一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法。该检测方法的试剂盒包括抗原包被板、样品稀释液A、样品稀释液B、酶标记物鼠抗人IgG、底物液、洗涤液、终止液。本发明专利技术采用间接法检测破伤风抗体，准确性高，稳定性好，能够清澈判定破伤风抗体的效价，为规范疫苗效力检测提供了依据。

A detection method of tetanus antibody titer by indirect ELISA

【技术实现步骤摘要】
一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法。
技术介绍
破伤风是由破伤风杆菌侵入人体伤口造成的一种特异性感染，是致死性传染病，其高毒力的痉挛毒素可阻断中枢神经系统的抑制性神经递质，引起肌肉强直和典型的全身痉挛。抗体效价是疾病诊断、特异性免疫球蛋白制备和疫苗评价等领域的重要指标，具有十分重要的作用。而检测血浆中破伤风抗体的效价水平，是制备用于预防破伤风的人免疫球蛋白等产品的前提，也是评价预防接种效果的重要依据。目前，用于破伤风抗体效价检测通常采用中和实验法，而该方法耗时长，技术要求高，且影响因素多。而ELISA（酶联免疫法）由于其迅速、灵敏度高且重复性好，应用较为广泛。目前采用的ELISA法，其影响因素等仍需进一步改进。
技术实现思路
针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的试剂盒及其检测方法。本专利技术还提供了一种利用上述试剂盒检测破伤风抗体效价的方法。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法，其特征在于，所述检测的试剂盒包括：抗原包被板、样品稀释液A、样品稀释液B、酶标记物鼠抗人IgG、底物液、洗涤液、终止液。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用间接ELISA法检测破伤风抗体效价的检测方法，其特征在于，所述检测的试剂盒包括：抗原包被板、样品稀释液A、样品稀释液B、酶标记物鼠抗人IgG、底物液、洗涤液、终止液。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述抗原包被板为破伤风类毒素包被微孔板，具体处理过程为：
（1）：添加100mMDTT于破伤风类毒素中，25℃避光处理1小时后添加固体尿素颗粒，至尿素浓度为4M，取处理后的破伤风类毒素于PBS缓冲液中透析4h；
（2）将处理后的破伤风类毒素经离子交换柱及疏水层析柱纯化即可。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述样品稀释液A含有以下成分：乙二胺四乙酸二钠0.5~1.2g/L、季铵淀粉醚0.2~0.5g/L、甘油0.5~1.0g/L、海藻糖醇0.2g/L、氯化钠8.5~10.5g/L、硼酸盐缓冲液0.8~1.2g/L、叠氮钠0.3~0.5g/L；所述样品稀释液B为浓度为7.5g/L的吐温-80及生理盐水。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述底物液含有以下成分：4-羧乙基哌嗪乙磺酸30-35g/L、柠檬酸8-10g/L、磷酸氢二钠8.5-11.0g/L、TMB3-5g/L。


5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述洗涤液含有以下成分：氯化钠15g/L、碘化钾3g/L、磷酸氢钠0.255g/L，磷酸氢钾0....

【专利技术属性】
技术研发人员：白毅，肖晓，刘文娟，
申请(专利权)人：山东帝俊生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37