基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种分子生物学领域，尤指一种基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒，试剂盒包括DNA提取试剂与PCR反应液；PCR反应液包括人SMN1与SMN2基因定量检测的引物、内参RPP30基因检测的引物、人SMN1与SMN2基因检测探针与内参RPP30基因检测探针；本发明专利技术采用引物扩增特异性、灵敏度以及重复性均较高；使用的探针提高了PCR反应中DNA分子的稳定性和亲和力；微滴数字PCR可直接检测目标序列的拷贝数，受扩增效率的影响大大降低，对PCR反应抑制物的耐受能力大大提高，检测方式具有更高的准确性及重复性，可应用于SMA携带者筛查、临床确诊和疾病分型等。

Human SMN1 and SMN2 gene copy number detection kit based on digital PCR

【技术实现步骤摘要】
基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒
本专利技术涉及一种分子生物学领域，尤指一种基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒。
技术介绍
脊髓性肌萎缩症(spinalmuscularatrophy，SMA)属常染色体隐性遗传神经退行性病变，是由SMN1基因的纯和缺失或突变所致，SMN1基因存在于染色体5q11-5q13区。SMA疾病是仅次于囊泡纤维症居于第二位的遗传性致死性疾病，婴儿发病率为1:6000到1:10000之间，每40～60人中有1位杂合子携带者。2018年5月11日国家卫生健康委员会等5部门联合制定了《第一批罕见病目录》（国卫医发〔2018〕10号）已将SMA收录其中，从国家层面上对这些疾病给予重点关注。临床上根据疾病的严重程度和发病年龄将SMA分成不同的亚类型，0型是最为严重的一种类型，病人需要从出生或出生后不久便开始进行呼吸辅助，通常在短短几周内死亡。最常见的类型是Ⅰ型（又名Werdnig–Hoffmanndisease），一般在6个月之前发病，病情严重。这些患儿无法独自站立并且一般本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括DNA提取试剂与PCR反应液；其中PCR反应液包括人SMN1与SMN2基因定量检测的引物、内参RPP30基因检测的引物、人SMN1与SMN2基因检测探针与内参RPP30基因检测探针；/n其中，所述人SMN1与SMN2基因定量检测的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2所示；所述内参RPP30基因检测的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4所示；/n所述人SMN1与SMN2基因检测探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；所述内参RPP30基因检测...

【技术特征摘要】
1.一种基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括DNA提取试剂与PCR反应液；其中PCR反应液包括人SMN1与SMN2基因定量检测的引物、内参RPP30基因检测的引物、人SMN1与SMN2基因检测探针与内参RPP30基因检测探针；
其中，所述人SMN1与SMN2基因定量检测的引物的核苷酸序列如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2所示；所述内参RPP30基因检测的引物的核苷酸序列如SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示；
所述人SMN1与SMN2基因检测探针的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示；所述内参RPP30基因检测探针的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示。


2.根据权利要求1所述的基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒，其特征在于，所述人SMN1与SMN2基因检测探针5’端标记荧光报告基团，3’端标记非荧光淬灭基团并连接MGB修饰基团。


3.根据权利要求1所述的基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒，其特征在于，所述人SMN1与SMN2基因定量检测的引物、内参RPP30基因检测的引物的浓度分别为10～50μm/L。
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【专利技术属性】
技术研发人员：罗景燕，许少飞，陈伟虹，赖炳权，
申请(专利权)人：广东永诺医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44