【技术实现步骤摘要】
一种人成体神经干细胞的制备方法及其防治脑卒中的用途
本专利技术属于细胞生物学、神经药理学领域，具体涉及一种人成体神经干细胞的制备方法及其防治脑卒中的用途。
技术介绍
我国已进入老龄化社会，老龄化速度已快于总人口增长速度。各种老年病患者人数和比例也呈上升趋势。脑卒中作为中老年人的多见病，在我国已经成为了仅次于心血管病的第二大死亡杀手，严重威胁人类生命健康。目前尚未有防治此类疾病的特效药物，因此开发出具有靶向性、副作用小、能有效控制病情的药物势在必行。神经干细胞(neuralstemcells，NSCs)是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞。近年来，随着干细胞技术的研究和发展，研究人员发现神经系统损伤疾病发生时损伤丢失的神经细胞可以通过移植干细胞来修复，且这种方法十分有效。但是，常规NSCs培养方法最终能获得的细胞数量有限，不能满足临床治疗需要。一方面，要达到对多人的治疗效果，通常需要获得多个胚胎组织样本，如此存在较大的伦理学争议。另一方面，不同样本来源的细胞生物学性状存在差异，由此导致的结果也存在一定的变...
【技术保护点】
1.一种人成体神经干细胞系的建立，其中包括神经干细胞的培养方法和传代方法两个步骤：/n1).神经干细胞条件培养基来源：当神经干细胞培养3-4天约半数神经球直径超过150μm或培养7-9天约半数神经球直径超过250μm时，吸出半量培养基，加入等量的新鲜培养基，放回细胞培养箱继续培养。将上述吸出的培养基，500G/min离心5分钟，上清即为神经干细胞条件培养基，保存4℃备用；/n2).细胞培养瓶预处理：取适量神经干细胞条件培养基孵育新的细胞培养瓶8h，备用；/n3).神经干细胞球的消化与传代：培养7-9天、半数神经球直径超过250μm时，500g/min离心5分钟，再将神经干细...
【技术特征摘要】
1.一种人成体神经干细胞系的建立，其中包括神经干细胞的培养方法和传代方法两个步骤：
1).神经干细胞条件培养基来源：当神经干细胞培养3-4天约半数神经球直径超过150μm或培养7-9天约半数神经球直径超过250μm时，吸出半量培养基，加入等量的新鲜培养基，放回细胞培养箱继续培养。将上述吸出的培养基，500G/min离心5分钟，上清即为神经干细胞条件培养基，保存4℃备用；
2).细胞培养瓶预处理：取适量神经干细胞条件培养基孵育新的细胞培养瓶8h，备用；
3).神经干细胞球的消化与传代：培养7-9天、半数神经球直径超过250μm时，500g/min离心5分钟，再将神经干细胞球重悬于Accutase消化液中，置于37℃水浴消化5分钟，超净台机械吹打15-20下，水浴消化3min，加入胰酶抑制剂终止消化，继续吹打15-20下，可见细胞球变小并多为单细胞，500g/min离心5分钟。取出神经干细胞条件培养基预处理过的细胞培养瓶，吸弃其中的培养基，将神经干细胞基础培养基与条件培养基1∶1混合，之后采用此混合培养基重悬消化后的神经干细胞，并按1∶3传代接种于预处理过的细胞培养瓶，并于CO2细胞培养箱中培养。传代3-4天后，进行半量换液。
4).重复此方法进行神经干细胞的传代和培养，建立稳定的神经干细胞系。
2.根据权利要求1-2任意一项所述的一种神经干细胞系的建立方法，其特征在于，所述神经干细胞培养基由基础培养基、B27、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋修云，安文强，秦娇，刘鹏，汤永永，
申请(专利权)人：北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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