从植物山豆根中提取治疗肝炎用药的方法技术

本发明专利技术是关于从山豆根中提取治疗肝炎用药的方法，山豆根广泛应用于临床治疗多种疾病，但用于治疗慢性活动性肝炎尚无满意效果，现有从山豆根中提取肝炎用药的方法，乙醇耗量大，制剂的质量和疗效不稳定，所含杂质较多，易产生沉淀．本发明专利技术的方法是，将山豆根切片、煎煮、浓缩、酒沉、溶剂萃取、酸沉、冷藏、析出沉淀、滤除．即能得到一种能贮存二年以上，质量稳定，澄明度好，毒性小，安全度大的注射液，用于治疗慢性活动性肝炎４５６例有效率９２．３２％，显效率５７．８４％，疗效十分显著．Ｃ１２Ｒ１：１９）（*该技术在2005年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于从植物山豆根中提取治疗肝炎用药的方法。山豆根（Sophora    tonkinensis    Gagnep）生长于温暖地区石山、树下的常绿小灌木，其根具有特异的臭气，苦味显著。成份经研究认为含有苦参碱（Matrine）、氧化苦参碱（Oxyma-trine）、金雀花碱（Cytisine）等生物碱;黄酮体2，4，7-trihydroxy-5methoxy-8（5-methyl-2-isopropenylhexy1-4-vinyl）flavanone、Sopho-radin;紫檀素体和Coumestan的衍生物三叶豆紫檀素（Tri-folirhizin）、左旋（或右旋）高丽槐素l（或d）-maa-ckiain等物质。据《本草纲目》记载，山豆根能解咽喉肿毒，临床广泛应用于治疗扁桃体炎、胃肠炎、以及细菌性痢疾、官颈糜烂和钩端螺旋体等疾病。存在于山豆根中的各种成份不少具有强烈的生理活性。日本新田氏通过药理试验，证明山豆根对大鼠腹水型、结节型的吉田肉瘤和腹水癌有抑制作用，其疗效达60%以上。用于人体肿瘤的治疗，亦获得不同程度缓解。据《Chem.Pharm.Bull》18，2555（1973）报道山豆根中的单体苦参碱和氧化苦参碱，具有较强的抗癌作用。1975年以来，我们曾先后与解放军总医院和广西医学院合作，应用山豆根治疗膀胱癌、肝癌和其它肿瘤时，发现山豆根有降低血清谷丙转氨酶和保护肝脏的作用。但应用山豆根治疗慢性活动性肝炎尚无满意的效果。以往从山豆根中提取治疗肝炎用药的方法，就是采用传统的中草药制剂的制备方法：将山豆根煎煑，水煎液浓缩、多次酒沉、回收乙-->醇、冷藏、滤除沉淀、用10%氢氧化钠液调节PH值至中性，加入助溶剂配制即成。但这种方法所需乙醇量大，能源消耗多，成本高，而制备出的制剂澄明度差、质量低、不稳定、贮藏期短，一般不到半年就产生沉淀，致使制剂失效、报废。因此，迫切需要专利技术一种从山豆根中提取治疗肝炎用药的可靠的、安全的、实用的方法。本专利技术的目的，就是为了克服上述不足，在反复研究的基础上产生的一种治疗肝炎有显著效果的药物;和创造一种从山豆根中提取治疗肝炎用药的新方法。本专利技术的制备方法如附图所示：<一>煎煑把山豆根切片放入煎煑锅中，再加入为切片重量3～4倍的水，煑沸或使蒸汽直接与药液接触加热至沸腾，煎煑三小时，倾出药液。再按上述方法，重复一次，只是加入水量仅为切片量的2～3倍，煎煑时间为二小时。将药液合并，滤过，弃药渣。<二>浓缩药液置薄膜浓缩器中，或用带蒸汽盘管的蒸发器浓缩，浓缩到药液比重为1.20～1.25。<三>酒沉将浓缩药液，在搅拌情况下，加到95度的乙醇中，致使整个药液含醇量达60～75度。加入的方法也可边搅拌边将乙醇加入浓缩药液中，但这样，高浓度的乙醇溶液与药液接触，马上会凝结成团块，影响酒沉的效果，致使有效成份损失10%左右。含乙醇的药液于4～10℃冷藏、静置48小时，过滤，沉淀用60～75度乙醇洗涤两次，洗液与滤液合并后，于60℃、720～740毫米汞柱压力下，减压蒸餾，回收乙醇，药液浓缩成糖浆状。-->边搅拌边加于95度的乙醇中，使整个药液含醇量达85～90度。继于4～10℃冷藏、静置48小时，过滤，沉淀用85～90度乙醇洗涤两次，洗液与滤液合并后，于60℃，720～740毫米汞柱压力下，减压蒸餾，回收乙醇，直至餾出液无乙醇味止，再加入等量的蒸餾水稀释药液。<四>杂质分离至此，药液中尚含有少量其它杂质（包括沉淀及脂溶性物质），若不除去会直接影响到制剂的质量和药用效果，使贮存期缩短，容易变质乃至产生沉淀。本专利技术除杂质的方法是，在常温下，把重量为药液重量三分之一的醋酸乙酯、或氯仿、石油醚之类的有机溶剂加入到药液中，由于醋酸乙酯具有沸点低、毒性小、安全、经济易得等特点，所以最好采用醋酸乙酯，搅拌萃取三次，时间为每次4～5分钟，静置分层。酯溶性等杂质均转溶于醋酸乙酯层而被分离除去。<五>酸沉分层后的药液，加热挥发掉残存的醋酸乙酯，再加入为药液一倍量的蒸餾水，用稀盐酸调PH为1～3，于4～10℃冷藏一周，滤除沉淀。<六>含测、配制采用比色法测定＊药液中总生物碱的含量。再用10%氢氧化钠溶液，调节药液的PH值为7.1～7.2，加助溶剂吐温-80，用量为总量的1%（W/V），最后加入计算量的注射用水，使生物碱含量为17.5mg/ml。即得治疗慢性活动性肝炎用的制剂。＊比色测定法：本品所含的山豆根总生物碱（包括苦参碱），在PH7.6缓冲液中，与溴麝香草酚兰形成离子对（Ion    Pair）结合，並定量被氯仿提取，用以比色测定，结果较准确，重现性好。-->毒性实验结果：用本专利技术方法制备的制剂，经药理实验表明：对小鼠和大鼠肌肉注射的LD50分别为176.7±19.47mg/kg与222.51±40.05mg/kg。小鼠一次腹腔注射LD50为108.3±4.87mg/kg。狗的亚急性毒性（大剂量为14mg/kg，小剂量为3.5mg/kg，每日一次肌肉注射，连续28天）及慢性毒性试验（剂量、注射方式均同亚急，连续180天）表明，动物的外观、行为、血象、肝、肾功能与心电图均无明显变化。心、肝、肾、肺、脾等脏器肉眼观察及病理学检查均未见异常。对小鼠、大鼠的生长发育无影响。无明显积蓄作用。临床实验广西医学院、上海第二医学院附属瑞金医院、天津市第一医院等十二个临床单位应用本专利技术方法制备的制剂（以下简称肝炎灵）进行临床治疗，情况如下：1>病例选择及分组参照1978年全国病毒性肝炎会议的诊断标准，收治慢性活动性肝炎病人。随机分成两组：肝炎灵治疗组（456例）和水飞蓟、黄岑甙、复方垂盆草、益肝灵为对照组（171例）。肝炎灵治疗组中男384例，女72例。HBSAg阳性者占326例，阴性者130例。平均年龄33.1岁。病程1～13年。2>治疗方案肝炎灵注射液2毫升（含生物碱35毫克），肌肉注射，每日二次。2或3个月为一疗程;对照组用水飞蓟、复方垂盆草、黄岑甙、益肝灵，按规定剂量治疗2～3个月。患者治疗前均经全面体检及肝功能、旦白电泳、HBSAg、抗--->HBs、HBeAg、抗-HBe、lgG、lgA、lgM的检查。治疗过程中每半月至一月、二月，复查一次，并按观察记录表记录。3>疗效标准（1）显效：症状消失，肝脾不同程度的缩小或不变，肝功能基本正常（SGPT达到正常值，即改良赖氏法在25U以内，其它TTT、ZnTT、r球旦白下降较明显）。（2）好转：症状明显好转，体征有所改善或不变，肝功能有不同程度的好转（SGPT比治疗前下降50%以上）。（3）无效：未达以上标准者。4>治疗结果证明肝炎灵具有显著疗效。与其它药物相比，显示了一定的优越性。根据本专利技术所描述的从山豆根中提取治疗肝炎用药的方法，是一-->种经济、合理的方法，能减少乙醇的用量，降低制备过程中的能量消耗，山豆根有效成份利用率高。特别是采用本法所制备的治疗肝炎用的注射液，质量和疗效稳定。贮存两年以上不产生沉淀，澄明度好。经动物的急性毒性、亚急性毒性以及慢性毒性试验表明：本专利技术的制剂毒性小、安全度大，经临床应用于456例慢性活动性肝炎病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从山豆根中提取治疗肝炎用药的方法。本专利技术的特征是，把山豆根切片，加水煎煮两次，过滤，滤液浓缩成稠液，用乙醇沉淀，过滤，滤液回收乙醇得稠液，再用乙醇沉淀，过滤，滤液回收乙醇。药液继用有机溶剂萃取三次，回收萃取剂。调节药液ＰＨ值至酸性，冷藏，析出沉淀，滤除、含测、配制、精滤、灌封、灭菌。

【技术特征摘要】
1、一种从山豆根中提取治疗肝炎用药的方法。本发明的特征是，把山豆根切片，加水煎煮两次，过滤，滤液浓缩成稠液，用乙醇沉淀，过滤，滤液回收乙醇得稠液，再用乙醇沉淀，过滤，滤液回收乙醇。药液继用有机溶剂萃取三次，回收萃取剂。调节药液PH值至酸性，冷藏，析出沉淀，滤除、含测、配制、精滤、灌封、灭菌。2、根据权力要求1，本发明的特征是，有机溶剂为氯仿、醋酸乙酯、石油醚等等。3、根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡楚伧，钱秀丽，
申请(专利权)人：广西壮族自治区天然药物研究中心，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]