从管萼山豆根中制备苦参碱的方法技术

本发明专利技术提供一种从管萼山豆根中制备苦参碱的方法，包括以下步骤：取管萼山豆根粉碎，加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；滤渣Ⅰ加入5～10％黑曲霉液室温发酵3～8天，再加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅱ；滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，减压浓缩，用两倍至四倍体积的乙酸乙酯萃取，得水相；将水相pH调至7.5～8，用两倍至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇相；将丁醇相浓缩，上ADS‑7柱，用四倍至六倍柱体积的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ；将洗脱液Ⅰ浓缩，在4～8℃下过夜结晶，过滤得苦参碱产品。

The method of preparing matrine from the root of calyx Vetiver

【技术实现步骤摘要】
从管萼山豆根中制备苦参碱的方法所属
本专利技术涉及一种从管萼山豆根中制备苦参碱的方法，属于天然产物制备的

技术介绍
管萼山豆根是豆科山豆根属植物,又名鄂豆根、胡豆莲、豆根、鸦片七(湘西地区)。山豆根属植物含有生物碱类,黄酮类,甾体类,挥发油等成分。该属植物含有多种黄酮类化合物,目前已从该属植物中得到86个,其中一种为黄酮苷,其余均为黄酮苷元。从管萼山豆根的根中分离得到13种黄酮类化合物,包括6种山豆根素(euchretinA～E,I)和7种山豆根酮(euchrenonea1,a4,a14,a15,b2,b16,b17)。从该属植物中分离得到的生物碱有14个,李若存等从管萼山豆根中分离得到苦参碱,氧化苦参碱和金雀花碱,但仅用化学及红外光谱法分析鉴定,并未使用更精确的核磁共振法(NMR)。其他：包括4种甾体,40种挥发油类及其香豆素等,其中管萼山豆根中分离得到一种香豆酮benzofuran。山豆根属植物的药用价值在国内外均享有盛誉,日本民间用山豆根治疗溃疡、消炎、抗癌、抗心律不齐；在爪哇岛,Euchrestahorsfieldii的种子被用作补肾药。在我国武陵山区的土家族将管萼山豆根誉为“信誉极高的民族药”,该属植物具有较强的清热、镇痛、消炎和抗癌等作用,对治疗咽喉痛、牙痛、胃腹痛、毒虫咬伤等有良好疗效。另外,朱允翠等报道,以管萼山豆根为主药,制成烧伤涂药,应用于临床,效果令人满意。药理研究表明,该属植物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗血小板聚集、抗HIV、中枢抑制、调血脂等活性。公开号为CN103630630A的中国专利公开了一种山豆根药材中苦参碱的含量测定方法，其特征在于：(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以异丙醇:乙腈:0.1％磷酸(74:18:8)为流动相；检测波长为210nm；理论板数按苦参碱峰计算应不低于2000；(2)对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含苦参碱20μg溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品粉末约0.5g，过三号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％乙醇50ml，密塞，称定重量，放置30分钟，超声处理30分钟，功率250W，频率40kHz，再称定重量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml与10％亚硫酸氢钠溶液5ml混合，涡旋震荡5min，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。公开号为CN103739602A的中国专利公开了一种苦参碱的提取方法，包括以下步骤：(1)苦参碱分子印迹的制备：将1-1.5mmol苦参碱与6mmol甲基丙烯酸溶解在5-10ml氯仿中，置于0℃下保持30min，然后加入15-30mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯与15-30mmolN-异丙基丙烯酰胺和40-100mg偶氮二异丁腈，混合后，通入氮气，搅拌至完全溶解，通氮气10min，封口，在65℃条件反应直至聚合完全，粉碎，过200目筛，用甲醇：乙酸(9：1)洗脱苦参碱，装载固相萃取柱；(2)苦参碱溶液的提取：将山豆根药材以水作为提取媒介，超声提取，再将提取液过50nm超滤膜；(3)苦参碱分子印迹固相萃取柱对苦参碱的提取分离：将过膜后的提取液加热至50℃，加载在固相萃取柱上，先用50℃水洗脱杂质，再用25℃水洗脱苦参碱。公开号为CN107400133A的中国专利公开了一种从山豆根中制备高纯度苦参碱的方法，具体操作如下：将山豆根粉末加入超声提取器中，加入适量还原剂和乙醇，还原剂与山豆根粉的质量比为0.08～0.1:1，乙醇与山豆根粉的质量比为10～20:1，浸置30min～60min后，超声功率300W，温度60～80℃，超声还原30～60min，提取4次，合并提取液，料渣弃去，提取液浓缩；浓缩液静置过夜后过滤，以除去淀粉类杂质和部分鞣质和蛋白质，滤液经H103、SP825、X-5或D101大孔树脂静态吸附后，用乙醇洗脱，洗脱液浓缩至干，用水溶解，水溶液用浓盐酸或浓硫酸、酸化至pH值＝3～4或2～3，生物碱成盐而溶于酸水溶液中，部分低极性物质不溶于水而析出，过滤，滤液用石油醚萃取以除去油脂、蜡与树脂杂质。弃去石油醚层，分离出酸水层。.酸水层用氢氧化钠或氢氧化钾碱化至pH值＝8～9、9～10或10～10，使苦参碱成为游离状态；碱水层加石油醚热回流萃取多次，直到碱水层无苦参碱检出为止。萃取液浓缩至10倍药材体积，静置结晶，得苦参碱精品，纯度97.9％～98.5％；所述还原剂为焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠或碘化钾；所述乙醇的浓度为体织浓度30％～80％。
技术实现思路
本专利技术提供一种从管萼山豆根中制备苦参碱的方法，包括以下步骤：(1)取管萼山豆根粉碎，加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；(2)滤渣Ⅰ加入5～15％黑曲霉液室温发酵3～8天，再加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅱ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；(3)滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/30～1/60，用两倍至四倍体积的乙酸乙酯萃取，得水相；(4)将水相pH调至7.5～8，用两倍至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇相；(5)将丁醇相在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/10～1/30，上ADS-7柱，用四倍至六倍柱体积的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ，其中乙醇溶液是指60～80％乙醇水溶液；(6)将洗脱液Ⅰ在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/10～1/30，在4～8℃下过夜结晶，过滤得苦参碱产品。所述步骤(1)、(2)中加入乙醇溶液为60～80％乙醇水溶液，还含有0.01～10mmol/L盐酸。所述过滤为陶瓷膜过滤1次，膜孔孔径大小为0.22μm。所述步骤(2)加入加入黑曲霉液的量，按体积L/管萼山豆根重量kg比为5～10:100；技术效果1、通过黑曲霉发酵转化与高效释放苦参碱，提高其产率，降低了苦参碱的生产成本。2、节省管萼山豆根资源，降低了环境污染排放。具体实施方式下面，本专利技术将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。实施例1取管萼山豆根的叶片100kg粉碎，加入300L乙醇溶液进行85℃高温浸提3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；滤渣Ⅰ加入15L黑曲霉液室温发酵6天，再加入200L乙醇溶液进行85℃高温浸提3h，过滤得滤液Ⅱ；滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，在60℃下减压浓缩到10L，用30L乙酸乙酯萃取，得水相；将水相pH调至8，用20L丁醇进行萃取，得丁醇相；将丁醇相在60℃下减压浓缩到1L，上ADS-7柱，用70％乙醇水溶液进行洗脱，得12L洗脱液Ⅰ；将洗脱液Ⅰ在60℃下减压浓缩到0.8L，在4～8℃下过夜结晶，过滤得368g苦参碱产品。HPLC检测：色谱柱为BostonGreenOD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从管萼山豆根中制备苦参碱的方法，包括以下步骤：/n(1)取管萼山豆根粉碎，加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；/n(2)滤渣Ⅰ加入5～10％黑曲霉液室温发酵3～8天，再加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅱ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；/n(3)滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/30～1/60，用两倍至四倍体积的乙酸乙酯萃取，得水相；/n(4)将水相pH调至7.5～8，用两倍至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇相；/n(5)将丁醇相在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/10～1/30，上ADS-7柱，用四倍至六倍柱体积的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ，其中乙醇溶液是指60～80％乙醇水溶液；/n(6)将洗脱液Ⅰ在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/10～1/30，在4～8℃下过夜结晶，过滤得苦参碱产品。/n

【技术特征摘要】
1.一种从管萼山豆根中制备苦参碱的方法，包括以下步骤：
(1)取管萼山豆根粉碎，加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；
(2)滤渣Ⅰ加入5～10％黑曲霉液室温发酵3～8天，再加入乙醇溶液进行80～90℃高温浸提1～3h，过滤得滤液Ⅱ，其中加入乙醇溶液的量L与管萼山豆根重量比为1～3：1；
(3)滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并，在50～70℃下减压浓缩到原有体积的1/30～1/60，用两倍至四倍体积的乙酸乙酯萃取，得水相；
(4)将水相pH调至7.5～8，用两倍至四倍体积丁...

【专利技术属性】
技术研发人员：董爱文，姚姝凤，成江，
申请(专利权)人：长沙湘资生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43