一种α-葡萄糖苷酶在发酵生产中的应用制造技术

本发明专利技术属于发酵领域，具体涉及一种α‑葡萄糖苷酶在发酵生产中的应用，特别是添加agdBα‑葡萄糖苷酶在酒精发酵过程中的应用。

Application of \u03b1 - glucosidase in fermentation

【技术实现步骤摘要】
一种α-葡萄糖苷酶在发酵生产中的应用
本专利技术涉及生产发酵工艺，具体涉及一种α-葡萄糖苷酶在发酵生产酒精中的应用。
技术介绍
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase，简称AGD酶，EC3.2.1.20)，又名α-D-葡萄糖苷水解酶，它可以从低聚糖类底物的非还原末端切开α-1,4糖苷键，释放出葡萄糖；或将游离出的葡萄糖残基转移到另一糖类底物上形成α-1,6糖苷键，从而形成具有非发酵性的功能性低聚糖——低聚异麦芽糖(简称IMOs，主要包括异麦芽糖，潘糖，异麦芽三糖等)。生产AGD酶的微生物种类有细菌、曲霉、古细菌等。由于能分泌AGD酶的野生菌株的生产能力普遍较低，为了克服野生菌株的低生产能力，国内外研究者通过构建基因工程菌生产重组AGD酶。在国内，对α-葡萄糖苷酶的研究还主要在α-葡萄糖苷酶的生产菌种选育和酶学性质方面，虽然有通过RT-PCR方法扩增得到Aspergillusnigerα-葡萄糖苷酶cDNA，构建重组质粒并尝试在大肠杆菌中表达，但酶表达量偏低，而且重组蛋白是胞内酶，分离纯化的成本相对高。丝状真菌表达的α-葡萄糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产发酵酒精的方法，所述方法包括酒精生产原料在适于酒精发酵的条件下生产发酵酒精，其特征在于，在生产过程中添加具有α-葡萄糖苷酶活性的多肽，所述多肽选自下组中的一种或多种：/n(a)具有与SEQ ID NO:4所示氨基酸序列至少95％同一性的多肽；/n(b)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在高严格条件下与以下杂交：(i)SEQ IDNO:3的多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长互补体。/n

【技术特征摘要】
1.一种生产发酵酒精的方法，所述方法包括酒精生产原料在适于酒精发酵的条件下生产发酵酒精，其特征在于，在生产过程中添加具有α-葡萄糖苷酶活性的多肽，所述多肽选自下组中的一种或多种：
(a)具有与SEQIDNO:4所示氨基酸序列至少95％同一性的多肽；
(b)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在高严格条件下与以下杂交：(i)SEQIDNO:3的多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长互补体。


2.根据权利要求1的方法，所述α-葡萄糖苷酶活性多肽具有与SEQIDNO:4所示氨基酸序列。


3.根据权利要求1的方法，所述α-葡萄糖苷酶活性多肽是由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在非常严格条件下与以下杂交：(i)SEQIDNO:3的多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长互补体。


4.根据权利要求1的方法，所述添加具有α-葡萄糖苷酶活性多肽的生产过程选自：糖化步骤；发酵步骤；同时的糖化和发酵步骤；任选地，预糖化步骤；优选地，发酵步骤或同时的糖化和发酵步骤。


5.根据权利要求1的方法，所述生产发酵酒精的方法中，所述生产发酵步骤包括：
(a)加入淀粉酶使酒精发酵原料液化；
任选在步骤(b)之前使所液化的材料预糖化；
(b)使所液化原料糖化；
(c)加入酵母进行发酵；
(d)发酵结束后收获发酵液；
其中，所述α-葡萄糖苷酶活可在下述步骤中存在和/或添加：
糖化步骤(b)；
发酵步骤(c)；
同时的糖化和发酵步骤；
任选在步骤(b)之前的预糖化步骤。


6.根据权利要求5的方法，所述α-葡萄糖苷酶的加入量为0.1-10U/gDS，优选为0.5-5U/gDS，更优选为0.8-1.5U/gDS。


7.根据权利要求5的方法，所述步骤(a)中加入的淀粉酶为高温淀粉酶；所述步骤(b)中加入糖化酶；所述步骤(c)中加入氮素。


8.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑斐，许宏贤，彭辉，
申请(专利权)人：南京百斯杰生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32