一种TBX5基因多态性检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种TBX5基因多态性检测试剂盒及其检测方法，属于分子生物学技术领域。所述试剂盒包括TBX5基因SNP位点rs883079基因型上游引物、下游引物、G/G型阳性参考品、A/A型阳性参考品、G/A型阳性参考品和其他必不可少的实现试剂盒功能的试剂；本发明专利技术的检测方法具有样本用量少、省时、省力、准确度高、成本低的特点，能够快速、简便地检测TBX5的基因多态性。

A test kit for TBX5 Gene Polymorphism and its detection method

【技术实现步骤摘要】
一种TBX5基因多态性检测试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及一种TBX5基因多态性检测试剂盒及其检测方法，属于分子生物学

技术介绍
先天性心脏病(congenitalheartdisease，CHD)是胎儿时期心脏血管发育异常所致的心血管畸形，也是小儿最常见的心脏病，是由于心脏、血管在胚胎发育过程中发生障碍所致的形态、结构、功能或代谢上的异常。国内外研究报道，CHD占据了出生缺陷疾病的1/3，根据WHO的最新统计资料，世界上每年大约有150万新生儿出生时患有心脏病。中国的先天性心脏病发病率约为2‰～5‰，每年新增先心病病例在15～20万，其发病率在新生儿中达0.4％～0.8％，是发病率最高的出生缺陷类型，在早产儿、死产和流产报道病例中发病率更高。在中国，先心病的发生率约为32.74/万，是常规监测报告显示的最常见的出生缺陷类型，也是目前婴幼儿死亡的首要原因。先天性心脏病预后严重，通常导致流产、死胎、死产、新生儿死亡，以及儿童、青少年和成人残疾，给社会和家庭带来沉重的负担。目前对于单纯性先天性心脏病的病因并不清楚，多数认为是遵循本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测先天性心脏病的SNP rs883079位点，处于TBX5基因3’端UTR区，12号染色体的第114355435位，当该位点均为G时，为未突变基因型，当该位点均为A时，为全突变基因型，当该位点既有G也有A时，为部分突变基因型。/n

【技术特征摘要】
1.用于检测先天性心脏病的SNPrs883079位点，处于TBX5基因3’端UTR区，12号染色体的第114355435位，当该位点均为G时，为未突变基因型，当该位点均为A时，为全突变基因型，当该位点既有G也有A时，为部分突变基因型。


2.一种用于检测先天性心脏病的引物，该引物为一对，上游引物核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，下游引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


3.权利要求2所述用于检测先天性心脏病的引物在制备用于检测先天性心脏病的试剂盒中的应用。


4.一种用于检测TBX5基因3’端SNPrs883079位点的试剂盒，所述试剂盒包括：
核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的上游引物；
核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的下游引物；
其他必不可少的实现试剂盒功能的试剂。


5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述其他必不可少的实现试剂盒功能的试剂包括：
qPCR的反应体系溶液、G/G型阳性样品、A/A型阳性样品和G/A型阳性样品。


6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的反应体系如下，按总体积20μl计：
HRMMasterMix10μl，浓度为30ng/μl的样品1μl，浓度为25mM/μl的Mg2+溶液1.6μl，浓度为6pmol/μl的上游引物1.0μl，浓度为6pmol/μl的下游引物1.0μl，ddH2O5.4μl；


7.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述G/G型阳性样品、A/A型阳性样品和G/A型阳性样品，浓度均为1000拷贝/μl；
所述G/G型阳性样品为含有SEQIDNO.3所述核苷酸序列的重组阳性质粒；
所述A/A型阳性样品为含有SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘毅，盖中涛，王莹，张海燕，
申请(专利权)人：济南市儿童医院，
类型：发明
国别省市：山东;37