本发明专利技术公开了一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，涉及生物医药技术领域，包括第一试剂，第一试剂包括如下成分：124‑126mmol/L的咪唑、2‑3mmol/L的醋酸镁、12‑13mmol/L的乙二胺四乙酸、34‑34.3mmol/L的甘露醇、6‑6.5mmol/L的单磷酸腺苷、0.01‑0.015mmol/L的二腺苷五磷酸锂、2‑3mmol/L的还原性辅酶Ⅱ、0.8‑1.2g/L的Proclin150、3.5‑4ku/L的已糖激酶、24‑26mmol/L的N‑乙酰半胱氨酸、2‑3mmol/L的亚硫酸钠、2‑3ml/L的抗人CK‑M抗体，本发明专利技术提供一种改进型的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，灵敏度更高、重复性更好、准确性更高、稳定性更好。
【技术实现步骤摘要】
一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒
本专利技术涉及生物医药
，更具体地说，它涉及一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒。
技术介绍
磷酸肌酸激酶同工酶(CKMB)存在于人体细胞的胞浆和线粒体中，不同组织中含量不同，心肌含量最高。CK-MB属于特异性较强的一种心肌标志物。肌酸激酶具有3种同工酶，CK-BB，CK-MB，CK-MM。CK-MB是至今为止诊断心肌梗塞最佳的血清酶指标。人体各组织除腓肠肌外，只有心肌含有较高的CK-MB，可达40％以上，故此同工酶对诊断心肌梗塞的特异性可高达100％。心梗发生时，血清CK-MB可增高10-25倍，超过CK总活力增高的倍数(10-12)倍。磷酸肌酸激酶同工酶(CKMB)测定方法需要较高的灵敏度和特异性。由最初免疫电泳的定性检测，到单克隆胶体金法和酶法的定量检测，发展十分迅速。目前，酶法的定量检测是最为普遍通用的方法，但是胶乳颗粒增强比浊法存在灵敏度较低，精密度、准确性、线性范围等方面的问题，在临床应用上存在着局限性，因此，存在待改进之处。
技术实现思路
针对现有技术中所存在的不足，本专利技术目的在于提出一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，具体方案如下：一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒,包括第一试剂，所述第一试剂包括如下成分：124-126mmol/L的咪唑、2-3mmol/L的醋酸镁、12-13mmol/L的乙二胺四乙酸、34-34.3mmol/L的甘露醇、6-6.5mmol/L的单磷酸腺苷、0.01-0.015mmol/L的二腺苷五磷酸锂、2-3mmol/L的还原性辅酶Ⅱ、0.8-1.2g/L的Proclin150、3.5-4ku/L的已糖激酶、24-26mmol/L的N-乙酰半胱氨酸、2-3mmol/L的亚硫酸钠、2-3ml/L的抗人CK-M抗体。进一步的，所述咪唑、醋酸镁、乙二胺四乙酸、甘露醇、单磷酸腺苷、二腺苷五磷酸锂、还原性辅酶Ⅱ、Proclin150、已糖激酶、N-乙酰半胱氨酸、亚硫酸钠、抗人CK-M抗体在所述第一试剂中的含量分别为：125mmol/L、2.5mmol/L、12.5mmol/L、34.1mmol/L、6.25mmol/L、0.0125mmol/L、2.5mmol/L、1g/L、3.75ku/L、25mmol/L、2.5mmol/L、2.5ml/L。进一步的，还包括第二试剂，所述第二试剂包括如下成分：19-21mmol/L的磷酸盐缓冲液、1g/L的Proclin150、149.76-149.8mmol/L的磷酸肌酸、54.87-54.91mmol/L的葡萄糖、11.85-11.89mmol/L的5‘-腺苷二磷酸二钠盐、1-3g/L的牛血清白蛋白、28-32ku/L的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、0.1-0.3ml/L的庆大霉素。进一步的，所述磷酸盐缓冲液、Proclin150、磷酸肌酸、葡萄糖、5‘-腺苷二磷酸二钠盐、牛血清白蛋白、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、庆大霉素在所述第二试剂中的含量分别为：20mmol/L、1g/L、149.78mmol/L、54.89mmol/L、11.87mmol/L、2g/L、30ku/L、0.2ml/L。进一步的，所述第一试剂的制作规程包括如下步骤：S1：称量所述第一试剂中的对应成分，S2：于容器内加水0.8L，加入称量好的咪唑，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的醋酸镁，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌加入称量好的乙二胺四乙酸，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的甘露醇，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的单磷酸腺苷，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的二腺苷五磷酸锂，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的还原性辅酶Ⅱ，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin150，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的已糖激酶，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的N-乙酰半胱氨酸，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S3：对所述S2中的溶液在温度为20℃～25℃下调整PH值至6.72～6.62，加入称量好的亚硫酸钠，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的抗人CK-M抗体，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S4：对所述S3的溶液用工艺用水稀释至1L，用磁力搅拌器2-3档搅拌2h。进一步的，在第一试剂的制作规程的所述S2中，搅拌时间为27-33min。进一步的，所述第二试剂的制作规程包括如下步骤：S1：称量所述第二试剂中的对应成分，S2：于1L容器内加水0.8L，加入称量好的磷酸盐缓冲液，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin150，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌加入称量好的磷酸肌酸，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的葡萄糖，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的5‘-腺苷二磷酸二钠盐，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的牛血清白蛋白，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S3：对所述S2中的溶液在温度为20℃下调整PH值至9.3，搅拌加入称量好的庆大霉素，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S4：对所述S3的溶液用工艺用水稀释至1L。进一步的，在所述第二试剂的制作规程的所述S4中，对稀释后的溶液用磁力搅拌器2-3档搅拌2h。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术提供一种改进型的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，灵敏度更高、重复性更好、准确性更高、稳定性更好，参与偶联反应的成分都很稳定，不会引起内外源物质的干扰，可长时间使用，满足临床实际需要。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细说明，但本专利技术的实施方式不仅限于此。制备例1、主要材料以及仪器第一试剂：咪唑、醋酸镁、乙二胺四乙酸、甘露醇、单磷酸腺苷、二腺苷五磷酸锂、还原性辅酶Ⅱ、Proclin150、已糖激酶、N-乙酰半胱氨酸、亚硫酸钠、抗人CK-M抗体。第二试剂：磷酸盐缓冲液、Proclin150、磷酸肌酸、葡萄糖、5‘-腺苷二磷酸二钠盐、牛血清白蛋白、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、庆大霉素。仪器：AL104精密电子天平：灵敏度0.1mg，用于称量工序；TC30K型精密电子天平：灵敏度10mg,用于称量工序；T1000Y型电子天平：灵敏度10mg,用于称量工序；磁力搅拌器：99-1型，用于溶解工序。精密酸度计：FE20,用于PH工序。电子秤：灵敏度20g,用于定容工序。玻璃烧杯等玻璃器皿；定量加量器：1ml、100-1000ul、20-200ul；移液管：10ml、5ml。2、制备步骤2.1第一试剂的制作规程S1：使用AL104精密电子天平、TC30K型精密电子天平、T1000Y型电子天平、定量加量器或者移液管称量第一试剂本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒,其特征在于，包括第一试剂，所述第一试剂包括如下成分：/n124-126mmol/L的咪唑、2-3mmol/L的醋酸镁、12-13mmol/L的乙二胺四乙酸、34-34.3mmol/L的甘露醇、6-6.5mmol/L的单磷酸腺苷、0.01-0.015mmol/L的二腺苷五磷酸锂、2-3mmol/L的还原性辅酶Ⅱ、0.8-1.2g/L的Proclin150、3.5-4ku/L的已糖激酶、24-26mmol/L的N-乙酰半胱氨酸、2-3mmol/L的亚硫酸钠、2-3ml/L的抗人CK-M抗体。/n
【技术特征摘要】
1.一种磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒,其特征在于，包括第一试剂，所述第一试剂包括如下成分：
124-126mmol/L的咪唑、2-3mmol/L的醋酸镁、12-13mmol/L的乙二胺四乙酸、34-34.3mmol/L的甘露醇、6-6.5mmol/L的单磷酸腺苷、0.01-0.015mmol/L的二腺苷五磷酸锂、2-3mmol/L的还原性辅酶Ⅱ、0.8-1.2g/L的Proclin150、3.5-4ku/L的已糖激酶、24-26mmol/L的N-乙酰半胱氨酸、2-3mmol/L的亚硫酸钠、2-3ml/L的抗人CK-M抗体。
2.根据权利要求1所述的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其特征在于，所述咪唑、醋酸镁、乙二胺四乙酸、甘露醇、单磷酸腺苷、二腺苷五磷酸锂、还原性辅酶Ⅱ、Proclin150、已糖激酶、N-乙酰半胱氨酸、亚硫酸钠、抗人CK-M抗体在所述第一试剂中的含量分别为：125mmol/L、2.5mmol/L、12.5mmol/L、34.1mmol/L、6.25mmol/L、0.0125mmol/L、2.5mmol/L、1g/L、3.75ku/L、25mmol/L、2.5mmol/L、2.5ml/L。
3.根据权利要求1所述的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其特征在于，还包括第二试剂，所述第二试剂包括如下成分：
19-21mmol/L的磷酸盐缓冲液、1g/L的Proclin150、149.76-149.8mmol/L的磷酸肌酸、54.87-54.91mmol/L的葡萄糖、11.85-11.89mmol/L的5‘-腺苷二磷酸二钠盐、1-3g/L的牛血清白蛋白、28-32ku/L的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、0.1-0.3ml/L的庆大霉素。
4.根据权利要求3所述的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液、Proclin150、磷酸肌酸、葡萄糖、5‘-腺苷二磷酸二钠盐、牛血清白蛋白、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、庆大霉素在所述第二试剂中的含量分别为：20mmol/L、1g/L、149.78mmol/L、54.89mmol/L、11.87mmol/L、2g/L、30ku/L、0.2ml/L。
5.根据权利要求1所述的磷酸肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂的制作规程包括如下步骤：
S1：称量所述第...
【专利技术属性】
技术研发人员：高国华，
申请(专利权)人：上海高踪医疗器械科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。