在包合于环糊精的类固醇的脱包合中使用的处理液制造技术

本发明专利技术人等发现，在对类固醇进行免疫学定量的方法中，通过利用表面活性剂对包含包合于环糊精的类固醇的标准溶液进行处理，可以使类固醇从环糊精脱包合，由此可抑制样本(被检试样)与标准溶液中的抗原抗体反应行为的背离，进而类固醇的定量度显著提高。

Treatment solution used in the decapsulation of steroids with cyclodextrins

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在包合于环糊精的类固醇的脱包合中使用的处理液
本专利技术涉及以表面活性剂为有效成分的、用于使包合于环糊精的类固醇脱包合的处理液。另外，本专利技术涉及该处理液在类固醇的免疫学定量中的应用。
技术介绍
在对样本(被检试样)所包含的目标物(抗原)进行免疫学定量时，通常分别测定样本的抗原抗体反应的信号强度和包含规定浓度的目标物的标准溶液的抗原抗体反应的信号强度，并对它们的测定值进行比较。为了以高精度进行该定量，需要尽量使样本和标准溶液中的抗原抗体反应的行为保持一致。例如，在对类固醇进行免疫学定量的情况下，通常使用人血清作为样本(被检试样)，但为了避免样本和标准溶液中的抗原抗体反应的行为发生背离，标准溶液的制备也大多使用血清。但是，在使用以血清为基质的标准溶液的情况下，无法排除来自原料的批次间差异、感染风险。因此，在标准溶液的制备中，也利用包含牛血清白蛋白等蛋白质的缓冲液来代替血清，在这种情况下，标准溶液所包含的类固醇显示出随着时间而分解的趋势，在测定时其信号强度下降成为问题。另外，疏水性的类固醇容易吸附于标准溶液的构成成分、容器，这也会引起测定时的信号强度下降。因此，为了抑制这样的信号强度下降，提出了在标准溶液中添加环糊精，从而使类固醇包合于环糊精的疏水性内部而使其稳定化的方案(专利文献1)。现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开第1997/005491号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题但是，本专利技术人等使用包含包合于环糊精的类固醇的标准溶液尝试对样本(被检试样)中所包含的类固醇进行免疫学定量，结果明确了：样本和标准溶液中的抗原抗体反应的行为明显不同，进而准确的类固醇的定量变得困难(参照实施例1-1)。本专利技术是鉴于这样的现有技术具有的问题而完成的专利技术，其目的在于，在使用包含包合于环糊精的类固醇的标准溶液，对类固醇进行免疫学定量的方法中，提高类固醇的定量精度。用于解决问题的技术方案本专利技术人等为了解决上述课题反复进行了深入研究，结果发现，通过将利用表面活性剂对包含包合于环糊精的类固醇的标准溶液进行处理，从而可以使类固醇从环糊精脱包合。在具有碳原子数8的酰基或烷基的表面活性剂、和具有类固醇骨架的表面活性剂的情况下，该脱包合效果特别优异，对包合于环糊精的醛固酮、孕酮、25-羟基维生素D和雌二醇中的任一者均可确认到该脱包合效果。另外，这些表面活性剂不仅在使用缓冲液基质的标准溶液的情况下显示优异的效果，而且在使用血清基质的标准溶液的情况下也显示出优异的效果。此外，本专利技术人等发现，在非竞争法和竞争法中的任意的类固醇免疫学测定体系中，通过表面活性剂的作用，样本(被检试样)和标准溶液中的抗原抗体反应行为的背离都得到抑制，进而定量精度显著提高，从而完成了本专利技术。即，本专利技术涉及表面活性剂在用于使包合于环糊精的类固醇的脱包合中的应用，特别涉及在类固醇的免疫学定量中的应用，更详细而言提高以下专利技术。[1]一种用于使包合于环糊精的类固醇脱包合的处理液，其以表面活性剂为有效成分。[2]根据[1]记载的处理液，其中，上述表面活性剂具有碳原子数8的酰基或烷基，或者，上述表面活性剂具有具有类固醇骨架。[3]根据[2]记载的处理液，其中，上述表面活性剂为选自下述(a)～(e)中的至少1种。(a)具有辛酰基和葡糖胺基的表面活性剂(b)具有辛基及聚氧乙烯基的表面活性剂(c)具有辛基、磺酸盐基和铵基的表面活性剂(d)具有类固醇骨架、磺酸盐基和铵基的表面活性剂(e)具有类固醇骨架和羧酸盐基的表面活性剂[4]根据[3]记载的处理液，其中，上述表面活性剂为选自N-辛酰基-N-甲基葡糖胺、聚(氧乙烯)辛基苯基醚、N-辛基-N,N-二甲基-3-铵-1-丙磺酸盐(N-Octyl-N,N-dimethyl-3-ammonio-1-propanesulfonate)、3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵]-1-丙磺酸盐(3-((3-Cholamidopropyl)dimethylammonium)-1-propanesulfonate)和脱氧胆酸钠中的至少1种。[5]根据[1]～[4]中任一项记载的处理液，其中，上述环糊精为选自β环糊精、羟丙基β环糊精和γ环糊精中的至少1种。[6]根据[1]～[5]中任一项记载的处理液，其中，上述类固醇为选自醛固酮、孕酮、25-羟基维生素D和雌二醇中的至少1种。[7]根据[1]～[6]中任一项记载的处理液，其用于在包含类固醇和环糊精的类固醇免疫学定量用标准溶液中，使包合于上述环糊精的上述类固醇脱包合。[8]一种对类固醇进行免疫学定量的方法，其包含下述步骤：使抗类固醇抗体分别与被检试样和包含类固醇和环糊精的标准溶液反应，分别测定上述被检试样和上述标准溶液中的抗原抗体反应的信号强度，比较上述被检试样的信号强度和上述标准溶液的信号强度，其中，在上述标准溶液的抗原抗体反应的反应体系中，添加[7]所述的处理液。[9]一种用于对类固醇进行免疫学定量的试剂盒，其至少包含下述(a)～(c)，(a)抗类固醇抗体(b)包含类固醇和环糊精的标准溶液(c)[7]记载的处理液。专利技术的效果根据本专利技术，通过使表面活性剂共存于类固醇的免疫学测定体系的抗原抗体反应中，从而能够抑制样本(被检试样)与标准溶液的行为的背离。由此，不仅在使用血清基质的标准溶液的情况下，而且在使用缓冲液基质的标准溶液(例如，无血清且无蛋白质的标准溶液)的情况下，也能够以高精度对类固醇进行定量。附图说明图1是表示对于环糊精对醛固酮的包合效果进行检验的结果的图表。作为环糊精，使用α环糊精(αCD)、β环糊精(βCD)、羟丙基β环糊精(HPβCD)和γ环糊精(γCD)。图2是表示对于HPβCD对醛固酮的稳定化效果的进行检验的结果的图表。图3是表示各种表面活性剂的使包合于HPβCD的醛固酮脱包合的效果的图表。使用缓冲液基质的标准溶液并利用非竞争法(两步法)进行测定。图4是表示各种表面活性剂的使包合于HPβCD的醛固酮脱包合的效果的图表。使用血清基质的标准溶液并利用非竞争法(两步法)进行测定。图5是表示各种表面活性剂的使包合于HPβCD的孕酮脱包合的效果的图表。使用缓冲液基质的标准溶液并利用竞争法(一步法)进行测定。图6是表示各种表面活性剂的使包合于γCD的25-羟基维生素D脱包合的效果的图表。使用缓冲液基质的标准溶液并利用非竞争法(两步法)进行测定。图7A是示出各种表面活性剂的使包合于HPβCD的雌二醇脱包合的效果的图表。使用缓冲液基质的标准溶液并利用竞争法(一步法)进行测定。图7B是表示各种表面活性剂的使包合于HPβCD的雌二醇脱包合的效果的图表。使用缓冲液基质的标准溶液并利用竞争法(一步法)进行测定。具体实施方式本专利技术提供以表面活性剂为有效成分的、用于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于使包合于环糊精的类固醇脱包合的处理液，其特征在于，所述处理液以表面活性剂为有效成分。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171117 JP 2017-2222401.一种用于使包合于环糊精的类固醇脱包合的处理液，其特征在于，所述处理液以表面活性剂为有效成分。


2.根据权利要求1所述的处理液，其中，所述表面活性剂具有碳原子数8的酰基或烷基，或者，所述表面活性剂具有类固醇骨架。


3.根据权利要求2所述的处理液，其中，所述表面活性剂为选自下述(a)～(e)中的至少1种，
(a)具有辛酰基和葡糖胺基的表面活性剂，
(b)具有辛基和聚氧乙烯基的表面活性剂，
(c)具有辛基、磺酸盐基和铵基的表面活性剂，
(d)具有类固醇骨架、磺酸盐基和铵基的表面活性剂，
(e)具有类固醇骨架和羧酸盐基的表面活性剂。


4.根据权利要求3所述的处理液，其中，所述表面活性剂为选自N-辛酰基-N-甲基葡糖胺、聚(氧乙烯)辛基苯基醚、N-辛基-N,N-二甲基-3-铵-1-丙磺酸盐、3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基铵-1-丙磺酸盐和脱氧胆酸钠中的至少一种。


5.根据权利要求1～4中...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉见达成，照山杏子，
申请(专利权)人：富士瑞必欧株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP