一种检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的HPLC方法技术

本发明专利技术公开了一种检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的HPLC方法，该方法采用反相色谱柱，使用衍生化试剂对待测样品进行衍生化处理，流动相选自含有胺类物质的盐缓冲溶液和有机溶剂组成。本发明专利技术提供的方法可以准确检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的含量，简单易行且分析成本低，结果准确可靠，便于生产和质控过程中产品质量的控制。

HPLC method for the determination of Cyclopropylamine in lovatinib mesylate

【技术实现步骤摘要】
一种检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的HPLC方法
本专利技术涉及环丙胺的HPLC分析方法。
技术介绍
环丙胺(SCR-4341)为甲磺酸乐伐替尼合成反应第三步用到的起始原料。由于环丙胺无紫外吸收，常采用气相顶空法对环丙胺进行测定，但甲磺酸乐伐替尼在高温条件下，易降解生成环丙胺，干扰检测，另外采用CAD检测器进行测定，检测灵敏度低，不能很好的控制甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的含量。现有技术中尚无记载有关从甲磺酸乐伐替尼中检测环丙胺的具体分析方法，采用HPLC柱前衍生化方法对环丙胺进行测定，可以避免乐伐替尼高温降解生成环丙胺干扰检测，同时该检测方法分离度好，衍生化后产物单一，空白无干扰峰，可以准确检测样品中环丙胺的含量。
技术实现思路
本专利技术提供一种检测甲磺酸乐伐替尼中的环丙胺的HPLC方法，其特征在于：采用反相色谱柱；使用衍生化试剂对待测样品进行衍生化处理；流动相选自含有胺类物质的盐缓冲溶液和有机溶剂组成，检测波长为215-356nm，优选356nm。所述衍生化试剂选自2,4-二硝基氯苯、2，4-二硝基氟苯、苯甲酰氯或N-琥珀酰亚胺对硝基苯乙酸酯。所述衍生化处理为使用衍生化试剂与环丙胺反应生成具有紫外吸收的环丙胺衍生物，优选为所述衍生化处理过程中需加入碳酸钠，碳酸钠与供试品的质量比为40:1～60:1，优选50:1。进一步，衍生化的时间为1.5～12h。进一步，衍生化的温度为60～80℃，优选75℃。所述盐缓冲溶液为乙酸盐缓冲溶液、甲酸盐缓冲液。所述含有胺类物质的盐缓冲溶液的pH值为4.0-6.0，优选5.0。进一步，含有胺类物质的盐缓冲溶液和有机溶剂的体积比为1:1～1:6，优选为1:1.2～1:4，更优选为9:11，优选洗脱过程中有机溶剂体积不变或增加。所述有机溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇中的一种或几种。所述的有机溶剂优选乙腈和甲醇，其体积比为2:1～1:3，优选1:1。.进一步，还包括使用溶剂溶解待测样品，溶剂由乙腈和水组成，乙腈和水的体积比为2:1～6:1，优选为4:1。本专利技术中所述衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。有益效果1、本专利技术提供的方法可以准确检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的含量，避免使用气相顶空法检测时，由于高温导致甲磺酸乐伐替尼分解，导致不能准确测定环丙胺的含量。2、本专利技术提供的方法可以将环丙胺与其他杂质分离，分离度均大于1.5，符合标准。3、本专利技术提供的方法可以准确检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的含量，衍生化条件耐用性良好，产物单一，不干扰其他杂质的检测，简单易行且分析成本低，结果准确可靠，便于生产和质控过程中产品质量的控制。附图说明图1：实施例1中环丙胺经衍生化色谱峰图谱图2：实施例2中检测系统适用性图谱图3：实施例5中对照品溶液HPLC检测图谱图4：实施例5中供试品溶液HPLC检测图谱图5：实施例11中HPLC检测图谱图6：实施例12中HPLC检测图谱具体实施方式下面通过实施例进一步来说明本专利技术，应该正确理解的是，本专利技术的实施例仅仅用于说明本专利技术而给出，而不是对本专利技术的限制，所以，在本专利技术方法的前提下对本专利技术的简单改进均属于本专利技术要求保护的范围。以下实例中检测所用的环丙胺(SCR-4341)由安耐吉化学试剂提供，甲磺酸乐伐替尼样品由江苏先声药业提供，批号为150115、150119、150125。实施例1：取环丙胺适量，加溶剂[乙腈-水(80:20)]适量，加衍生化试剂2,4-二硝基氯苯溶液制成对照溶液，用二极管阵列检测器(DAD)进行全波长光谱采集，结果表明SCR-4341经过衍生化色谱峰的最大吸收在215nm，264nm、356nm，在356nm波长下，检测灵敏度更高，干扰较小，因此选择356nm波长作为本品的测定波长。检测谱图见图1。实施例21)色谱条件仪器：高效液相色谱仪色谱柱：AgilentZorbax-Bonus-RP-C18(150mm×4.6mm,3.5μm)流动相：0.05mol/L乙酸铵溶液(取乙酸铵3.85g，加水1000ml使溶解，加入冰醋酸1ml混匀，调节pH为5.0)-乙腈-甲醇(18:11:11)溶剂：乙腈-水(80:20)进样量：10μl检测波长：356nm2)样品配制(1)精密称取SCR-4341对照品适量，配制成每1ml含SCR-4341约7.5mg的溶液，精密量取2ml至20ml顶空瓶中，加甲磺酸乐伐替尼10mg，精密量取碳酸钠水溶液(取碳酸钠2.5g，加水25ml溶解即得)0.5ml，加入衍生化试剂2,4-二硝基氯苯溶液(取2,4-二硝基氯苯100mg至20ml量瓶，加乙腈稀释至刻度，摇匀)0.2ml，密封、压盖，75℃水浴5小时，放冷，用溶剂多次洗涤并完全转移至10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，配制成系统适用性试验溶液。(2)精密称取杂质SCR-4338、杂质SCR-4452、杂质SCR-4453、杂质SCR-4342各适量，配制成每1ml含各杂质约7.5mg的溶液，精密量取2ml至20ml顶空瓶中，加甲磺酸乐伐替尼10mg，精密量取碳酸钠水溶液(取碳酸钠2.5g，加水25ml溶解即得)0.5ml，加入衍生化试剂2,4-二硝基氯苯溶液(取2,4-二硝基氯苯100mg至20ml量瓶，加乙腈稀释至刻度，摇匀)0.2ml，密封、压盖，75℃水浴5小时，放冷，用溶剂多次洗涤并完全转移至10ml量瓶中，溶剂稀释至刻度，配制成含氨基杂质对照溶液。表1杂质对照表3)测定结果：环丙胺的衍生化产物的保留时间为5.041分钟。系统适用性试验溶液的色谱图中5分钟附近无其他色谱峰存在；氨基杂质对照溶液的色谱图中5分钟附近未见明显色谱峰，故其他杂质的存在对环丙胺衍生化产物的检测无干扰。同时选择乙腈-水(80:20)为溶剂，杂质环丙胺衍生化组分及样品均有较好溶解度，杂质环丙胺衍生化峰型好，空白溶剂不干扰检测。检测结果见图2实施例3：1)色谱条件仪器：高效液相色谱仪色谱柱：AgilentZorbax-Bonus-RP-C18(150mm×4.6mm,3.5μm)流动相：0.05mol/L乙酸铵溶液(取乙酸铵3.85g，加水1000ml使溶解，加入冰醋酸1ml混匀，调节pH为5.0)-乙腈-甲醇(18:11:11)溶剂：乙腈-水(80:20)进样量：10μl检测波长：356nm2)样品配制精密称取环丙胺对照品适量，加溶剂乙腈-水(80:20)定量稀释制成每1ml约含7μg的溶液作为对照品溶液，取对照品贮备液2ml置20ml顶空瓶中，加入衍生化试剂2,4-二硝基氯苯溶液(1mg/ml)0.1ml或1ml，分别考察4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测甲磺酸乐伐替尼中的环丙胺的HPLC方法，其特征在于：采用反相色谱柱；使用衍生化试剂对待测样品进行衍生化处理；流动相选自含有胺类物质的盐缓冲溶液和有机溶剂组成。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测甲磺酸乐伐替尼中的环丙胺的HPLC方法，其特征在于：采用反相色谱柱；使用衍生化试剂对待测样品进行衍生化处理；流动相选自含有胺类物质的盐缓冲溶液和有机溶剂组成。


2.根据权利要求1所述方法，其特征在于所述衍生化试剂选自2,4-二硝基氯苯、2，4-二硝基氟苯、苯甲酰氯或N-琥珀酰亚胺对硝基苯乙酸酯。


3.根据权利要求1所述方法，其特征在于所述衍生化处理为使用衍生化试剂与环丙胺反应生成具有紫外吸收的环丙胺衍生物。


4.根据权利要求3所述方法，其特征在于所述衍生化处理过程中需加入碳酸钠，碳酸钠与供试品的质量比为40:1～60:1，优选50:1。


5.根据权利要求1所述方法，其特征在于衍生化的时间为1.5～12h。


6.根据权利要求1所述的一种检测甲磺酸乐伐替尼中的环丙胺的HPLC方法，其特征在于衍生化的温度为60～80℃，优选75℃。

【专利技术属性】
技术研发人员：王霞，梁春谊，杨新华，李薇，任晋生，
申请(专利权)人：江苏先声药业有限公司，芜湖先声中人药业有限公司，南京先声东元制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32