检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针、试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术涉及病菌检测技术领域，具体公开一种检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针、试剂盒及其使用方法。所述引物和探针的序列为：上游引物：5′‑TGAGTAACACGTACCTAACCT ACCTTTTGGAC‑3′；下游引物：5′‑TGCTGCCTCC CGTAGGAGTCTGGGCCGTATCTC‑3′；所述探针的序列为：5′‑TTGGTAGGGTAAAGGCCTACCAAGACGATGAT‑THF‑TTTAGCGGGGCCAAGAG‑3′。本发明专利技术引物和探针的组合用于对绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA检测，兼具特异性高、敏感性好、准确性高以及耗时短的优点。

Real time fluorescent RAA primers, probes, kits and methods for detection of Mycoplasma ovipneumoniae

【技术实现步骤摘要】
检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针、试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及病菌检测
，尤其涉及一种检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针、试剂盒及其使用方法。
技术介绍
绵羊肺炎支原体(MycoplasmaOvipneumoniae，MO)是引起绵羊支原体肺炎(又称绵羊传染性胸膜肺炎)的一种慢性呼吸道传染病的病原，可使绵羊、山羊、大角羊和野生小反刍动物患呼吸道传染疾病，主要危害1-3月龄的羔羊，是一种传染性强、发病率高、死亡率高的接触性传染病。临床上主要表现为咳嗽、喘息、生育率低下、肺间质增生、慢性消耗导致体重下降。MO引发的疾病及继发感染逐步成为养羊业的重大隐患；绵羊肺炎支原体同时对山羊也有致病性，可引起山羊发生传染性胸膜肺炎。目前，绵羊肺炎支原体病原分离鉴定是确诊该病的首要证据，但其病原对营养要求苛刻，分离培养困难，其在羊群中的发病率为20-30％，个别的地区高达60-80％，死亡率15-30％。因此，早期、快速和有效诊断是预防和控制MO疫情所必须的重要手段。重组酶介导链替换核酸扩增方法(recombina本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针，其特征在于：所述引物的序列为：/n上游引物：5′-TGAGTAACACGTACCTAACCTACCTTTTGGAC-3′；/n下游引物：5′-TGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTATCTC-3′；/n所述探针的序列为：5′-TTGGTAGGGTAAAGGCCTACCAAGACGATGAT-THF-TTTAGCGGGGCCAAGAG-3′。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测绵羊肺炎支原体的实时荧光RAA引物和探针，其特征在于：所述引物的序列为：
上游引物：5′-TGAGTAACACGTACCTAACCTACCTTTTGGAC-3′；
下游引物：5′-TGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTATCTC-3′；
所述探针的序列为：5′-TTGGTAGGGTAAAGGCCTACCAAGACGATGAT-THF-TTTAGCGGGGCCAAGAG-3′。


2.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于：所述探针序列中THF的5′端一侧与其最接近的T碱基上标记荧光基团，THF的3′端一侧与其最接近的T碱基上标记淬灭基团；对所述探针序列的3′末端进行封闭修饰。


3.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于：所述荧光基团为FAM，所述淬灭基团为BHQ1，所述封闭修饰为C3-spacer修饰；经过所述标记和修饰的探针为5′–TTGGTAGGGTAAAGGCCTACCAAGACGATGA/FAM-dT/-THF-/BHQ1-dT/T...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建昌，韩荞忆，王金凤，袁万哲，孙晓霞，李睿文，付琦，
申请(专利权)人：石家庄海关技术中心，
类型：发明
国别省市：河北;13