一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法技术

本发明专利技术涉及药物分析领域，具体公开了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，至少包括以下步骤：首先称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；其次再将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，可将杀鼠灵原药样品中的杂质进行有效分离，本发明专利技术采用的分析方法具有分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高的优点。

A method for the separation and purification of unknown impurities in warfarin technical samples

【技术实现步骤摘要】
一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法
本专利技术涉及药物分析领域，具体涉及一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法。
技术介绍
制备液相色谱是以获取纯样品为目的的一种分离技术，自20世纪30年代应用于色素的分离至今，得到了长足发展。20世纪80年代高效制备液相色谱在医药工业中有了迅速的发展，90年代在蛋白的分离纯化上得到大量应用。如今，制备色谱几乎在社会生产生活的各个领域均有应用，如次生类代谢产物、天然产物、大分子化合物及某些重要的药用生物活性蛋白、生物治疗品与诊断试剂的分离纯化。但是在现有技术中对杀鼠灵原药样品中未知杂质分离和纯化的方法较为复杂，由此研究一种精准、快速、高灵敏度、重复性高的分析方法是本领域技术人员研究的热点。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，至少包括以下步骤：(1)称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；(2)将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，得到结果。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述步骤(1)中的溶剂选自DMF、甲醇、乙腈、水中的一种或多种。作为本专利技术一种优选的技术方案，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：(2～6)。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为150～250mg/mL；所述进样量为8～18mL。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述紫外检测波长为220nm～360nm。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述色谱柱为WatersXbridgeC18，长度为250mm，内径为30mm，粒径10μm。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述流动相选自甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液中的一种或多种。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述流动相为乙腈和磷酸二氢钠水溶液。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述流动相在0～30min内为梯度洗脱，在0min时，乙腈和磷酸二氢钠水溶液的体积比为1:9；在30min时，乙腈和磷酸二氢钠水溶液的体积比为(7:3)～(9:1)。作为本专利技术一种优选的技术方案，所述流速为30-50mL/min。。有益效果：本专利技术提供了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，本专利技术通过对方法的合理设计，与现有的方法技术相比，具有明显的优点：分离杂质的精确度高、纯度高，杂质的专属性、线性及范围、回收率、精密度、耐用性等试验均良好；且流动相配制简单、检测成本低等。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为实施例1中鼠灵原药样品HPLC-MS预扫描的HPLC谱图。图2为实施例1中鼠灵原药样品HPLC-MS预扫描的MS谱图。图3为实施例1中杂质纯品的HPLC谱图。图4为实施例1中杂质纯品的MS谱图。图5为实施例1中杂质纯品的HNMR谱图。图6为实施例1中杂质纯品的CNMR谱图。具体实施方式参选以下本专利技术的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本专利技术的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本专利技术所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。此外，本专利技术要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，至少包括以下步骤：(1)称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；(2)将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，得到结果。在一种优选的实施方式中，所述步骤(1)中的溶剂选自DMF、甲醇、乙腈、水中的一种或多种。在一种优选的实施方式中，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：(2～6)。在一种更优选的实施方式中，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：(3～5)。在一种最优选的实施方式中，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：4。在一种优选的实施方式中，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为150～250mg/mL；所述进样量为8～18mL。在一种更优选的实施方式中，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为180～230mg/mL；所述进样量为10～15mL。在一种最优选的实施方式中，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为220mg/mL；所述进样量为12mL。在一种优选的实施方式中，所述紫外检测波长为220nm～360nm。在一种更优选的实施方式中，所述紫外检测波长为250nm～320nm。在一种最优选的实施方式中，所述紫外检测波长为300nm。在一种最优选的实施方式中，所述色谱柱为WatersXbridgeC18，长度为250mm，内径为30mm，粒径10μm。在一种优选的实施方式中，所述流动相选自甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液中的一种或多种。在一种优选的实施方式中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：/n(1)称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；/n(2)将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，得到结果。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
(1)称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；
(2)将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，得到结果。


2.根据权利要求1所述的分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的溶剂选自DMF、甲醇、乙腈、水中的一种或多种。


3.根据权利要求1所述的分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：(2～6)。


4.根据权利要求1所述的分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为150～250mg/mL；所述进样量为8～18mL。


5.根据权利要求1所述的分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，其特征在于，所述紫外检测波长为220nm～...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晓渭，
申请(专利权)人：上海洲锐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31