一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术公开了一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法。本发明专利技术川芎地上部位(茎叶)的指纹图谱检测方法，填补了川芎地上部位质量检测的空白，为川芎地上部位建立了规范的质控体系。本发明专利技术川芎地上部位的指纹图谱，标定了20个共有峰，指认出了藁本内酯与丁烯基苯酞两个成分。与对照图谱相比，不同批次的川芎地上部位的指纹图谱相似度在0.942～0.990，相似度良好，表明不同产地川芎地上部位的化学成分具有很好的一致性，能用于川芎地上部位的质量控制。

A method of fingerprint detection for the above ground part of Ligusticum Chuanxiong

【技术实现步骤摘要】
一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法
本专利技术涉及中药指纹图谱
，具体涉及一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法。
技术介绍
川芎为伞形科植物川芎LingusticumchuanxiongHort.的干燥根茎，具有活血行气，祛瘀止痛的功效。其主要含有挥发油、生物碱、酚酸类、内酯类、萜烯类、苯酞衍生物、多糖类及无机元素等。目前对川芎的研究和应用都集中在地下根茎，对川芎地上部位的研究和利用非常少。川芎地上部位资源丰富，占全株鲜重的75％，但多废弃，造成资源的极大浪费。川芎地上部位可以疏风、平肝，祛脑中风寒。主治风眩、惊风、风眼流泪、头风头痛，多涕唾。《神农本草经》记载“主咳逆，定惊气，辟邪恶，除蛊毒、鬼痊，去三虫，久服通神。”《名医别录》记载其“主身中老风，头中久风风眩。”现代研究表明川芎地上部位水煎液明显延长小鼠出血凝血时间，延长氨水致小鼠咳嗽潜伏期，减少氨水致小鼠咳嗽次数，具有一定的活血和镇咳作用。目前已有对川芎地上部位单一或几种化学成分的研究报道，并作为评价川芎地上部位质量的方法，但单个成分含量水平难以达到川芎地上部位质量控制评价的目的。指纹图谱作为中药材单味药和复方全成分及其提取物的质量控制方法，能够较为全面地反映中药全化学谱，已经成为国际公认的控制评价中药和天然药物质量的有效手段。川芎地上部位中各类化学成分性质、极性等差异极大，现有单一成分检测很难反映其全貌，难以对川芎地上部位进行整体质量控制。而目前还没有关于川芎地上部位指纹图谱的研究报道。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：1)供试品溶液制备：取川芎地上部位粉碎，加甲醇提取，过滤，取续滤液即得；2)分别吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以0.05～0.2％磷酸溶液为流动相A；以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：进一步地，步骤1)所述提取为超声提取，超声提取时间30min。进一步地，步骤1)所述川芎地上部位与甲醇质量体积比为1～10g：10ml，优选2g：10ml。进一步地，步骤2)所述色谱条件中色谱柱为KromasilC18，规格4.6×250mm，5μm；流动相A磷酸溶液浓度为0.1％。进一步地，步骤2)所述色谱条件中流速1.0mL/min，进样量20μL，柱温35℃，检测波长254nm。进一步地，所述检测方法还包括如下步骤：分别取藁本内酯和丁烯基苯酞对照品，加甲醇溶解，得对照品溶液，吸取对照品溶液注入高效液相色谱仪，按照步骤2)色谱条件检测。更进一步地，所述对照品溶液每1ml含藁本内酯0.1～0.5mg/mL，丁烯基苯酞0.01～0.08mg/mL。进一步地，所述川芎地上部位指纹图谱应有20个共有特征峰，与藁本内酯参照物相应的峰为峰16，与丁烯基苯酞参照物相应的峰为峰17，计算各特征峰与峰17的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％范围之内；规定值为：峰1：0.2446，峰2：0.2631，峰3：0.4306，峰4：0.5600，峰5：0.6588，峰6：0.6962，峰7：0.7567，峰8：0.7703，峰9：0.8191，峰10：0.8226，峰11：0.8447，峰12：0.8877，峰13：0.9269，峰14：0.9657，峰15：0.9814，峰16：0.9921，峰17：1.0000，峰18：1.1425，峰19：1.1856，峰20：1.3283。本专利技术川芎地上部位(茎叶)的指纹图谱检测方法，填补了川芎地上部位质量检测的空白，为川芎地上部位建立了规范的质控体系。本专利技术川芎地上部位的指纹图谱，标定了20个共有峰，指认出了藁本内酯与丁烯基苯酞两个成分。与对照图谱相比，不同批次的川芎地上部位药材的指纹图谱相似度在0.942～0.990，相似度良好，表明不同产地川芎地上部位的化学成分具有很好的一致性，能用于川芎地上部位的质量控制。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1川芎地上部位HPLC对照图谱图2川芎地上部位HPLC指纹图谱图3川芎地上部位样品聚类分析图具体实施方式本专利技术具体实施方式中使用的试剂、试药、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。实施例1本专利技术川芎地上部位的指纹图谱检测1)供试品溶液的制备：取川芎地上部位样品粉末(过六号筛)2.0g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，补足失重，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得；2)对照品溶液的制备取藁本内酯对照品10mg，精密称定，于10mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，即得浓度为1.0780mg/mL的藁本内酯对照品储备液。精密量取储备液1.0mL，于5mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到浓度为0.2156mg/mL的藁本内酯对照品；取丁烯基苯酞对照品约10mg，精密称定，于25mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，即得浓度为0.4300mg/mL的丁烯基苯酞对照品储备液。精密量取储备液1.0mL，于10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到浓度为0.0430mg/mL的丁烯基苯酞对照品；3)分别吸取供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：色谱柱：KromasilC18(250×4.6mm,5μm)；检测波长：254nm；进样体积为20ul，流速为1.0ml/min，柱温为35℃；流动相：以0.1％磷酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：4)川芎地上部位指纹图谱有20个共有特征峰，与藁本内酯参照物相应的峰为峰16，与丁烯基苯酞参照物相应的峰为峰17，计算各特征峰与峰17的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％范围之内；规定值为：峰1：0.2446，峰2：0.2631，峰3：0.4306，峰4：0.5600，峰5：0.6588，峰6：0.6962，峰7：0.7567，峰8：0.7703，峰9：0.8191，峰10：0.8226，峰11：0.8447，峰12：0.8877，峰13：0.9269，峰14：0.9657，峰15：0.9814，峰16：0.9921，峰17：1.0000，峰18：1.1425，峰19：1.1856，峰20：1.3283。以下通过实验例来说明本专利技术的有益效果：实验例11仪器与试药1.1仪器HPLC-D本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：/n1)供试品溶液制备：取川芎地上部位粉碎，加甲醇提取，过滤，取续滤液即得；/n2)吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：/n色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以0.05～0.2％磷酸溶液为流动相A；以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种川芎地上部位的指纹图谱检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：
1)供试品溶液制备：取川芎地上部位粉碎，加甲醇提取，过滤，取续滤液即得；
2)吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以0.05～0.2％磷酸溶液为流动相A；以乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：





2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述提取为超声提取，超声提取时间30min。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述川芎地上部位与甲醇质量体积比为1～10g：10ml，优选2g：10ml。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述色谱条件中色谱柱为KromasilC18，规格4.6×250mm，5μm；流动相A磷酸溶液浓度为0.1％。


5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述色谱条件中流速1.0mL/min，进样量20μL，柱温35℃，检测波长254nm。


6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭成，周厚成，胡昌江，谭玉柱，闫洪玲，
申请(专利权)人：成都中医药大学，四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51