一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法技术

本发明专利技术一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法，包括以下步骤：(1)取人工虎骨粉样品，加入过甲酸溶液氧化，加入氢溴酸终止氧化，蒸干，加入盐酸水解，蒸干，用衍生缓冲液溶解，衍生得供试品溶液；(2)分别取磺基丙氨酸和蛋氨酸砜对照品，用衍生缓冲液溶解，衍生得混合对照品溶液；(3)分别将供试品溶液和对照品溶液进行色谱检测，色谱柱以氰基键合硅胶为填充剂；柱温20度；流动相：A为乙酸钠缓冲液；B为甲醇‑乙腈‑水，进行梯度洗脱；(4)根据检测结果计算得到人工虎骨粉中磺基丙氨酸和蛋氨酸砜的含量，进而计算得到其胱氨酸和蛋氨酸砜的含量。本发明专利技术检测方法准确可靠，简便快速。

A method for simultaneous determination of cystine and methionine in artificial tiger bone powder

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法
本专利技术属于中药检测
，涉及一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法。
技术介绍
人工虎骨粉是一种健骨药物，是新一代虎骨代替品，具有强筋骨、祛风湿、止痛等功效，临床主要用于骨质疏松症、骨折、类风湿关节炎、慢性腰腿痛等骨关节疾病的治疗。人工虎骨粉所含成分与天然虎骨基本相同，研究表明，其药理、药效及安全性指标与天然虎骨无明显差异，国家药品监督管理局国家药品标准YBZ01602003-2009Z-2019颁布了人工虎骨粉的质量控制标准，该质量控制方法仅控制了人体需要的十六种氨基酸的含量，并未对甲硫氨酸和蛋氨酸的含量进行控制。而甲硫氨酸和蛋氨酸均为人体需要的氨基酸，与其它十六种氨基酸具有相同的活性，在增强人体免疫力、促进骨骼生长发育以及维持人体的正常机能方面均起着重要作用。因此，准确测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸的含量对评价其内在质量具有重要意义。虽然，现有技术中，对于胱氨酸和甲硫氨酸已经有一些检测方法，但是，现有的检测方法大多为检测类似奶粉、饲料等胱氨酸、甲硫氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、供试品溶液制备：/n取人工虎骨粉样品，加入过甲酸溶液进行氧化反应，再加入氢溴酸终止氧化反应，所得反应液蒸干得到残渣1，将残渣1加入盐酸中进行水解，水解产物蒸干得残渣2，将残渣2用衍生缓冲液溶解后过滤，取续滤液加入衍生试剂进行衍生反应，得供试品溶液；/nS2、混合对照品溶液制备：/n分别取磺基丙氨酸和蛋氨酸砜对照品，用衍生缓冲液溶解后过滤，取续滤液加入衍生试剂进行衍生反应，得混合对照品溶液；/nS3、分别将供试品溶液和混合对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱检测，分别得到供试品溶液和混合对照品溶液的色谱数...

【技术特征摘要】
1.一种同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、供试品溶液制备：
取人工虎骨粉样品，加入过甲酸溶液进行氧化反应，再加入氢溴酸终止氧化反应，所得反应液蒸干得到残渣1，将残渣1加入盐酸中进行水解，水解产物蒸干得残渣2，将残渣2用衍生缓冲液溶解后过滤，取续滤液加入衍生试剂进行衍生反应，得供试品溶液；
S2、混合对照品溶液制备：
分别取磺基丙氨酸和蛋氨酸砜对照品，用衍生缓冲液溶解后过滤，取续滤液加入衍生试剂进行衍生反应，得混合对照品溶液；
S3、分别将供试品溶液和混合对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱检测，分别得到供试品溶液和混合对照品溶液的色谱数据；其中，色谱检测条件如下：色谱柱以氰基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温为20℃，按照体积百分比计，流动相包括97％～0％的流动相A和3～100％的流动相B；流动相A为乙酸钠缓冲液；流动相B为甲醇-乙腈-水混合液；
S4、根据供试品溶液和混合对照品溶液的色谱数据，计算结果得到人工虎骨粉中磺基丙氨酸和蛋氨酸砜的含量；
S5、根据人工虎骨粉中磺基丙氨酸和蛋氨酸砜的含量计算得到胱氨酸和甲硫氨酸的含量。


2.根据权利要求1所述的同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨酸含量的方法，其特征在于，S1中，人工虎骨粉样品与过甲酸溶液的体积质量比为1g:(10～30)ml，氢溴酸与过甲酸溶液的体积比为1:(3～5)。


3.根据权利要求1所述的同时测定人工虎骨粉中胱氨酸和甲硫氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘鹏，杨梦聪，宋亚玲，刘福敏，
申请(专利权)人：金花企业集团股份有限公司西安金花制药厂，金花企业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61