抗流感病毒的全人中和性抗体26Ab及其应用制造技术

本发明专利技术公开了抗流感病毒的全人中和性抗体26Ab及其应用。具体地本发明专利技术公开了一株针对H3N2流感病毒的全人单克隆抗体26Ab，该抗体能够结合流感病毒血凝素蛋白(HA)，能够阻止H3N2亚型流感病毒侵染宿主细胞，在临床上具有预防和治疗H3N2亚型流感病毒感染的潜在价值。

All human neutralizing antibody 26ab against influenza virus and its application

【技术实现步骤摘要】
抗流感病毒的全人中和性抗体26Ab及其应用
本专利技术涉及医药领域，具体地涉及抗流感病毒的全人中和性抗体26Ab及其应用。
技术介绍
WHO的调查显示，全球每年约5-10％的成人和20-30％的儿童罹患季节性流感，导致300-500万住院病例和29-65万人死亡。而在我国，每年有高达6500万-1.9亿人患流行性感冒。季节性流行的毒株主要是H1N1、H3N2以及B型流感病毒。近年来，H3N2病毒频繁流行。2017年，H3N2病毒在香港地区流行，截止到8月份，约有四百多死亡病例。同年冬季，“澳大利亚H3N2流感”在英国迅速蔓延，除少数地区外，全英各州几乎全部沦陷，截止到2017年1月中旬，流感感染病例达2000例。因此，H3N2的流行给人类造成了巨大的危害。目前，国家许可用于治疗流感的药物主要为以下两大类：1)烷胺类(金刚烷胺和金刚乙胺)；2)流感病毒神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦和扎那米韦)。对烷胺类药物，已出现大量的耐药性流感毒株，因此目前世界卫生组织不建议使用烷胺类药物作为治疗流感的药物；目前大部分流感病毒(包括H3N2流感病毒)仍对奥司他韦和扎那米韦敏感，但在日本等地区也已经出现耐药性毒株，耐药性毒株的出现限制了这些化学小分子药物的大规模使用。治疗性抗体用于流感的等病毒感染性疾病的治疗早有报道，抗血清用于治疗SARS和重症H5N1禽流感病毒感染者的案例已经证明了抗体在治疗病毒感染中发挥的重要作用。具有广谱中和活性的抗流感病毒的治疗性抗体具有以下潜在优势，一方面它可以阻断病毒与靶细胞的结合，另一方面通过补体和T细胞、NK细胞等效应细胞的作用，将被病毒感染的细胞杀死。1986年，第一株治疗器官移植出现的排斥反应的鼠单抗——莫罗单抗-CD3(murmonabCD3,hocloneOKT3)获得美国FDA批准上市，但由于其在人体内会产生人抗鼠抗体(HAMA)反应，限制了应用。随着免疫学和分子生物学的发展，基因工程抗体迅速发展，嵌合抗体，人源化抗体和全人抗体生产技术不断发展，将HAMA反应降至最低乃至消除。2009年，美国FDA批准的14个药物中有4个为全人抗体，这标志着全人治疗性单克隆抗体时代的来临，全人抗体成为抗体药物未来的发展方向。因此，本领域仍然需要开发能够中和H3N2亚型流感病毒的全人单克隆抗体。
技术实现思路
本专利技术目的是提供了一种能够中和H3N2亚型流感病毒的全人单克隆抗体。本专利技术的第一方面，提供了一种抗体的重链可变区，所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:3所示的CDR1，SEQIDNO.:4所示的CDR2，和SEQIDNO.:5所示的CDR3。在另一优选例中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个(如1-3个，较佳地1-2个，更佳地1个)氨基酸并能够保留H3N2流感病毒HA蛋白结合亲和力的衍生序列。在另一优选例中，所述重链可变区还包括人源的FR区或鼠源的FR区。在另一优选例中，所述重链可变区具有SEQIDNO.:1所示的氨基酸序列。本专利技术的第二方面，提供了一种抗体的重链，所述的重链具有如本专利技术第一方面所述的重链可变区。在另一优选例中，所述的抗体的重链还包括重链恒定区。在另一优选例中，所述的重链恒定区为人源、鼠源或兔源的。本专利技术的第三方面，提供了一种抗体的轻链可变区，所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:6所示的CDR1’，氨基酸序列为DAS的CDR2’，和SEQIDNO.:7所示的CDR3’。在另一优选例中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个(如1-3个，较佳地1-2个，更佳地1个)氨基酸并能够保留H3N2流感病毒HA蛋白结合亲和力的衍生序列。在另一优选例中，所述轻链可变区还包括人源的FR区或鼠源的FR区。在另一优选例中，所述轻链可变区具有SEQIDNO.:2所示的氨基酸序列。本专利技术的第四方面，提供了一种抗体的轻链，所述的轻链具有如本专利技术第三方面所述的轻链可变区。在另一优选例中，所述的抗体的轻链还包括轻链恒定区。在另一优选例中，所述的轻链恒定区为人源、鼠源或兔源的。本专利技术的第五方面，提供了一种抗体，所述抗体具有：(1)如本专利技术第一方面所述的重链可变区；和/或(2)如本专利技术第三方面所述的轻链可变区；或者，所述抗体具有：如本专利技术第二方面所述的重链；和/或如本专利技术第四方面所述的轻链。在另一优选例中，所述的抗体为特异性抗H3N2流感病毒HA蛋白的抗体。在另一优选例中，所述抗体选自：动物源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、或其组合。在另一优选例中，所述的抗体为双链抗体、或单链抗体。在另一优选例中，所述的抗体为单克隆抗体、或多克隆抗体。在另一优选例中，所述的抗体是部分或全人源化的单克隆抗体。在另一优选例中，所述的抗体为药物偶联物形式。在另一优选例中，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:1所示；并且所述的抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:2所示。本专利技术的第六方面，提供了一种重组蛋白，所述的重组蛋白具有：(i)如本专利技术第一方面所述的重链可变区、如本专利技术第二方面所述的重链、如本专利技术第三方面所述的轻链可变区、如本专利技术第四方面所述的轻链、或本专利技术第五方面所述的抗体；以及(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。在另一优选例中，所述的标签序列包括6His标签、GGGS序列、FLAG标签。在另一优选例中，所述的重组蛋白(或多肽)包括融合蛋白。在另一优选例中，所述的重组蛋白为单体、二聚体、或多聚体。在另一优选例中，所述的重组蛋白特异性结合H3N2流感病毒HA蛋白。本专利技术的第七方面，提供了一种CAR构建物，所述的CAR构建物的抗原结合区域的scFv段为特异性结合于HA蛋白的结合区，并且所述scFv具有如本专利技术第一方面所述的重链可变区和如本专利技术第三方面所述的轻链可变区。本专利技术的第八方面，提供了一种重组的免疫细胞，所述的免疫细胞表达外源的如本专利技术第七方面所述的CAR构建物。在另一优选例中，所述的免疫细胞选自下组：NK细胞、T细胞。在另一优选例中，所述的免疫细胞来自人或非人哺乳动物(如鼠)。本专利技术的第九方面，提供了一种抗体药物偶联物，所述的抗体药物偶联物含有：(a)抗体部分，所述抗体部分选自下组：如本专利技术第一方面所述的重链可变区、如本专利技术第二方面所述的重链、如本专利技术第三方面所述的轻链可变区、如本专利技术第四方面所述的轻链、或如本专利技术第五方面所述的抗体、或其组合；和(b)与所述抗体部分偶联的偶联部分，所述偶联部分选自下组：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、酶、或其组合。在另一优选例中，所述偶联物选自：荧光或发光本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体的重链可变区，其特征在于，所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：/nSEQ ID NO.:3所示的CDR1，/nSEQ ID NO.:4所示的CDR2，和/nSEQ ID NO.:5所示的CDR3。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗体的重链可变区，其特征在于，所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
SEQIDNO.:3所示的CDR1，
SEQIDNO.:4所示的CDR2，和
SEQIDNO.:5所示的CDR3。


2.一种抗体的重链，其特征在于，所述的重链具有如权利要求1所述的重链可变区。


3.一种抗体的轻链可变区，其特征在于，所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
SEQIDNO.:6所示的CDR1’，
氨基酸序列为DAS的CDR2’，和
SEQIDNO.:7所示的CDR3’。


4.一种抗体的轻链，其特征在于，所述的轻链具有如权利要求3所述的轻链可变区。


5.一种抗体，其特征在于，所述抗体具有：
(1)如权利要求1所述的重链可变区；和/或
(2)如权利要求3所述的轻链可变区；
或者，所述抗体具有：如权利要求2所述的重链；和/或如权利要求4所述的轻链。


6.如权利要求5所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:1所示；并且所述的抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:2所示。


7.一种重组蛋白，其特征在于，所述的重组蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙兵，孙晓玉，卢晓，凌志洋，
申请(专利权)人：中国科学院上海巴斯德研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31