-60℃，调节pH为5.5-8，间歇式搅拌，在发酵开始后的16h-48h时间段内向发酵体系中缓慢添加纤维二糖溶液，流速为0.5-1.5mL/min，上述纤维二糖溶液浓度为150-250g/L，发酵培养48-96h，得到发酵液；/n3）将...

【技术特征摘要】
1.一种耐高温纤维素酶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将梭热杆菌按照1%的接种量接种到种子培养基中，60℃活化培养，按照同样的方式活化2-3代，继续于种子培养基中培养，得到种子液；
2）将步骤1）得到的种子液按照2%的接种量接种到发酵培养基中，得到一级种子液，将一级种子液以2.5%的接种量接种到装有发酵培养基的发酵罐中，厌氧培养，罐温控制为40-60℃，调节pH为5.5-8，间歇式搅拌，在发酵开始后的16h-48h时间段内向发酵体系中缓慢添加纤维二糖溶液，流速为0.5-1.5mL/min，上述纤维二糖溶液浓度为150-250g/L，发酵培养48-96h，得到发酵液；
3）将步骤2）得到的发酵液进行固液分离，去除菌体，将滤液进行浓缩，浓缩至原体积的20%，再进行硫酸铵沉淀，得到纤维素酶粗品，然后进行凝胶层析纯化，干燥后得到耐高温的纤维素酶制剂；
上述种子培养基含有以下组分：纤维二糖5-15g/L，玉米浆5-17g/L，柠檬酸三钾盐0.5-5g/L，一水柠檬酸0.5-2g/L，硫酸钠0.5-1.5g/L，磷酸二氢钾0.5-1.5g/L，碳酸氢钠1-5g/L，氯化铵1-3g/L，尿素2-8g/L，酵母抽提物0.5-1.5g/L，六水氯化镁40-60g/L，四水氯化亚铁0.05-0.2g/L，二水氯化钙0.1-0.3g/L，一水半胱氨酸盐酸盐0.5-2g/L，二盐酸吡哆胺0.01-0.05g/L，对氨基苯甲酸0.002-0.006g/L，D-生物素0.001-0.003g/L，维生素B120.01...

【专利技术属性】
技术研发人员：章亭洲，郎晓红，
申请(专利权)人：浙江科峰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33