一种细胞分离培养液和T细胞分离培养的方法技术

本发明专利技术涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞分离培养液和T细胞分离培养的方法。本发明专利技术公开了一种细胞分离培养液。本发明专利技术中，培养液A、培养液B和培养液C，三种培养液协同配合，共同作用，有利于刺激单核细胞向CIK细胞进行转化。通过向血细胞中加入中性粒细胞分离液，从而减少细胞中中性粒细胞的含量。使用中性粒细胞分离液提取单个核细胞后，使用红细胞裂解液去除单个核细胞层中大部分红细胞，明显减少单个核细胞中的红细胞含量，提高淋巴细胞数量。最终培养后细胞中有效细胞比例增加，增加细胞群的杀瘤活性。

A method of cell culture medium and T cell culture

【技术实现步骤摘要】
一种细胞分离培养液和T细胞分离培养的方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种细胞分离培养液和T细胞分离培养的方法。
技术介绍
T细胞，是由来源于骨髓的淋巴干细胞，在胸腺中分化、发育成熟后，通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能。过继性免疫细胞治疗是指从人体内分离免疫活性细胞，在体外进行扩增和功能鉴定，然后向人体回输，从而达到直接杀伤肿瘤或激发机体的免疫应答杀伤肿瘤细胞的目的。过继性T细胞治疗主要包括TIL、LAK、CIK、TCR-T、CAR-T等几大类。目前体外培养T细胞通常包括以下4个步骤：分离单个核细胞、激活诱导、扩增、收集。目前分离单个核细胞通常是使用Ficoll实现，常规的T细胞培养方法是将分离的单个核细胞用因子进行刺激诱导，最终获得一定数量的T细胞。在使用Ficoll提取单个核细胞进行T细胞的培养时，由于部分血液供体机体状态原因，分离出的单个核细胞中还夹杂着大量红细胞。若直接进行培养，不仅在培养周期中难以观察T细胞的生长情况，且影响T细胞的培养环境，并影响后续对T细胞性能的检测和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞分离培养液，其特征在于，包括：中性粒细胞分离液、红细胞裂解液、培养液A、培养液B和培养液C；/n所述培养液A为：IFN-γ和基础培养基；/n所述培养液B为：IL-2、IL-1α、CD3单克隆抗体和基础培养基；/n所述培养液C为：IL-2和基础培养基。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞分离培养液，其特征在于，包括：中性粒细胞分离液、红细胞裂解液、培养液A、培养液B和培养液C；
所述培养液A为：IFN-γ和基础培养基；
所述培养液B为：IL-2、IL-1α、CD3单克隆抗体和基础培养基；
所述培养液C为：IL-2和基础培养基。


2.根据权利要求1所述的细胞分离培养液，其特征在于，所述培养液A中IFN-γ的浓度为2500～5000IU/ml；
所述培养液B中的IL-2、IL-1α、CD3单克隆抗体的浓度分别为500～1000IU/ml、2.5～5ng/ml、250～500ng/ml；
所述培养液C中的IL-2浓度为500～1000IU/ml。


3.根据权利要求1所述的细胞分离培养液，其特征在于，还包括：自体血浆。


4.根据权利要求1所述的细胞分离培养液，其特征在于，所述基础培养基为淋巴细胞无血清培养基。


5.一种T细胞培养试剂盒，其特征在于，包括权利要求1至4任意一项所述的细胞分离培养液。


6.一种T细胞的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：向外周血或全血中分离单个核细胞；

【专利技术属性】
技术研发人员：马玉国，
申请(专利权)人：广州航华生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44