一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物组、荧光可视化快速检测试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物组、荧光可视化快速检测试剂盒及方法。用于检测非洲猪瘟病毒的引物组包括一对特异性外引物，一对特异性内引物和一条环引物，其对应的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。利用本发明专利技术制备的荧光可视化快速检测试剂盒可实现对非洲猪瘟病毒的高灵敏度和高特异性检测，同时操作简便，仅需能恒温扩增的水浴或恒温扩增仪器即可进行检测，成本较低，设备适用范围广，适于在疫病发生时现场快速诊断疫病，及时治疗。

A primer set, fluorescence visualization rapid detection kit and method for detection of African swine fever virus

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物组、荧光可视化快速检测试剂盒及方法
本专利技术涉及微生物检测
，具体涉及一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物组荧光、可视化快速试剂盒及方法。
技术介绍
非洲猪瘟(Africanswinefever)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)引起的猪的一种急性、热性、高接触性传染病，又称非洲猪瘟疫或疣猪病。临床以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血、高死亡率为特征。非洲猪瘟病毒属于非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属，也是非洲猪瘟病毒科的唯一成员。该病毒粒子二十面体对称，呈同心圆状结构。ASFV不同毒株间基因组大小不同，在170-193kb之间，共编码约150-167个蛋白，包括病毒复制所需蛋白，此外许多基因与病毒的复制无关，但卷入了抑制和逃逸宿主防御系统。因此在临床上需要一种能够快速检测或筛查ASFV毒株的检测方法。传统的ASFV检测方法主要是血清学检测(酶联免疫吸附试验ELISA、间接免疫过氧化物酶反应检测、间接免疫荧光和免疫印迹法等)和病原学检测(PCR、荧光PCR和胶体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组用于检测非洲猪瘟病毒的特异性引物组，其特征在于，其包括一对特异性外引物，一对特异性内引物和一条环引物，其特异性外引物的核苷酸序列分别为如SEQ ID NO.1所示的F3和如SEQ ID NO.2所示的B3，所述特异性内引物的核苷酸序列分别为如SEQ IDNO.3所示的FIP和如SEQ ID NO.4所示的BIP，所述环引物的核苷酸序列为如SEQ ID NO.5所示。/n

【技术特征摘要】
1.一组用于检测非洲猪瘟病毒的特异性引物组，其特征在于，其包括一对特异性外引物，一对特异性内引物和一条环引物，其特异性外引物的核苷酸序列分别为如SEQIDNO.1所示的F3和如SEQIDNO.2所示的B3，所述特异性内引物的核苷酸序列分别为如SEQIDNO.3所示的FIP和如SEQIDNO.4所示的BIP，所述环引物的核苷酸序列为如SEQIDNO.5所示。


2.一种检测非洲猪瘟病毒的LAMP试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的引物组合。


3.一种检测非洲猪瘟病毒的可视化快速检测试剂盒，其特征在于，其包括一对特异性外引物，一对特异性内引物，一条环引物和BstDNA聚合酶及荧光目视检测试剂，其中，特异性外引物的核苷酸序列分别为如SEQIDNO.1所示的F3和如SEQIDNO.2所示的B3，所述特异性内引物的核苷酸序列分别为如SEQIDNO.3所示的FIP和如SEQIDNO.4所示的BIP，所述环引物的核苷酸序列为如SEQIDNO.5所示，所述荧光目视检测试剂为含有Mn2+的钙黄绿素溶液。


4.根据权利要求3所述的可视化快速检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括检测试剂，所述检测试剂包括无DNA酶的蒸馏水、LAMP反应液、阴性质控标准品和阳性质控标准品；所述LAMP反应液中含有所述的一对特异性外引物，一对特异性内引物，一条环引物和BstDNA聚合酶及荧光目视检测试剂。


5.根据权利要求3所述的可视化快速检测试剂盒，其特征在于，还包括样品快速处理试剂，所述样品快速处理试剂含有聚乙二醇、Triton-X100、EDTA、Ttis-HCl，海藻糖。


6.根据权利要求5所述的可视化快速检测试剂盒，其特征在于，所述样品快速处理试剂为含有质量百分比为2.5％的聚乙二醇，3mg/mL的蛋白酶K，0.1％Triton-X100的DNAExtractSolutionA，和含3mmol/LEDTA，1.5mmol/LTtis-HCl，质量百分比为0.25％的海藻糖的DNAExtractSoluti...

【专利技术属性】
技术研发人员：王林，张玮，吴迪，栗云鹏，高晓龙，张启龙，杜鹃，李蕊，程汝佳，王培，韦海涛，宋彦军，周德刚，刘晓冬，
申请(专利权)人：北京市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11