一种用于血液分析的溶血素、其制备方法、试剂及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种用于血液分析的溶血素、其制备方法、试剂及试剂盒，属于血液分析技术领域。该用于血液分析的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂、非离子表面活性剂、缓冲剂、pH调节剂、电导率补充剂。该用于血液分析的试剂包括染色液以及上述的溶血素；其中，染色液包括以下组分：不对称菁类染料和助溶剂。本发明专利技术实施例提供的试剂只由一种溶血素和一种染色液组成，其可替代进口原装试剂实现在一个通道里同时对有血液中的核红细胞和嗜碱白细胞进行准确地检测，从而可以降低血液分析成本以及提高分析操作的便捷性。

A hemolysin for blood analysis, its preparation method, reagent and kit

【技术实现步骤摘要】
一种用于血液分析的溶血素、其制备方法、试剂及试剂盒
本专利技术涉及血液分析
，具体是一种用于血液分析的溶血素、其制备方法、试剂及试剂盒。
技术介绍
由于临床的需要，五分类血液分析仪的需求越来越多。基于各厂家白细胞、有核红细胞分类原理不同，所用的试剂也不一样。主流五分类血液分析仪分类原理主要包括高频电导激光散射联合检测法(即VCS技术)、光散射和细胞染色联合检测法、电阻抗和射频电导联合检测法、多角度激光偏振光散射检测法等，但其方法不外乎为光学法加染色技术，其所用试剂主要包括溶血素和染色液。然而，目前大多数五分类血球仪是通过两个通道来分别检测有核红细胞和嗜碱细胞，即有核红细胞检测需要一种溶血素，而检测嗜碱细胞又需要另一种不同的溶血素，操作起来比较不方便。另外，虽然，现有技术中也有用于检测嗜碱细胞和有核红细胞的试剂，但其大多数是国外进口原装试剂，即目前有核红细胞、嗜碱细胞分析试剂存在试剂配方难度大、使用成本高、长期依赖进口、购买渠道繁琐等问题，其无法及时满足国内医院的正常使用。因此，开发一种配方简易、成本较低、能够代替进口原装试剂、可降低对国外进口产品的依赖性的血液分析试剂，是十分必要的。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于提供一种用于血液分析的溶血素，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术实施例提供如下技术方案：一种用于血液分析的溶血素，每升所述的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂0.1～2g、非离子表面活性剂1～5g、缓冲剂5～10g、pH调节剂1～5g、电导率补充剂1～5g。作为本专利技术实施例的一个优选方案，每升所述的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂0.5～1.5g、非离子表面活性剂2.5～4g、缓冲剂6～8g、pH调节剂2～3g、电导率补充剂3～4g；所述的季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵；所述的非离子表面活性剂为聚氧醇酯类表面活性剂或皂苷类表面活性剂；所述的缓冲剂为邻苯二甲酸氢钾。作为本专利技术实施例的另一个优选方案，所述的非离子表面活性剂为硬脂醇聚氧乙烯醚。作为本专利技术实施例的另一个优选方案，所述的pH调节剂为甲酸、柠檬酸和马来酸中的一种或者多种。优选的，所述的pH调节剂为马来酸。作为本专利技术实施例的另一个优选方案，所述的电导率补充剂为氯化钾、氯化钠和硫酸钠中的一种或者多种。优选的，所述的电导率补充剂为氯化钠。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种上述溶血素的制备方法，其包括以下步骤：按照每升所述溶血素包括的组分含量，称取季铵盐类表面活性剂、非离子表面活性剂、缓冲剂、pH调节剂、电导率补充剂，备用；往纯化水中依次添加上述称取的季铵盐类表面活性剂、非离子表面活性剂、pH调节剂、缓冲剂和电导率补充剂进行搅拌混合，并继续添加纯化水进行定容，得到混合液；将上述混合液用孔径为0.1～0.3μm的微孔滤膜进行过滤，得到所述的溶血素。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种采用上述制备方法制得的溶血素。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种用于血液分析的试剂，其包括染色液以及上述的溶血素。作为本专利技术实施例的另一个优选方案，每升所述的染色液包括以下组分：不对称菁类染料0.1～0.5g，余量为助溶剂；所述的助溶剂为乙二醇、甲醇和1,2-丙二醇中的一种或者多种。优选的，所述的助溶剂为乙二醇。作为本专利技术实施例的另一个优选方案，所述的染色液的制备方法包括以下步骤：按照每升所述染色液包括的组分含量，称取不对称菁类染料和助溶剂，备用；往助溶剂中添加上述称取的不对称菁类染料进行搅拌混合，并用助溶剂进行定容后，再用孔径为0.1～0.3μm的疏水性微孔滤膜进行过滤，得到所述的染色液。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种用于血液分析的试剂盒，所述的试剂盒包含上述的试剂。与现有技术相比，本专利技术实施例的有益效果是：本专利技术实施例提供了一种溶血素的原料易得、制备方法简单，其可以配合一种染色液同时对血液中的有核红细胞和嗜碱细胞进行准确地分析检测，从而可以降低血液分析成本以及提高分析操作的便捷性。另外，本专利技术实施例提供的试剂只由一种溶血素和一种染色液组成，其可替代进口原装试剂实现在一个通道里同时对有血液中的核红细胞和嗜碱白细胞进行准确地检测；其中，溶血素可溶解修饰细胞，染色液对有核红细胞、嗜碱细胞的核酸进行染色，多角度光散射可检测出这两类细胞。相比于传统的两通道检测技术，本专利技术技术方案的优点在于：试剂减少了一种，嗜碱细胞也采用了染色法进行检测，其计数更精确。具体的，该试剂适用于核酸染色剂原理的血液分析仪，如希森美康XN系列五分类血液分析仪。该技术原理是在仪器的WNR检测池中，全血样品与溶血素充分混匀，加入染色液进行孵育，此过程中溶血素修饰固定嗜碱白细胞、有核红细胞的形态，使其保持自然的状态，对有核红细胞、嗜碱白细胞进行不同程度的染色，同时对细胞的膜(细胞膜、核膜、颗粒膜)也进行不同程度的着色。有核红细胞、嗜碱白细胞对染色液的着色程度不同、每种细胞特定的细胞核形态和颗粒的结构造成光散射的强度不同，产生了特定的吸光率和散射光强度。因此在散点图中根据吸光度及散射光强度的不同可以检测出有核红细胞、嗜碱白细胞的结果。附图说明图1为血液分析的标准散射图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1该实施例提供了一种用于血液分析的试剂，其包括溶血素和染色液。其中，溶血素的制备方法包括以下步骤：S11、称取季铵盐类表面活性剂0.1g、非离子表面活性剂1g、缓冲剂5g、pH调节剂1g、电导率补充剂1g，备用；其中，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵；非离子表面活性剂为市售的聚氧醇酯类表面活性剂；缓冲剂为邻苯二甲酸氢钾；pH调节剂为甲酸；电导率补充剂为氯化钾。S12、往600mL的纯化水中依次添加上述称取的季铵盐类表面活性剂、非离子表面活性剂、pH调节剂、缓冲剂和电导率补充剂进行搅拌溶解混合，并继续添加纯化水定容至1L，得到混合液。S13、将上述混合液用孔径为0.1μm的微孔滤膜进行过滤，即可得到所述的溶血素。另外，染色液的制备方法包括以下步骤：S21、称取不对称菁类染料0.1g、助溶剂1L，备用。其中，助溶剂为甲醇。S22、往600mL的助溶剂中添加上述称取的不对称菁类染料进行搅拌溶解混合，并继续用助溶剂进行定容至1L后，再用孔径为0.1μm的疏水性微孔滤膜进行过滤，即可得到所述的染色液。实施例2该实施例提供了一种用于血液分析的试剂，其包括溶血素和染色液。其中，溶血素的制备方法包括以下步骤：S11、称取季铵盐类表面活性剂2g、非离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，每升所述的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂0.1~2g、非离子表面活性剂1~5g、缓冲剂5~10g、pH调节剂1~5g、电导率补充剂1~5g。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，每升所述的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂0.1~2g、非离子表面活性剂1~5g、缓冲剂5~10g、pH调节剂1~5g、电导率补充剂1~5g。


2.根据权利要求1所述的一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，每升所述的溶血素包括以下组分：季铵盐类表面活性剂0.5~1.5g、非离子表面活性剂2.5~4g、缓冲剂6~8g、pH调节剂2~3g、电导率补充剂3~4g；所述的季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵；所述的非离子表面活性剂为聚氧醇酯类表面活性剂或皂苷类表面活性剂；所述的缓冲剂为邻苯二甲酸氢钾。


3.根据权利要求2所述的一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，所述的非离子表面活性剂为硬脂醇聚氧乙烯醚。


4.根据权利要求1或2所述的一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，所述的pH调节剂为甲酸、柠檬酸和马来酸中的一种或者多种。


5.根据权利要求1或2所述的一种用于血液分析的溶血素，其特征在于，所述的电导率补充剂为氯化钾、氯化钠和硫酸钠中的一种或者多种。

【专利技术属性】
技术研发人员：赵军理，高飞，
申请(专利权)人：江苏荣盛嘉美生物试剂有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32