【技术实现步骤摘要】
一种加倍非洲菊单倍体植株的方法
本专利技术涉及一种加倍非洲菊单倍体植株的方法,属于植物生物
技术介绍
非洲菊(GerberaHybrida)属菊科大丁草属多年生宿根草本花卉,别名扶郎花,有“扶持郎君,事业发达”之意,可制作花篮、花束及其它花卉饰品,由于其色泽鲜艳、花色丰富,成为周年供应不可缺少的切花。自交系间杂种的优势比品种间杂种优势大,而非洲菊为典型的异花授粉作物,由于长期无性繁殖,保存着基因型的高度杂合性,其性状遗传极为复杂。为了克服非洲菊品种的杂合状态,充分利用杂种优势,排除显隐性的干扰,提高选择的准确性,必须通过人工控制授粉,强迫自交,提高亲本的纯合性。通常情况下,要获得纯合的自交系,需进行多代(4~6代),甚至10代以上的自交,花费6~7年甚至8~9年的时间。通过花药或未授粉子房(或胚珠)培养可得单倍体植株,单倍体植株经染色体加倍后,可快速成为纯合二倍体,提高育种效率。目前,不管是多倍体育种中人工诱导多倍体,还是单倍体育种中对单倍体植株的愈伤组织或胚状体进行染色体加倍,多采用化学诱导法,而 ...
【技术保护点】
1.一种加倍非洲菊单倍体植株的方法,其特征在于:/nA、壮苗和增殖培养/n将非洲菊单倍体组培繁殖苗切成单株,转接到下列壮苗和增殖培养基中进行壮苗和增殖同步培养:/nMS改良培养液/n
【技术特征摘要】
1.一种加倍非洲菊单倍体植株的方法,其特征在于:
A、壮苗和增殖培养
将非洲菊单倍体组培繁殖苗切成单株,转接到下列壮苗和增殖培养基中进行壮苗和增殖同步培养:
MS改良培养液
所述的MS改良培养液是:MS培养液中大量元素的浓度减半,盐酸硫胺素浓度为2mg/L,盐酸吡哆醇浓度为1mg/L的培养液;
培养条件为:光照强度1800~2200lx,温度25℃±2℃,光照时间10h/d;
培养时间为:35~45d;
B、化学诱变培养
将A步骤培养的幼苗切成苗高为0.8~1.2cm的单株,完全浸泡于化学诱变剂中,处理3~6h,处理完毕后,用无菌水浸泡20min,再用无菌水漂洗3次,接种到下列诱变培养基中培养:
1/2MS培养液
所述诱变剂母液由下述方法配制而得:先将0.5g氨磺乐灵溶于50g二甲基亚砜中,再加蒸馏水定容至1L,即得诱变剂母液;
所述化学诱变剂由下述方法配制而得:取上述10~30ml诱变剂母液,用蒸馏水稀释至100ml,在121℃下进行灭菌20min,待冷却至室温后,即得到化学诱变剂;
培养条件为:光照强度1500~2000lx,温度25℃±2℃,光照时间8h/d;
C、复壮培养和诱变植株初步筛选
在B步骤诱变培养基中培养2~6d后,剔除坏死组织,转接到与步骤A相同的培养基和培养条件下进行复壮培养,培养至每个诱变单株新萌发出3~6个幼芽时,观察形态特征变化情况,和单倍体植株相比,株型变大、生长速度变快、叶片变大变厚的植株初步筛选为诱变植株,同时淘汰其它植株;
D、初选植株保种、扩繁、生根培养及诱变株系第一次筛选
将步骤C初选的诱变植株切成单株,分别编号,在与步骤A相同的培养基和培养条件下扩繁至20个芽,取其中5个芽在与步骤A相同的培养基和培养条件下保存,并进行扩繁,形成株系,其余15个芽接种到下述生根培养基中:
1/2MS培养液
在光照强度为1500~2000lx,温度为25℃±2℃,光照时间为12h/d的条件下进行生根培养,并观察根系萌发时间,诱变植株根系萌发所需时间比单倍体植株根系萌发时间短3d以上,将根系萌发时间变短的株系第一次拟定为诱变株系,同时淘汰其它株系;
E、诱变株系第二次筛选
当D步骤第一次拟定的诱变株系生根培养至基部长出4~8条根时,先采用气孔保卫细胞叶绿体计数法对生根苗进行倍性鉴定,和单倍体植株相比,诱变株系植株的气孔保卫细胞叶绿体数目比单倍体的气孔保卫细胞叶绿体数目平均增多1.4倍以上,诱变株系植株的气孔长和气孔宽平均值比单倍体的气孔...
【专利技术属性】
技术研发人员:单芹丽,李绅崇,杨春梅,瞿素萍,吴丽芳,吴学尉,汪国鲜,阮继伟,卢珍红,
申请(专利权)人:云南省农业科学院花卉研究所,玉溪云星生物科技有限公司,云南大学,
类型:发明
国别省市:云南;53
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