【技术实现步骤摘要】
一种三维培养扩增造血干细胞的方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种造血干细胞的扩增方法。
技术介绍
造血干细胞是最早应用于临床治疗的一种干细胞，其表面特异性表达CD34标志物，用于治疗恶性血液型疾病、免疫缺陷综合征、地中海贫血、严重创伤等疾病，均获得了良好的治疗效果。造血干细胞的来源广泛，可以从骨髓、外周血、脐带中获得，但是其绝对数量较少，如一个婴儿的脐血造血干细胞通常只能满足儿童和低体重成人患者，难以满足成人移植的需要。为了扩大造血干细胞的移植范围，需要对造血干细胞进行体外扩增，以产生足量的造血干细胞促进成人移植后中性粒细胞和血小板的恢复。因为造血干细胞是CD34+细胞，在培养扩增时可以通过两种形式：直接分离出单核细胞中的CD34+细胞进行培养扩增，或者培养扩增单核细胞来增加其中造血干细胞数量。目前常规的体外扩增造血干细胞的方法多为二维培养，使用高剂量多细胞因子联合培养，或者使用滋养层细胞（包括间充质干细胞、AGM区细胞等）与多细胞因子联合培养，这些方法具有明显的局限性：二维培养方式下，细胞丧失了在体特性，...
【技术保护点】
1.一种三维培养扩增造血干细胞的方法，其特征在于，实现此专利技术主要包括以下步骤：（1）提供滋养层细胞，从人来源的脐带、脂肪、骨髓中分离得到间充质干细胞，（2）微囊化包埋滋养层细胞，（3）分离人脐血单核细胞，从健康产妇足月分娩的婴儿脐带中采集原血并分离获得单核细胞，检测其中CD34+细胞比例，（4）分选CD34+细胞，从已分离的单核细胞中通过细胞分选获得CD34+的造血干细胞，（5）在搅拌式生物反应器中，三维共培养微囊化滋养层细胞与人脐血单核细胞（或造血干细胞），（6）分离脐血单核细胞（或造血干细胞）和微囊，收获造血干细胞。/n
【技术特征摘要】
1.一种三维培养扩增造血干细胞的方法，其特征在于，实现此发明主要包括以下步骤：（1）提供滋养层细胞，从人来源的脐带、脂肪、骨髓中分离得到间充质干细胞，（2）微囊化包埋滋养层细胞，（3）分离人脐血单核细胞，从健康产妇足月分娩的婴儿脐带中采集原血并分离获得单核细胞，检测其中CD34+细胞比例，（4）分选CD34+细胞，从已分离的单核细胞中通过细胞分选获得CD34+的造血干细胞，（5）在搅拌式生物反应器中，三维共培养微囊化滋养层细胞与人脐血单核细胞（或造血干细胞），（6）分离脐血单核细胞（或造血干细胞）和微囊，收获造血干细胞。
2.根据权利要求1所述的三维培养扩增造血干细胞的方法，其特征在于，所述滋养层细胞包括脐带、骨髓、脂肪来源的间充质干细胞。
3.根据权利要求1所述的三维...
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