一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法。该方法中，所述基因毒性杂质包括3‑硝基邻苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2‑氰基‑4‑溴甲基联苯。该方法包括高效液相色谱法检测所述降压类药物中间体中是否含有上述基因毒性杂质以及按外标法以峰面积计算各杂质的含量。该方法可以大大提高检测方法的灵敏度，设备仪器均为普通，检测成本低廉，操作极为简便，大大节约了检测成本和检测时间。

A method for the detection of genotoxic impurities in the intermediate of antihypertensive drugs

【技术实现步骤摘要】
一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法
本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法。
技术介绍
Azilsartan(CS-865，化合物I)是新一代选择性AT1亚型血管紧张素II受体拮抗剂(ARBs)类抗高血压药，由日本武田制药开发，2012年1月已经获得在日本的上市批准。降压类药物属血管紧缩素II受体抑制剂，通过阻断血管紧缩素II受体的活动而达到降低血压的效果，与血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类降压药物相比，具有平稳降压、不会引起干咳的优点。尽管已上市多个ARBs，但对于许多患者，仅抑制肾素-醛固酮系统(RAS)活性并不足以控制血压和降低心血管疾病及糖尿病的风险。所涉及的降血压药物中间体的化学名为：1-((2'-氰基-[1,1'-二苯基]-4-基)甲基)-2-乙氧基-1H-苯并[d]咪唑-7-羧酸乙酯，化学式如式II所示，化学文摘登记号为139481-44-0。参考文献“束蓓艳，吴雪松，岑均达，中国医药工业杂志，2010，41(12)，P881-883”中，揭示本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法，/n所述基因毒性杂质包括3-硝基邻苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯；/n所述C1代表3-硝基-2-羧基苯甲酸甲酯；/n所述C3代表2-[[(2'-氰基[1,1'-联苯]-4-基)甲基][(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；/n所述C4代表2-[[(2-氰基[1,1-联苯]-4-基)甲基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；/n所述C5代表2-[[(2-氰基[1,1-联苯]-4-基)甲基]氨基]-3-氨基苯甲酸甲酯；/n所述3-硝基邻苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯的结构式如下所示...

【技术特征摘要】
1.一种检测降压类药物中间体中基因毒性杂质的方法，
所述基因毒性杂质包括3-硝基邻苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯；
所述C1代表3-硝基-2-羧基苯甲酸甲酯；
所述C3代表2-[[(2'-氰基[1,1'-联苯]-4-基)甲基][(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；
所述C4代表2-[[(2-氰基[1,1-联苯]-4-基)甲基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；
所述C5代表2-[[(2-氰基[1,1-联苯]-4-基)甲基]氨基]-3-氨基苯甲酸甲酯；
所述3-硝基邻苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯的结构式如下所示：



所述方法包括以分析方法1检测3-硝基邻苯二甲酸和C1的操作和以分析方法2检测C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯的操作；
其中，所述分析方法1包括：以3-硝基邻苯二甲酸和C1作为对照品，采用高效液相色谱法检测所述降压类药物中间体中是否含有3-硝基邻苯二甲酸和C1以及按外标法以峰面积计算各杂质的含量；
所述分析方法2包括：以C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯作为对照品，采用高效液相色谱法检测所述降压类药物中间体中是否含有C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯以及按外标法以峰面积计算C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基联苯杂质的含量。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述分析方法1中，使用具有紫外检测器的高效液相色谱仪进行高效液相色谱法检测；其中，检测波长为230nm；
所述高效液相色谱法中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；具体为CAPCELLPAKC183μm4.6×150mm色谱柱；更具体为CAPCELLPAKC18MGⅡS-34.6×150mm3μm色谱柱；
以磷酸盐缓冲溶液为流动相A，乙腈为流动相B；
流速为1.0±0.1ml/min；
柱温为30±10℃；
所述梯度洗脱条件如下：
第0min起-10min末，所述A相与B相的体积比为80:20；
从第11min起-15min末，所述A相与B相的体积比由80:20变为35:65；
从第16min起至第24min末，所述A相与B相的体积比维持35:65；
从第25min起至第25.1min末，所述A相与B相的体积比由35:65变为80:20；
从第25.2min起至第35min末，所述A相与B相的体积比维持80:20；
所述A相代表流动相A；所述B相代表流动相B。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述分析方法1的操作包括：
取所述降压类药物中间体，加稀释剂，超声溶解，作为供试品溶液；所述稀释剂为由体积比为40:60的A相和B相组成的混合液；所述供试品溶液的浓度为1mg/ml；
称取杂质3-硝基邻苯二甲酸和C1对照品各5mg，置同一100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，再加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置200ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
量取所述供试品溶液和对照品溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；
若所得供试品溶液色谱图中如有与所述3-硝基邻苯二甲酸和/或C1保留时...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宇晶，利虔，赵小君，谌宗永，
申请(专利权)人：北京阳光诺和药物研究有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11