人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种人肿瘤组织中HBV‑VEZT融合突变检测引物组合、试剂盒及检测方法。所述引物组合由序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物和序列如SEQ ID NO.3所示的探针组成。所述试剂盒含有上述检测引物组合、质控系统等。本发明专利技术建立了实时荧光PCR体系，可同时检测HBV‑VEZT融合突变。检测方法操作简单、检测速度快，整个逆转录PCR及荧光PCR检测，半天内即可完成。准确性高，本发明专利技术体系中引入UNG酶‑dUTP防污染体系及空白对照体系，能更好地防止假阳性结果，确保检测结果准确可靠。

Primer combination, kit and detection method of hbv-vezt fusion mutation in human tumor tissue

【技术实现步骤摘要】
人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合、试剂盒及检测方法。
技术介绍
乙型肝炎是一种潜在严重威胁生命的肝脏疾病，其影响范围极广，大约影响到世界人口的5%。慢性乙肝病毒（HBV）感染是原发性肝癌发生发展的重要危险因素之一，持续乙肝病毒HBV感染能够导致慢性肝病，大约50%的肝癌以及几乎所有儿童早期肝癌的主要病因都与持续乙肝病毒HBV感染有关。尤其在我国，作为一个慢性乙肝感染频发的亚洲国家，百分之八十左右的原发性肝癌均被证实与HBV病毒的慢性感染有直接相关性。乙型肝炎病毒其本身是一种非常小的DNA型病毒，全长仅3200bp，其结构较为特殊，是双链不完全闭合的结构形式。其包含四个重叠的开放阅读框：S区（编码病毒的表面蛋白HBS），P区（编码病毒的聚合酶蛋白），X区（编码病毒的X蛋白），Pre-C区(编码病毒e抗原和c抗原)。在被感染的肝组织中，目前已发现多种乙型肝炎病毒的蛋白。在世界范围内，尤其在某些特定地区，慢性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合，其特征在于：包括引物和探针，/n所述引物的序列为：/nSEQ ID NO.1：HBV-VEZT Left Primer：5’-TGCACCGAACATGGAGAACA -3’；/nSEQ ID NO.2：HBV-VEZT Right Primer：5’-TGAGCATGCCAGTAAGTGCA -3’；/n所述探针的序列为：/nSEQ ID NO.3：HBV-VEZT-P ：5’-GACTACCAAGAATTCTCCAC -3’；/n所述探针的5’端修饰有FAM或VIC，所述探针的3’端修饰有NFQ-MGB。/n

【技术特征摘要】
1.人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合，其特征在于：包括引物和探针，
所述引物的序列为：
SEQIDNO.1：HBV-VEZTLeftPrimer：5’-TGCACCGAACATGGAGAACA-3’；
SEQIDNO.2：HBV-VEZTRightPrimer：5’-TGAGCATGCCAGTAAGTGCA-3’；
所述探针的序列为：
SEQIDNO.3：HBV-VEZT-P：5’-GACTACCAAGAATTCTCCAC-3’；
所述探针的5’端修饰有FAM或VIC，所述探针的3’端修饰有NFQ-MGB。


2.一种人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测试剂盒，其特征在于：包含有权利要求1所述的人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测引物组合。


3.根据权利要求2所述的人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测试剂盒，其特征在于：还包括内部质控系统、阳性对照液和空白对照液。


4.根据权利要求3所述的人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测试剂盒，其特征在于：所述内部质控系统包括质控引物组合和质控探针；所述质控引物组合的序列如SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示；所述质控探针的序列如SEQIDNO.6所示，所述质控探针的5’端修饰有FAM或VIC，所述质控探针的3’端修饰有NFQ-MGB。


5.根据权利要求3所述的人肿瘤组织中HBV-VEZT融合突变检测试剂盒，其特征在于：所述阳性对照液为含有HBV-VEZT的质粒DNA，所述质粒DNA为HBV-VEZT序列和人类ATP6IP1序列，所述空白对照为Tris缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴方平，
申请(专利权)人：江苏中方基因生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32