用于改善活性蛋白或多肽性能的人工重组蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于改善活性蛋白或多肽性能的人工重组蛋白及其应用。本发明专利技术提供了对于延长蛋白或多肽的生物活性、延长蛋白或多肽半衰期或改善蛋白或多肽体内外性质非常有效的多肽单元(U)或多肽复合单元(PU)，所述的多肽单元(U)主要由脯氨酸(P)、丙氨酸(A)和谷氨酸(E)组成。本发明专利技术还提供了含有多个所述多肽单元(U)的多肽复合单元(PU)。本发明专利技术还提供了具有生物活性的融合蛋白，其包括所述的多肽单元(U)或多肽复合单元(PU)以及与之连接的活性蛋白或多肽。

Artificial recombinant protein for improving the performance of active protein or peptide and its application

【技术实现步骤摘要】
用于改善活性蛋白或多肽性能的人工重组蛋白及其应用
本专利技术涉及生物
，更具体地，本专利技术涉及一种用于改善生物活性蛋白或多肽性能的人工重组蛋白及其应用。
技术介绍
众所周知，分子量小于70kDa的蛋白质或多肽容易通过肾过滤而被体内清除(JevsevarS等，5:113–28，2010)。因此，一般采用融合或交联分子量较大的载体蛋白、聚乙二醇(PEG)、脂肪酸等来增加其表观分子量和流体动力学半径，从而降低其肾小球滤过率(KontermannRE，BioDrugs，23:93-109；2009；KangJS等，ExpertOpinEmergDrugs.，14:363–80，2009)，并最终达到延长蛋白或多肽体内半衰期的目的。用作交联使用的载体一般是PEG或脂肪酸等，而人血清白蛋白、免疫球蛋白Fc片段、转铁蛋白等则普遍用于重组融合，并且大都有对应的成功上市药物。近年来，新型的重组融合载体蛋白不断涌现(WRStrohl，Biodrugs，2015，29(4):215-39)，如URP(中国专利ZL200780015899.2)、XTE本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽单元，其具有以下特征：/n(1)由脯氨酸、丙氨酸及谷氨酸组成；/n(2)存在50％以上的α-螺旋二级结构；和/n(3)长度≥15个氨基酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种多肽单元，其具有以下特征：
(1)由脯氨酸、丙氨酸及谷氨酸组成；
(2)存在50％以上的α-螺旋二级结构；和
(3)长度≥15个氨基酸。


2.如权利要求1的多肽单元，其特征在于，根据Chou-Fasman公式计算，所述的多肽单元存在60％以上，较佳地70％以上，更佳地80％以上，进一步更佳地90％以上的α-螺旋二级结构。


3.如权利要求1的多肽单元，其特征在于，所述的α-螺旋二级结构的比例按照Chou-Fasman算法计算；和/或长度≥20个氨基酸。


4.如权利要求1的多肽单元，其特征在于，其包括选自下组的多肽单元：SEQIDNO:19～47所示氨基酸序列的多肽单元。


5.一种多肽复合单元，其核心结构选自：
U1-U2或U1-U2-…Un；
U1，U2，…，Un各自代表一个权利要求1的多肽单元，n为＞2的正整数；且，两个或多个所述多肽单元的氨基酸序列相同或不同。


6.如权利要求5所述的多肽复合单元，其特征在于，所述多肽复合单元选自：
(a)SEQIDNO:48～105任一所示的氨基酸序列的蛋白或SEQIDNO:48～76对应多肽单元的重复拼接蛋白；或
(b)(a)限定的任一多肽经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)多肽活性的由(a)衍生的多肽；或
(c)氨基酸序列与(a)限定的多肽的氨基酸序列有80％以上相同性且具有(a)多肽活性的多肽。


7.一种具有生物活性的融合蛋白，其包括：权利要求1所述的多肽单元或权利要求5所述的多肽复合单元以及活性蛋白或多肽。


8.如权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，其包括选自下组任一或组合的结构：
(D1-PU1)；
(D1-PU1)-(D2-PU2)；或
(D1-PU1)-(D2-PU2)-…(Dm-PUm)；
其中，PU1，PU2，…，PUm选自权利要求1所述的多肽单元或权利要求5所述的多肽复合单元；D1，D2，…，Dm为所述活性多肽，m为＞2的正整数；
且，(D1-PU1)包括(PU1-D1)，(D2-PU2)包括(PU2-D2)，(PUm-Dm)包括(Dm-PUm)。


9.如权利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，D1，D...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄岩山，
申请(专利权)人：浙江道尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33