一种高效表达PCV2 Cap、PCV3 Cap融合蛋白的方法技术

本发明专利技术提供了一种高效表达PCV2 Cap、PCV3 Cap融合蛋白的方法，首先构建了一株高效表达PCV2Cap蛋白和PCV3Cap蛋白的重组杆状病毒：将截去核定位信号的PCV2Cap蛋白的核苷酸序列与PCV3Cap蛋白的核苷酸序连接，中间用一段疏水的柔性蛋白linker序列连接，在PCV2Cap蛋白和PCV3Cap蛋白序列的N端加入蜂素信号肽序列，促使其分泌表达。重组阳性杆状病毒感染sf9昆虫细胞表达的蛋白进行了多种翻译后修饰，接近于天然的病毒编码蛋白，具有较高的生物学活性，而且杆状病毒具有高度的种属特异性，仅感染昆虫细胞，对脊椎动物细胞无感染性，其表达产物安全可靠，经简单处理即可用于后续试验。因此，本发明专利技术的方法表达PCV2 Cap和PCV3 Cap融合蛋白，比传统方式更加安全有效。

A method of high expression of PCV2 cap and pcv3 cap fusion protein

【技术实现步骤摘要】
一种高效表达PCV2Cap、PCV3Cap融合蛋白的方法
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种高效表达PCV2Cap、PCV3Cap融合蛋白的方法。
技术介绍
猪圆环病毒（Porcinecircovirus，PCV）主要侵害断奶仔猪和育肥猪，可以引起多种猪圆环病毒相关性疾病，养猪业的健康发展带来巨大威胁。按照抗原性、致病性以及基因同源性的不同，将PCV划分成猪圆环病毒1型（Porcinecircovirus1，PCV1）、猪圆环病毒2型（Porcinecircovirus2，PCV2）以及猪圆环病毒3型（Porcinecircovirus2,PCV2）三种基因型。已知PCV1无致病性，而PCV2有较强的致病性，可引起多种猪圆环病毒相关性疾病（Porcinecircovirus-associateddiseases,PCVADs），其中最主要的是断奶仔猪多系统衰弱综合征（Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS），该病在我国乃至世界猪群中广泛存在，已成为一种常见病和多发病，且多与其它病原发生混本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PCV2 Cap、PCV3 Cap融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括截短PCV2 Cap蛋白段、接头序列、PCV3 Cap蛋白段和蜂素信号肽区域；所述截短PCV2 Cap蛋白段为去除核定位信号的PCV2 Cap蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.一种PCV2Cap、PCV3Cap融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括截短PCV2Cap蛋白段、接头序列、PCV3Cap蛋白段和蜂素信号肽区域；所述截短PCV2Cap蛋白段为去除核定位信号的PCV2Cap蛋白。


2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述接头序列为疏水柔性肽链；优选的，所述接头序列如SEQIDNO:1所示。


3.一种如权利要求1或2所述的融合蛋白的核酸序列。


4.根据权利要求3所述的核酸序列，其特征在于，包括如SEQIDNO:2所示的序列。


5.一种如权利要求3或4所述的核酸序列的载体、重组杆粒和重组杆状病毒，其特征在于，所述核酸序列在载体、重组杆粒或重组杆状病毒中为双拷贝；
优选的，所述载体为pFastBacTM质粒；更优选为pFastBacTMDual质粒。


6.一种如权利要求5所述的载体、重组杆粒或重组杆状病毒在表达PCV2Cap、PCV3C...

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊，王硕，吴晓燕，时建立，彭喆，李琛，徐绍建，
申请(专利权)人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37