本发明专利技术公开了山豆根提取物抗肿瘤有效组分提取物及其制备方法，该提取物通过水提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40%～95%乙醇于80℃水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯萃取提取液，乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为50∶1比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得山豆根抗肿瘤有效组分提取物。本发明专利技术的山豆根抗肿瘤有效组分提取物，在体外细胞毒实验中，具有明显的抑制U251（胶质瘤细胞）的作用，可以用于制备抗肿瘤药物。本发明专利技术公开了其制法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及山豆根抗肿瘤有效组分提取物及其制备方法和用途。
技术介绍
目前由于环境污染的加剧，生活节奏的加快，生活压力的增大，癌症的发生率处于上升的趋势，据世界卫生组织最新数据显示，到2020年前，全球癌症发病率将增加50%，寻找有效的抗肿瘤药物与方法，彻底攻克肿瘤，是世界医学界重要的研究课题。近几年，我国癌症发病率以每年2. 5%的速度增加，所以加快抗癌药物的研究显得更为紧迫。近些年来，中药抗肿瘤制剂成为新药研发的热点，其中既有中药提取的有效成分、有效部位制剂，也有传统的中药复方制剂。 山豆根为豆科植物越南槐Sophorae tomkinensis Gapnep.的干燥根及根莖,主要分布于广西、贵州、广东、江西等省，别名山大豆根、苦豆根。药性苦寒，有毒，归肺胃经，具有清火、解毒、消肿、止痛之功效。山豆根在临床上多用于咽喉肿痛、牙龈肿痛、病毒性肝炎、湿热黄疸等多种疾病的治疗。研究表明，山豆根主要含生物碱、黄酮及多糖类成分。目前从山豆根分离得到生物碱类成分有20多种，以苦参碱、氧化苦参碱为主，还有少量的臭豆碱、金雀花碱、槐氨、槐醇槐、果碱、甲基金雀花碱、氧化槐果碱等[参见窦金辉，李家实，阎文玫.山豆根生物碱成分的研究[J].中国中药杂志，2006，(19)5:40]。从山豆根中分离得到的黄酮有高丽槐素、槲皮素、柔枝槐酮、柔枝槐素、红车轴草苷、紫檀素、料木素、芒柄花素、金雀异黄素、山槐素、光甘草酚、槐定、槐多色烯、槐酮，baying等[参见邓银华，徐康平，章为等.山豆根化学成分研究[J].天然产物研究与开发，2005，17 (2): 172]。此外，从山豆根还分离得到的多糖组分有 8 种，分别为 SSa-1，SSa-2，SSa_3，SSb-1 FA, SSb-2, SSb-3, SSc_l，它们分属于淀粉、类淀粉、半纤维素、果胶，其中淀粉的含量最多，其次为果胶类多糖[参见董群，方积年.山豆根多糖的性质和化学组成[J].中国药学杂志，2001，(36)2:85]。已有动物实验表明，山豆根提取物对在体肿瘤生长有较好的抑制作用，其水提物能抑制多种肿瘤生长[参见Chui C H, Lau F Y, Tang J C，et al. Activities offreshjuice of Scutellaria barbata and warmed water extract of Radix SophoraeTonkinensison ant1-proliferation and apotosis of human cancer cell line[J].1nt J MolMed，2005，16(2):337]。苦参碱对人胰腺癌、肝癌、肺癌、恶性黑色素癌等多种癌细胞株均有抑制和杀伤作用[参见Liu T, Song Y，Chen H，et al. Matrineinhibitsproliferation and induces apoptosis of pancreatic cancer cells in vitroand in vivo [ j] . Biol Pharm Bull，2010，33 (10) : 1740] 氧化苦参碱对人结肠癌、食管癌等多种癌细胞株亦有杀伤作用[参见Zou Jj Ran Z H，Xu Q，et al. Experimental studyofthe killing effects of oxymatrine on human colon cancer cell line SW1116[J].Chin JDig Dis，2005，6 (I) : 15.]。此外，姚仲青等通过建立小鼠肉瘤S180、肝癌H22、艾氏实体型肿瘤(ESC)模型，从整体水平观察山豆根总生物碱对肿瘤生长的影响，结果表明，山豆根总生物碱具有一定的体内抗肿瘤作用，但肿瘤抑制率不高，且在用药过程中发现动物有抽搐惊厥现象[参见姚仲青，朱虹，王光凤.山豆根总生物碱抗肿瘤作用的初步研究[J].南京中医药大学学报，2005，21 ⑷253]。中国专利申请号CN200610136992.6《一种山豆根提取物的精制工艺》公开了一种山豆根提取物的精制工艺，该工艺是采用二次柱色谱法进行分离提纯，收集40 60%乙醇洗脱液作为山豆根提取物。专利申请号CN200910054292.6《山豆根总黄酮及黄酮盐及其制备方法》涉及山豆根总黄酮及黄酮盐及其提取方法。该提取方法是山豆根原料先用无机酸或有机酸水溶液提取，提取后的残留物再用有机溶剂或无机碱溶液提取，得到总重量计80%总黄酮的山豆根总黄酮及黄酮盐产物。以上专利均只涉及山豆根的部位提取，未涉及活性成分的筛选和抗肿瘤部分的制法。专利申请号CN200710123268. 4《一种山豆根的有效组分及其制备方法与用途》涉及一种山豆根的有效组分及其制备方法与用途，该专利技术的山豆根有效组分，用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对山豆根进行提取，然后将提取液经过色谱柱层析得洗脱液，再用制备液相色谱梯度洗脱，得到有效组分。该专利提取剂与本专利技术不同，亦未见提取物针对对U251细胞的体外抗肿瘤实验。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是，提供山豆根抗肿瘤有效组分提取物及其制备方法。本专利技术的目的之二是，提供所说有效组分提取物在制备抗肿瘤及相关药物中的应用。本专利技术的技术方案如下一种山豆根抗肿瘤有效组分提取物，它是由山豆根粉碎后，用水于90-100°C加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40% 95%乙醇于80°C水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯萃取提取液，乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为50 I比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得山豆根抗肿瘤有效组分提取物。一种制备上述山豆根抗肿瘤有效组分提取物的方法，它包括如下步骤步骤1:将山豆根粉碎，用水回流提取，冷却，离心，浓缩提取液，用95%乙醇进行醇沉，离心除去沉淀，浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40% 95%乙醇于80°C水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；步骤2 :将步骤I的提取液依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为50 I比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得山豆根抗肿瘤有效组分提取物。本专利技术进一步提供了山豆根抗肿瘤有效组分提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。以抑制U251增殖能力为活性指标进行抗肿瘤活性实验。实验结果表明，在体外细胞毒性实验中，可以明显抑制U251的增殖，具有细胞毒性作用，可用于制备抗肿瘤治疗药物。有益效果(I)本专利技术首次发现山豆根水提液的乙酸乙酯萃取液具有抗肿瘤活性，并首次在U251 (胶质瘤细胞)上进行药效筛选，证明其具有体外抑制U251生长的活性，适宜开发成抗肿瘤中药新药。(2)本专利技术拓展了抗肿瘤药物的原料渠道，扩大了山豆根的用途，使山豆根发展成为抗肿瘤药物的新原料，可显著提高山豆根的附加值。具体实施例方式以下所列实施例有助于本领域技术人员更好地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。实施例1.山豆根抗肿瘤有效组分提取物的制备 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种山豆根抗肿瘤有效组分提取物，其特征是：它是由山豆根粉碎后，用水于90?100℃加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40%～95%乙醇于80℃水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯萃取提取液，乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷?甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为50∶1比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得山豆根抗肿瘤有效组分提取物。
【技术特征摘要】
1.一种山豆根抗肿瘤有效组分提取物，其特征是它是由山豆根粉碎后，用水于 90-100°C加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40% 95%乙醇于80°C水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯萃取提取液，乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为50 I比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得山豆根抗肿瘤有效组分提取物。2.一种制备权利要求1所述的山豆根抗肿瘤有效组分提取物的方法，其特征是它包括如下步骤步骤1:将山豆根粉碎，用水回流提取，冷却，离心，浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：余江南，郭林丰，徐希明，童姗姗，张辉云，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：
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