一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用。本发明专利技术经优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因如SEQ ID NO.1所示，该序列是针对大肠杆菌表达系统进行的部分优化。与密码子全部优化或不优化相比，该序列能够高水平表达重组蛋白，并能够组装成完整的病毒样颗粒。本发明专利技术还公开了制备病毒样颗粒的方法，涉及猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因的优化、基因的克隆及其在大肠杆菌中表达，以及重组蛋白的纯化及病毒样颗粒的制备。本发明专利技术简单易行，成本较低，实现了猪圆环病毒3型衣壳蛋白在大肠杆菌中稳定表达，表达的重组衣壳蛋白可自组装形成病毒样颗粒，为猪圆环病毒3型的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了技术手段。

An optimized capsid protein gene of porcine circovirus type 3 and its application in preparation of virus like particles

【技术实现步骤摘要】
一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用
本专利技术涉及一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因，还涉及该基因在制备病毒样颗粒中的应用。本专利技术属于动物基因工程与动物病毒学

技术介绍
2015年6月,美国北卡罗来纳州一个商品猪场母猪群暴发皮炎肾病综合征(PDNS)，发病期间，该场母猪死亡率较历史平均水平增加了10.2％，受胎率减少了0.6％，窝均木乃伊胎相比历史平均水平增加1.19％，流产出的木乃伊胎大小不一。临床上，感染母猪厌食，皮肤多处出现丘疹性皮炎；组织结构上观察，皮肤损伤以急性坏死性皮炎为特点；肾皮质区肾小管扩张，管状黏膜上皮细胞退化，肾皮质间质及肾小球大量淋巴细胞及巨噬细胞弥漫性浸润。死亡母猪表现出皮炎肾病综合征(PDNS)。以上关于母猪眼观病变以及组织学病变，包括流产症状，都与以前报道的圆环病毒相关疾病基本一致。然而所有母猪组织样本，包括肾脏、淋巴结、肺脏以及皮肤组织样本，经免疫组化(IHC)检测以及定量PCR(qPCR)检测发现PCV2，PRRSV，IAV均为阴性，此外，木乃伊胎组织定量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种表达载体，其特征在于，含有权利要求1所述的优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因。


3.一种宿主细胞，其特征在于，含有权利要求2所述的表达载体。


4.权利要求1所述的优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因在制备猪圆环病毒3型病毒样颗粒中的应用。


5.一种制备猪圆环病毒3型病毒样颗粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)合成权利要求1所述的优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因；
2)将合成的基因连接至pET30a载体，产物转化到E.coliDH5α感受态细胞，挑菌鉴定后抽提质粒，重组质粒命名为pET30a-rCap；
3)将p...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂亚斌，蔡雪辉，王刚，孙明霞，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心，哈尔滨维科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙;23