一种环氧化物水解酶突变体及其应用制造技术

一种环氧化物水解酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。该环氧化物水解酶突变体是将SEQ ID No.4所示的野生型环氧化物水解酶的氨基酸序列的第8位和/或第26位进行单位点突变或多位点突变获得的；单位点突变是将第8位的亮氨酸突变为异亮氨酸，或第26位的色氨酸突变为苯丙氨酸。本发明专利技术得到的环氧化物水解酶突变体，大大提高了酶的活性和热稳定性。本发明专利技术通过基因工程技术，得到了一些表达本发明专利技术突变型环氧化物水解酶的基因工程菌，利用该基因工程菌生产D(‑)‑酒石酸，大大提高了细胞的活性和使用寿命，符合目前工业应用的要求。

A mutant of epoxide hydrolase and its application

【技术实现步骤摘要】
一种环氧化物水解酶突变体及其应用
本专利技术属于基因工程和酶工程
，具体涉及一种环氧化物水解酶突变体及其应用。
技术介绍
环氧化物水解酶(EC3.3.2.3)是一类无需任何辅酶、辅基或金属离子参与的催化环氧化物或其盐水解为相应邻二醇或其盐的酶的总称。环氧化物水解酶广泛分布于哺乳动物、植物和微生物中，微生物来源的环氧化物水解酶由于具有立体专一性好、酶促反应快、产物光学纯度和得率高、产物分离纯化简单易行等特点，备受人们关注。D(-)-酒石酸[(2S,3S)-2,3-二羟丁烷-1,4-二羧酸]是天然L(+)-酒石酸的同型异构体，在自然界中极少存在，主要用于制药行业中手性合成的手性源及拆分剂。D(-)-酒石酸的生产方法主要有三种：(1)利用化学拆分剂将DL-酒石酸拆分为L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的化学拆分法。如Lola等(ChineseJChemEng2002,10(2):244-248)以L(-)-a-甲苄基胺(L(-)-a-methylbenzylamine)为拆分剂实现了将DL-酒石酸分离制得L(+)-酒石酸和D(-)-酒石本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种环氧化物水解酶突变体，其特征在于该环氧化物水解酶突变体是将SEQ IDNo.4所示的野生型环氧化物水解酶的氨基酸序列的第8位和/或第26位进行单位点突变或多位点突变获得的；所述单位点突变是将第8位的亮氨酸突变为异亮氨酸，或第26位的色氨酸突变为苯丙氨酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种环氧化物水解酶突变体，其特征在于该环氧化物水解酶突变体是将SEQIDNo.4所示的野生型环氧化物水解酶的氨基酸序列的第8位和/或第26位进行单位点突变或多位点突变获得的；所述单位点突变是将第8位的亮氨酸突变为异亮氨酸，或第26位的色氨酸突变为苯丙氨酸。


2.如权利要求1所述的一种环氧化物水解酶突变体，其特征在于该环氧化物水解酶突变体为下列之一：
1）将SEQIDNo.4所示的野生型环氧化物水解酶的氨基酸序列的第8位的亮氨酸突变为异亮氨酸，该环氧化物水解酶突变体的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；
2）将SEQIDNo.4所示的野生型环氧化物水解酶的氨基酸序列的第26位的色氨酸突变为苯丙氨酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍文娜，刘士旺，陈怡，廖鸿秀，陈航，
申请(专利权)人：浙江科技学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33