一种NK细胞培养液及培养方法技术

本发明专利技术涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种NK细胞培养液及培养方法。本发明专利技术公开了一种NK细胞培养液，该培养液将IFN‑γ和IL‑15进复配，将IL‑2、IL‑1α、CD3单克隆抗体进行复配，共同作用有利于刺激外周血单个核细胞向NK细胞高效转化，增加了NK细胞的倍率，获得了更多的NK细胞，且CD3‑CD56+和CD3+CD56+含量高，杀伤活性高，说明本发明专利技术提供的NK细胞培养液在增加了NK细胞扩增数量的同时显著提高细胞毒活性。

A kind of NK cell culture medium and method

【技术实现步骤摘要】
一种NK细胞培养液及培养方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种NK细胞培养液及培养方法。
技术介绍
NK细胞是参与机体抵抗肿瘤和抗病毒感染以及免疫调节的重要免疫细胞，其在杀伤靶细胞的过程中无MHC限制性，不依赖抗体，通过直接和间接途径有效杀伤多种肿瘤细胞。但正常人体外周血中NK细胞数量较少，仅占外周血单个核细胞总数的10％～20％。近年来，细胞免疫治疗获得了突破性进展，NK细胞治疗也取得了一定的临床疗效。目前，如何获得大量高质量高纯度的NK细胞是其临床应用最为关键的问题之一。目前常用的NK细胞体外扩增方法使用的培养液除了添加细胞因子刺激外，还有一种方法是采用滋养层细胞扩增NK细胞，需添加灭活的K562肿瘤细胞株与外周血单个核细胞混合培养以诱导扩增NK细胞。但由于培养液中添加了肿瘤细胞，后期无法进行质量控制，引入安全隐患，难以应用到临床治疗上，且存在难以克服的伦理障碍。
技术实现思路
本专利技术提供了一种NK细胞培养液及培养方法，解决了现有的采用滋养层细胞扩增NK细胞过程中，需添加灭活的K562肿瘤细胞株与本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种NK细胞培养液，其特征在于，包括：培养液A和培养液B和；/n所述培养液A包括：IFN-γ、IL-15和基础培养基；/n所述培养液B包括：IL-2、IL-1α、CD3单克隆抗体和基础培养基。/n

【技术特征摘要】
1.一种NK细胞培养液，其特征在于，包括：培养液A和培养液B和；
所述培养液A包括：IFN-γ、IL-15和基础培养基；
所述培养液B包括：IL-2、IL-1α、CD3单克隆抗体和基础培养基。


2.根据权利要求1所述的NK细胞培养液，其特征在于，所述IFN-γ在所述培养液A中的终浓度为2500～5000IU/ml；
所述IL-15在所述培养液A中的终浓度为10～100μg/ml；
所述IL-2在所述培养液B中的终浓度为500～1000IU/ml；
所述IL-1α在所述培养液B中的终浓度为2.5～5ng/ml；
所述CD3单克隆抗体在所述培养液B中的终浓度为250～500ng/ml。


3.根据权利要求1所述的NK细胞培养液，其特征在于，还包括：培养液C或培养液D；
所述培养液C包括：IL-2、IL-15和基础培养基；
所述培养液D包括：IL-2和基础培养基。


4.根据权利要求3所述的NK细胞培养液，其特征在于，所述IL-2在所述培养液C中的终浓度为500～1000IU/ml；
所述IL-15在所述培养液C中的终浓度为10～100μg/ml；
所述IL-2在所述培养液D中的终浓度为500～1000IU/ml。


5.根据权利要求1至4任意一项所述的NK细胞培养液，其特征在于，还包括：自体血浆；
所...

【专利技术属性】
技术研发人员：马玉国，
申请(专利权)人：广州航华生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44