一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器制造技术

本发明专利技术涉及一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，属于新型功能纳米复合材料和生物传感器检测技术领域。本发明专利技术采用高导电性的金纳米叶修饰碳布为基底电极，进行了一次信号放大。进一步利用核酸适配体实现唾液酸的高特异性识别，提高了测定的选择性。通过硼酸‑二醇的反应结合硫堇/金纳米粒子/4‑巯基苯硼酸复合材料，从而引入硫堇的电化学信号并且实现了信号的二次信号放大。本方法制备的核酸适配体电化学传感器在唾液酸测定中表现出高的灵敏度、好的选择性和长期的稳定性。该传感器用于实际血清样品中唾液酸的测定，检测限可达60 nmol·L

A novel aptamer electrochemical sensor for sialic acid detection based on double signal amplification

【技术实现步骤摘要】
一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器
本专利技术涉生物传感器检测和功能纳米复合材料
，具体为一种基于金纳米叶修饰碳布和功能化金纳米粒子双重信号放大的核酸适配体电化学传感器及其制备方法和其在唾液酸检测方面的应用。
技术介绍
唾液酸是神经氨酸的乙酰化衍生物，位于神经节苷脂的糖链的末端。它广泛存在于生物组织及体液中，参与细胞的识别、粘着和接触抑制等多种生理过程。对于患恶性肿瘤的患者，由于瘤细胞表面糖蛋白和糖脂的结构和含量都发生了显著变化，大量的唾液酸可能从癌细胞表面脱落进入血液，使得血清唾液酸水平升高，而且与病情的严重程度呈正相关。因此，唾液酸已成为一种广谱的肿瘤标志物。从而，建立一种血清中唾液酸的高灵敏和高准确度的测定方法对恶性肿瘤的辅助诊断、疗效观察和预后判断均有重要的临床价值。传感器的设计中，特异性是非常重要的一个评价指标，而特异性取决于所选取的识别单元。目前，基于硼酸与唾液酸顺式二醇的识别反应用于唾液酸检测已有大量报道[H.X.Di,H.Q.Liu,M.M.Li,J.Li,D.B.Liu,Anal.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，通过如下方法制备而成：/n（1）金纳米叶在碳布电极上沉积：将清洗后的碳布电极浸入氯金酸溶液中进行恒电位电沉积获得金纳米叶结构的碳布表面；/n（2）固定核酸适配体及识别唾液酸：将步骤（1）制得的金纳米叶修饰的碳布电极浸入到核酸适配体溶液中室温孵育，用1-己硫醇溶液浸泡电极进行封闭，消除非特异性结合位点；将制备好的修饰电极分别与不同浓度的唾液酸溶液在室温下孵育，进行唾液酸识别；/n（3）引入探针分子：取HAuCl

【技术特征摘要】
1.一种检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，通过如下方法制备而成：
（1）金纳米叶在碳布电极上沉积：将清洗后的碳布电极浸入氯金酸溶液中进行恒电位电沉积获得金纳米叶结构的碳布表面；
（2）固定核酸适配体及识别唾液酸：将步骤（1）制得的金纳米叶修饰的碳布电极浸入到核酸适配体溶液中室温孵育，用1-己硫醇溶液浸泡电极进行封闭，消除非特异性结合位点；将制备好的修饰电极分别与不同浓度的唾液酸溶液在室温下孵育，进行唾液酸识别；
（3）引入探针分子：取HAuCl4溶液放入装有超纯水的三颈瓶中，搅拌条件下加热至沸腾，加入柠檬酸钠溶液生成金溶胶；然后将4-巯基苯硼酸和硫堇混合液在搅拌下逐滴加入至金纳米溶胶溶液中，得到4-巯基苯硼酸/金纳米粒子/硫堇复合材料溶液；将4-巯基苯硼酸/金纳米粒子/硫堇复合材料溶液与步骤（2）结合唾液酸后的传感器共同孵育，制得核酸适配体电化学传感器；
所选用的核酸适配体的DNA序列是TCCCTACGGCGCTAACCGATAGGTGTAGCGTGGGGCACATGTTCG...

【专利技术属性】
技术研发人员：周艳丽，吕玉冰，董辉，刘澜涛，徐茂田，
申请(专利权)人：商丘师范学院，
类型：发明
国别省市：河南;41