一种抗狂犬病病毒单克隆抗体、制备方法及用途技术

本发明专利技术涉及医学生物抗体技术领域，提供了一种抗狂犬病病毒单克隆抗体、制备方法及用途。该单克隆抗体的轻链可变结构域包含高变区CDR1、CDR2、CDR3，氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1～3所示；重链可变结构域包含高变区CDR1＇、CDR2＇、CDR3＇，氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4～6所示。经检测，该单克隆抗体具有高体外中和活性、高中和指数，抗原表位靠近狂犬病病毒糖蛋白中和II表位或与位于中和II表位内，其针对的关键氨基酸位点一个为aa205，另一个由37、194和204位氨基酸共同构成，对街毒株有很好的中和能力；此外，其Tm值为70.58℃，具有较好的热稳定性，提示有可能作为抗狂犬病病毒被动免疫制剂产品或开发体外诊断试剂盒。

A monoclonal antibody against rabies virus, its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种抗狂犬病病毒单克隆抗体、制备方法及用途
本专利技术涉及医学生物抗体
，涉及一株具有较高体外抗狂犬病病毒活性的抗狂犬病病毒单克隆抗体，其制备方法及其在检测和中和狂犬病病毒方面的用途。
技术介绍
狂犬病毒(Rabiesvirus,RV)属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)、狂犬病毒属(Lyssavirus)。外形呈弹状，核衣壳呈螺旋对称，表面具有包膜，内含有单链RNA，为RNA病毒，是引起狂犬病的病原体。狂犬病毒主要分为7个基因型，编码5种结构蛋白，其中糖蛋白(Glycoprotein，G)为跨膜蛋白，构成病毒表面的突起，是主要保护性抗原，可以诱导保护性抗体产生。狂犬病病毒疫苗是预防狂犬病最有效的手段，但对于III级以上暴露，单独使用狂犬病病毒疫苗可能导致免疫失败，需要与被动免疫制剂一同使用。抗狂犬病病毒被动免疫制剂包括抗狂犬病人免疫球蛋白和马抗狂犬病病毒血清，二者均能产生有效的保护。但抗狂犬病人免疫球蛋白价格昂贵且存在伦理问题，马抗狂犬病病毒血清则存在血清病的风险，在一定程度上限制了上述产品的使用。因此需要研发新一代的抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗狂犬病病毒单克隆抗体，其特征在于，具有：/n轻链可变结构域，包含高变区CDR1、CDR2、CDR3；以及/n重链可变结构域，包含高变区CDR1＇、CDR 2＇、CDR 3＇，/n其中，所述CDR1的氨基酸序列为：Ala-Ser-Asn-Ile-Arg-Ser-Ser-Thr；/n所述CDR2的氨基酸序列为：Gly-Asp-His；/n所述CDR3的氨基酸序列为：Ala-Val-Trp-Asp-Asp-His-Leu-Asn-Ile-Val-Leu；/n所述CDR 1＇的氨基酸序列为：Gly-Ala-Ser-Thr-Asn-Ser-Tyr-Tyr；/n所述CDR 2＇的氨基酸序列为：M...

【技术特征摘要】
1.一种抗狂犬病病毒单克隆抗体，其特征在于，具有：
轻链可变结构域，包含高变区CDR1、CDR2、CDR3；以及
重链可变结构域，包含高变区CDR1＇、CDR2＇、CDR3＇，
其中，所述CDR1的氨基酸序列为：Ala-Ser-Asn-Ile-Arg-Ser-Ser-Thr；
所述CDR2的氨基酸序列为：Gly-Asp-His；
所述CDR3的氨基酸序列为：Ala-Val-Trp-Asp-Asp-His-Leu-Asn-Ile-Val-Leu；
所述CDR1＇的氨基酸序列为：Gly-Ala-Ser-Thr-Asn-Ser-Tyr-Tyr；
所述CDR2＇的氨基酸序列为：Met-Asn-Tyr-Arg-Gly-Thr-Pro；
所述CDR3＇的氨基酸序列为：Ala-Arg-Val-Asp-Asn-Trp-Asn-Phe-Asp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile。


2.根据权利要求1所述的抗狂犬病病毒单克隆抗体，其特征在于：
其中，该单克隆抗体选自包含有轻链可变结构域高变区和重链可变结构域高变区的片段、包含有轻链可变结构域和重链可变结构域的片段、或具有全长重链和轻链的完整抗体分子。


3.根据权利要求1所述的抗狂犬病病毒单克隆抗体，其特征在于：
编码该单克隆抗体轻链可变结构域的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示，编码重链可变结构域的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示，
扩增轻链可变结构域的上下游引物序列分别如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示，扩增重链可变结构域的上下游引物序列分别如SEQIDNO.11和SEQIDNO.12所示。


4.一种表达载体，其特征在于，该表达载体承载有权利要求1～3任一项所述的抗狂犬病病毒单克隆抗体或编码其的核苷酸序列。


5.权利要求1所述的抗狂犬病病毒单克隆抗体在制备预防或治疗狂犬病药物中的用途。

【专利技术属性】
技术研发人员：毛晓燕，陈继军，安晨，赵晓瑞，叶星，
申请(专利权)人：兰州生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：甘肃;62