一种鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三价卵黄抗体的制备方法技术

本发明专利技术属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三价卵黄抗体的制备方法。本发明专利技术提供的三价卵黄抗体是利用鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三联灭活疫苗免疫鸡，制得高免鸡蛋，经过研磨破碎，混合搅拌，并对收集到的上清液进行纯化、浓缩、无菌处理制得。按照本发明专利技术方法制得的三价卵黄抗体，性质稳定、效价活性强，适合呼肠孤病毒、细小病毒和星状病毒三价精制卵黄抗体的大规模制备。

Preparation of trivalent yolk antibody against duck reovirus, Duck Parvovirus and duck stellate virus

【技术实现步骤摘要】
一种鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三价卵黄抗体的制备方法
本专利技术属于兽用生物制品
，具体涉及一种鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三价卵黄抗体的制备方法。
技术介绍
鸭呼肠孤病毒(DRV)、鸭细小病毒和鸭星状病毒(DAstv)目前是世界上的研究热点，对鸭、鹅均具有致病性，主要病变表现为脾脏坏死和肝脏出血，该病可直接引发养15日龄以内的雏鸭和雏鹅出现30％以上的死亡率，此外其临床上也常常与鸭疫李默是杆菌，大肠杆菌和星状病毒等并发感染，导致鸭和鹅出现明显呼吸道病，关节炎，及严重的产蛋下降及畸形蛋等问题。因此目前该病已经成为严重影响养鸭和养鹅产业的重大疫病之一。卵黄抗体是指从免疫禽蛋中提取的针对特定抗原的抗体，由于卵黄中仅有IgG类抗体，因此称其为卵黄免疫球蛋白IgG(yolkantibody)，简称为IgY。当机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的B细胞分化成为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体(主要是IgG)在卵细胞中逐渐蓄积，形成卵黄抗体，IgG移行进入卵细胞是受体作用的结果，因而Ig本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三价卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、利用鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三联灭活疫苗免疫100日龄的海兰褐鸡，获得高免鸡蛋，去蛋清，用75％酒精进行表面消毒，得高免鸡蛋蛋黄；/nS2、收集步骤S1获得的高免鸡蛋蛋黄，去除卵黄膜和系带后利用胶体磨进行破碎，得蛋黄液；/nS3、将步骤S2得到的蛋黄液与0.1mol/L的pH为7.2～7.4的醋酸盐缓冲溶液以1：6～8的体积比混合，然后向其中加入总体积0.05～0.1％的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯，搅拌混合均匀，然后加入总体积0.3～0.5％的β-环糊精，充分搅拌，4℃静置1～2h，充分平衡后在4℃，4000r/m...

【技术特征摘要】
1.一种三价卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、利用鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三联灭活疫苗免疫100日龄的海兰褐鸡，获得高免鸡蛋，去蛋清，用75％酒精进行表面消毒，得高免鸡蛋蛋黄；
S2、收集步骤S1获得的高免鸡蛋蛋黄，去除卵黄膜和系带后利用胶体磨进行破碎，得蛋黄液；
S3、将步骤S2得到的蛋黄液与0.1mol/L的pH为7.2～7.4的醋酸盐缓冲溶液以1：6～8的体积比混合，然后向其中加入总体积0.05～0.1％的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯，搅拌混合均匀，然后加入总体积0.3～0.5％的β-环糊精，充分搅拌，4℃静置1～2h，充分平衡后在4℃，4000r/min离心15～20min，收集上清液；
S4、将步骤S3收集的上清液进行纯化、浓缩，无菌处理，即得。


2.如权利要求1所述的三价卵黄抗体的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述的鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三联灭活疫苗用传代细胞系LMH细胞生产。


3.如权利要求1所述的三价卵黄抗体的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述高免鸡蛋蛋黄的具体制备方法为：给100日龄的海兰褐鸡皮下注射1mL鸭呼肠孤病毒、鸭细小病毒和鸭星状病毒三联灭活疫苗免疫，共免疫3次，每相邻两次免疫的时间间隔为...

【专利技术属性】
技术研发人员：严悌昆，张毓金，谢秉超，黄淑芳，张桂平，
申请(专利权)人：广州渔跃生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44