一种交联透明质酸的硫酸软骨素类化合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种交联硫酸软骨素类化合物的制备方法：相转移催化剂存在下，透明质酸钠和EDC·HCl（1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐）溶解于水中，调节pH并搅拌反应；然后加入硫酸软骨素类化合物和EDC·HCl，调节pH至酸性、搅拌反应；对上述溶液进行超滤除杂，获得流出液；调节流出液的pH，加入乙醇获得沉淀，将沉淀洗涤并烘干，得到交联硫酸软骨素类化合物。本发明专利技术制备的交联硫酸软骨素类化合物交联度适宜，具有良好的生物活性，且性质稳定不易降解，能够用于制备硫酸软骨素软膏和类肝素软膏具有消炎抗菌的作用。

A chondroitin sulfate compound crosslinking hyaluronic acid and its application

【技术实现步骤摘要】
一种交联透明质酸的硫酸软骨素类化合物及其应用
本专利技术属于原料药合成领域，具体涉及一种交联透明质酸钠的硫酸软骨素或类肝素及其应用。
技术介绍
硫酸软骨素，简称CS，是一类硫酸化的酸性粘多糖由葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖二糖单位重复组成。硫酸软骨素在人和动物的很多组织器官中都存在，多分布于软骨、韧带、肌腱、角膜等不同组织中。具有一定的抗氧化和清除自由基的作用。类肝素，是一种多硫酸化硫酸软骨素，具有一定的消炎抗菌的作用。市面上常见的硫酸软骨素软膏和类肝素软膏，添加的是硫酸软骨素和类肝素，达到消炎消肿祛疤等效果。但是硫酸软骨素和类肝素容易被酶分解，其中部分硫酸软骨素和类肝素还未到效果就被分解掉了。因此需要开发一种新的产品既具有硫酸软骨素软膏和类肝素的活性，又能够抗酶解。
技术实现思路
针对硫酸软骨素和类肝素使用过程中容易被酶解的问题，本专利技术提供一种交联的硫酸软骨素或类肝素，该交联后的化合物性质稳定、不易降解。本专利技术的另一目的是提供一种交联化合物在医药中的应用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案。一种交联硫酸软骨素类化合物的制备方法，包括以下步骤：（1）相转移催化剂存在下，透明质酸钠和EDC·HCl（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐）溶解于水中，调节pH并搅拌反应；（2）在步骤（1）的溶液中加入硫酸软骨素类化合物和EDC·HCl，调节pH至酸性、搅拌反应；（3）对上述溶液进行超滤除杂，获得流出液；（4）调节流出液的pH，加入乙醇获得沉淀，将沉淀洗涤并烘干，得到交联硫酸软骨素类化合物。所述透明质钠的浓度为0.5-2wt%。所述透明质酸钠的分子量为20-200kDa。所述透明质酸钠和EDC·HCl的摩尔比为1:1-1:1.5。所述透明质酸钠的摩尔数根据透明质酸钠的平均分子量计算。所述透明质酸和相转移催化剂的摩尔比为1:0.25-1:0.5。优选的，所述相转移催化剂选自季铵盐类、季膦盐类，如苄基三乙基氯化铵（TEBA）、四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、四丁基硫酸氢铵（TBAB）、三辛基甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵或四丁基溴化膦。步骤（1）和步骤（2）中，所述pH为3.8-4.0。步骤（1）和步骤（2）中，所述反应温度为20-40℃。所述反应时间为2-3h。优选的，步骤（1）的水中还包括氯化钠；更优选的，所述氯化钠在水中的浓度为2wt%-4wt%。所述硫酸软骨素类化合物与步骤（1）中透明质酸钠的摩尔比为1:0.25-1:0.5。所述透明质酸钠的摩尔数根据透明质酸钠的平均分子量计算。所述硫酸软骨素类化合物包括硫酸软骨素和类肝素。所述硫酸软骨素类化合物与EDC·HCl摩尔比为1:1-1:1.5。所述超滤的条件为采用3kDa-10kDa的超滤膜，压差0.2mPa。步骤（3）中，所述流出液中目标产物浓度为35-45g/L。步骤（4）中，所述乙醇的浓度为90-100wt%。步骤（4）中，所述pH为6.5-7.0。优选的，步骤（4）中，以pH9-10.5的浓度为90-95wt%乙醇调节pH。优选的，步骤（4）中，在调节pH前还包括加入氯化钠的步骤。所述氯化钠的加入量为2wt%-4wt%。一种上述方法获得的交联硫酸软骨素类化合物。所述交联硫酸软骨素的交联度为0.00052mol/g-0.00056mol/g。所述交联类肝素的交联度为0.00034mol/g-0.00039mol/g。所述mol/g是指每克交联硫酸软骨素类化合物中所含的酯基的物质的量。一种上述交联硫酸软骨素类化合物在制备药物中的应用。一种含上述交联硫酸软骨素类化合物的药物。所述药物优选为外用药。本专利技术具有以下优点：本专利技术的制备方法优化了活化反应中的条件，通过添加氯化钠和pH调节透明质酸活化反应体系的粘度和反应速度。在透明质酸钠活化反应过程中，随着反应进行，溶液粘度逐渐增大，加入浓度2-4%氯化钠后可有效降低粘度，有助于反应搅拌继续进行，小于2%或大于4%对粘度降低效果不明显。低于3.8呈凝胶状影响反应速度，大于4时，反应进行不彻底。本专利技术制备的交联硫酸软骨素类化合物交联度适宜，具有良好的生物活性，且性质稳定不易降解，能够用于制备硫酸软骨素软膏和类肝素软膏具有消炎抗菌的作用。附图说明图1是实施例1制备的交联硫酸软骨素/透明质酸的红外谱图；图4是硫酸软骨素的红外谱图（1240cm-1处为S=O伸缩振动）；图3是透明质酸钠（平均分子量200KDa）的红外谱图；图2是实施例2制备的交联类肝素/透明质酸的红外谱图；图5是类肝素的红外谱图（1240cm-1处为S=O伸缩振动）。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受下述实施例的限制。实施例1透明质酸-硫酸软骨素交联物的合成（1）在1000mL蒸馏水中溶解20g氯化钠和5g的四丁基溴化铵备用，在2000mL的反应瓶中称取20g分子量为200kDa的透明质酸钠用上述蒸馏水溶液溶解，再加入10gEDC·HCl完全溶解后调节pH至4.0并在室温下反应3h，每隔15min检测一次pH使其始终维持在4.0；（2）称取20g的硫酸软骨素加入上述反应瓶中溶解，再加入10gEDC·HCl溶解后调节pH至4.0并在室温下反应3h；（3）将上述溶液稀释到10L进行超滤，超滤至溶液为1000mL，再次稀释超滤，超滤三次，获得流出液1000mL；（4）溶液中加入20g氯化钠溶解以利于沉淀，缓慢加入pH10的95%乙醇1000mL调节溶液pH至6.8，缓慢加入95%乙醇至沉淀完全析出；沉淀用80%的酒精洗涤沉淀三次，每次1000mL；再用95%的酒精洗涤沉淀三次，每次500mL；将沉淀烘干得到36g白色粉末，即为交联透明质酸的硫酸软骨素。其红外谱图如图1所示，与硫酸软骨素的红外谱图（图2）相比：在1235cm-1处为S=O伸缩振动，1703cm-1处为酯基吸收峰，说明有交联形成的酯。实施例2透明质酸-类肝素交联物的合成（1）在1000mL蒸馏水中溶解20g氯化钠和5g的四丁基溴化铵备用，在2000mL的反应瓶中称取20g分子量为200kDa的透明质酸钠用上述蒸馏水溶液溶解，再加入10gEDC·HCl完全溶解后调节pH至4.0并在室温下反应3h,每隔15min检测一次pH使其始终维持在4.0；（2）称取20g的类肝素加入上述反应瓶中溶解，再加入10gEDC·HCl溶解后调节pH至4.0并在室温下反应3h；（3）将上述溶液稀释到10L进行超滤，超滤至溶液为1000mL，再次稀释超滤，超滤三次，获得流出液1000mL；（4）将流出液中加入20g氯化钠溶解以利于沉淀，缓慢加入pH10.2的95%乙醇1000mL调节溶液pH至6.8，缓本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种交联硫酸软骨素类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）相转移催化剂存在下，透明质酸钠和EDC·HCl溶于水中，调节pH并搅拌反应；/n（2）在步骤（1）的溶液中加入硫酸软骨素类化合物和EDC·HCl，调节pH至酸性、搅拌反应；/n（3）对步骤（2）获得的溶液进行超滤除杂，获得流出液；/n（4）调节流出液的pH，加入乙醇获得沉淀，将沉淀洗涤并烘干，得到交联硫酸软骨素类化合物。/n

【技术特征摘要】
1.一种交联硫酸软骨素类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）相转移催化剂存在下，透明质酸钠和EDC·HCl溶于水中，调节pH并搅拌反应；
（2）在步骤（1）的溶液中加入硫酸软骨素类化合物和EDC·HCl，调节pH至酸性、搅拌反应；
（3）对步骤（2）获得的溶液进行超滤除杂，获得流出液；
（4）调节流出液的pH，加入乙醇获得沉淀，将沉淀洗涤并烘干，得到交联硫酸软骨素类化合物。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述硫酸软骨素类化合物包括硫酸软骨素和类肝素。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述透明质钠的浓度为0.5-2wt%；所述透明质酸钠和EDC·HCl的摩尔比为1:1-1:1.5；所述透明质酸和相转移催化剂的摩尔比为1:0.25-1:0.5；所述硫酸软骨素类化合物与透明质酸钠的摩尔比为1:0.25-1:0.5；所述硫酸软骨素类化合物与EDC·HCl摩尔比为1:1-1:1.5。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述相转移催化剂选自季铵盐类、季膦盐类；优选为苄基三乙基氯化铵、四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、三辛基甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵或四丁基溴化膦。


5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢仕杰，朱伟伟，张建勇，张新庆，刘英豪，王咏梅，尤加宇，相茂功，王新志，申加秋，王斌，王勇，
申请(专利权)人：山东众山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37