A型FMDV 1D蛋白-铁蛋白融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了A型FMDV 1D蛋白‑铁蛋白融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法。本发明专利技术将含有A型FMDV优势表位与铁蛋白片段的核苷酸序列串联，设计并合成了A型FMDV 1D蛋白表位‑铁蛋白片段；然后与促溶标签和亲和标签EW29相连，得到EW29/促溶标签/A型FMDV 1D蛋白表位‑铁蛋白片段，诱导、亲和纯化后即得A型FMDV 1D蛋白‑铁蛋白融合蛋白。电镜结果显示，该融合蛋白形成了20～25 nm的蛋白笼纳米颗粒。本发明专利技术为进一步研制安全、有效的A型FMDV 1D蛋白疫苗奠定了基础。

Type a FMDV 1D protein ferritin fusion protein, protein cage nanoparticles and their preparation methods

【技术实现步骤摘要】
A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法
本专利技术属于生物
，具体涉及A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法。
技术介绍
通过DNA重组技术，融合蛋白已经很容易在原核表达系统（大肠杆菌）和真核表达系统（酵母和哺乳动物细胞）进行高效表达，其产物在生物和医学上得到了广泛应用，也促进了其快速发展。与真核表达系统相比，大肠杆菌由于易操作、廉价和产量高等优点，仍然是目前生产重组蛋白的主要宿主。但是，当大肠杆菌细菌系统表达重组蛋白时，有许多本身难以克服的缺点：1、重组蛋白往往以无活性的包涵体形式出现；2、缺乏真核细胞翻译后修饰（糖基化、磷酸化和乙酰化等）机制，得到的重组蛋白虽然在一级氨基酸序列正确，但在高级结构和构象上与天然蛋白相差较大，无活性或活性极差；3、宿主细胞（大肠杆菌）自身蛋白成为热原，难以除去，存在安全性，这些问题限制了原核表达的重组蛋白在实际中的进一步应用。鉴于此，选择更有效的亲和促溶性标签以期获得纯度高、可溶性好，活性强的重组蛋白至关重要。来自蚯蚓（Lumbricus本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.A型FMDV 1D蛋白-铁蛋白融合蛋白，其特征在于，包括亲和标签、促溶标签、A型FMDV1D蛋白表位和铁蛋白片段，所述促溶标签位于亲和标签的C端，所述A型FMDV 1D蛋白表位位于促溶标签的C端，所述铁蛋白片段位于A型FMDV 1D蛋白表位的C端，亲和标签为EW29标签，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，促溶标签的氨基酸序列如SEQ ID NO.2～9所示；该A型FMDV 1D蛋白-铁蛋白融合蛋白可自组装形成铁蛋白包封A型FMDV 1D蛋白的蛋白笼纳米颗粒。/n

【技术特征摘要】
1.A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白，其特征在于，包括亲和标签、促溶标签、A型FMDV1D蛋白表位和铁蛋白片段，所述促溶标签位于亲和标签的C端，所述A型FMDV1D蛋白表位位于促溶标签的C端，所述铁蛋白片段位于A型FMDV1D蛋白表位的C端，亲和标签为EW29标签，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，促溶标签的氨基酸序列如SEQIDNO.2～9所示；该A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白可自组装形成铁蛋白包封A型FMDV1D蛋白的蛋白笼纳米颗粒。


2.根据权利要求1所述的A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白，其特征在于，所述A型FMDV1D蛋白表位的氨基酸序列如SEQIDNO.10所示；所述铁蛋白片段的氨基酸序列如SEQIDNO.11所示。


3.根据权利要求1所述的A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白，其特征在于，表达所述EW29标签的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示，表达所述促溶标签的核苷酸序列如SEQIDNO.13～20所示。


4.根据权利要求2所述的A型FMDV1D蛋白-铁蛋白融合蛋白，其特征在于，表达所述A型FMDV1D蛋白表位的核苷酸序列如SEQIDNO.21所示；表达所述铁蛋白片段的核苷酸序列如SEQIDNO.22所示。


5.权利要求1～4任一项所述的A型FM...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭玉堃，于朋伟，郭豫杰，曾磊，杨国宇，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南;41