一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法技术

本发明专利技术公开了一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，本发明专利技术通过对卵子进行ICSI方式受精采集胚胎培养液，不会对胚胎造成任何损伤,有效避免PGS过程中可能出现的样本活检创伤问题,操作简便，易于开展，该检测方法适用于人群胚胎染色体异常高发人群:高龄、反复流产、反复植入失败、重度少弱精症、染色体异常等情况。该发明专利技术可在胚胎培养早期，先于囊胚期进行染色体检测，将检测时间提前了两天。

A method of detecting embryo chromosome in blastomere stage of embryo culture medium

【技术实现步骤摘要】
一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法
本专利技术涉及一种检测方法，尤其涉及一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法。
技术介绍
植入前遗传学诊断(PreimplantationGeneticDiagnosis,PGD)和植入前遗传学筛查(PreimplantationGeneticScreening,PGS)是针对体外培养的胚胎在植入母体前开展的遗传学检测。PGD和PGS的检测样本主要来源于胚胎活检的细胞，根据体外胚胎所处发育时期不同，选取单个(胚胎卵裂期)或者少数几个细胞(囊胚期)，之后通过荧光原位杂交(FluorescenceinSituHybridization，FISH)技术或高通量测序技术(nextgenerationsequencing，NGS)等对活检组织携带的遗传物质进行分析，确认其染色体及基因序列的情况，选取染色体正常的胚胎进行移植，用于提高胚胎种植成功率以及阻断遗传病的垂直传递。在既往的研究中，人们发现在胚胎培养液中可检测到部分游离的基因组DNA和线粒体DNA，早期胚胎中这些DNA的数量可用于胚胎质量评估本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，其特征在于：/n包括以下步骤/nA胚胎培养液的获得：对于辅助生殖助孕患者，取卵后采用单精子胞浆内注射(ICSI)方式通过对单精子注射方法获得受精卵，将其培养至不超过第3天卵裂球期之后转移至新制备的囊胚培养微滴中进行囊胚培养，将形成囊胚的胚胎吸出，转移至新的胚胎培养液中或者进入玻璃化冻存流程，剩余的原胚胎培养液即检测时所需要收集的样本；/nB胚胎培养液的采集：将所述原胚胎培养液(20-30ul)转移至收集液中离心处理混合；/nC胚胎培养液中微量DNA的全基因组扩增：向所述胚胎培养液与裂解液的混合物中加入蛋白消化酶后对裂解酶进行失活处理，然后进行基...

【技术特征摘要】
1.一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，其特征在于：
包括以下步骤
A胚胎培养液的获得：对于辅助生殖助孕患者，取卵后采用单精子胞浆内注射(ICSI)方式通过对单精子注射方法获得受精卵，将其培养至不超过第3天卵裂球期之后转移至新制备的囊胚培养微滴中进行囊胚培养，将形成囊胚的胚胎吸出，转移至新的胚胎培养液中或者进入玻璃化冻存流程，剩余的原胚胎培养液即检测时所需要收集的样本；
B胚胎培养液的采集：将所述原胚胎培养液(20-30ul)转移至收集液中离心处理混合；
C胚胎培养液中微量DNA的全基因组扩增：向所述胚胎培养液与裂解液的混合物中加入蛋白消化酶后对裂解酶进行失活处理，然后进行基因组预扩增反应；
D将全基因组扩增后的DNA产物利用illuminar或lifetechnology平台进行高通量测序，并针对各染色体情况进行拷贝数分析，以鉴定胚胎的染色体状态是否正常、出现包括染色体重复、缺失或部分嵌合状态的状态。


2.根据权利要求1所述的胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，其特征在于：所述裂解酶选自蛋白酶K、QiagenProtease、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和溶菌酶中的一种或多种，所述裂解酶的浓度为1-25μg/ml。


3.根据权利要求1所述的胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，其特征在于：所述收集液的成分优选为PH为7.2的Tris-Cl20～40mM，EDTA0.5～2.5mM，KCl10～25mM以及3％的去垢剂，去垢剂为NP-40、SDS或TritonX-100的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏家骢，李永刚，武晓茸，李明颖，相立峰，曾鹏，李云秀，白云，
申请(专利权)人：云南省第一人民医院，晏家骢，
类型：发明
国别省市：云南;53