用于DECTIN-2刺激和癌症免疫治疗的方法和组合物技术

提供用于治疗患有癌症或感染性疾病的个体的方法和组合物。提供多价Dectin‑2刺激剂，其包括：(a)与Dectin‑2结合并刺激Dectin‑2信号传导的试剂；(b)抗体和/或免疫调节剂，其中(a)和(b)彼此缀合。在一些情况下，(a)是与Dectin‑2结合的甘露二糖糖多肽。在一些情况下，(b)是TLR(例如，TLR7、TLR8、TLR7/8、TLR2等)的刺激配体。治疗患有癌症和/或感染性疾病的个体的方法可包括向所述个体给药有效量的Dectin‑2刺激性组合物。在一些情况下，所述Dectin‑2刺激性组合物包含Dectin‑2刺激性含糖聚合物。在一些情况下，所述Dectin‑2刺激性组合物包含多价Dectin‑2刺激剂。

Methods and compositions for dectin-2 stimulation and cancer immunotherapy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于DECTIN-2刺激和癌症免疫治疗的方法和组合物交叉引用本申请要求于2017年6月28日提交的美国临时专利申请号62/526,266的权益，该申请的全部内容通过引用合并于此。政府支持本专利技术是根据美国国立卫生研究院授予的合同CA196657在政府支持下完成的。政府拥有本专利技术的某些权利。引言尽管免疫系统具有检测肿瘤细胞与正常组织之间细微差异的能力，但癌症仍倾向于生长和扩散，通常导致其宿主死亡。在这种情况下可以发生针对肿瘤相关抗原(TAA)的适应性免疫应答，从而导致肿瘤控制或消退。然而，侵袭性肿瘤最终会通过免疫编辑和其他抑制抗肿瘤免疫细胞和介质的机制逃离免疫控制。免疫细胞是大多数癌症中基质间隔(stromalcompartment)的主要组成部分，并在塑造肿瘤的发生和发展中起至关重要的作用。癌症免疫疗法(例如检查点抑制剂、癌症疫苗、CART细胞等)已被证明对多种癌症有效；然而，许多患者和癌症类型均无法对这些干预措施做出反应，这表明应该探索其他的免疫治疗策略。包括粒细胞、单核细胞(Mo)、巨噬细胞(Mφ)和树突状细胞(DC)的髓样细胞在大多数肿瘤中特别丰富，并已显示出在一系列恶性肿瘤上并以各种方式促进疾病进展。尽管如此，但是在临床开发中只有相对很少的疗法针对这种主要的基质细胞群，并且大多数旨在抑制这些细胞的积累而不是调节其活性。
技术实现思路
提供了用于治疗患有癌症或感染性疾病的个体的方法和组合物。提供多价Dectin-2刺激剂，其包括：(a)与Dectin-2结合并刺激Dectin-2信号传导的试剂；(b)抗体和/或免疫调节剂，其中(a)和(b)彼此缀合。在一些情况下，(a)是抗Dectin-2抗体或其抗原结合区。在一些情况下，(a)是与Dectin-2结合的甘露二糖糖多肽(mannobioseglycopolypeptide)(例如，包括肽的甘露二糖糖多肽，所述肽例如长度为20至250个氨基酸的粘蛋白样肽)。在一些情况下，甘露二糖糖多肽的聚糖密度为至少25％。在一些情况下，(b)是TLR的刺激配体(例如，TLR7/8激动剂诸如T785或786，TLR7激动剂诸如784，TLR8激动剂，TLR2激动剂诸如Pam3Cys等)。在一些情况下，(a)包含甘露二糖糖多肽，并且(b)为TLR激动剂。如上所述，还提供了治疗患有癌症和/或感染性疾病的个体的方法。这样的方法可以包括向个体给药有效量的Dectin-2刺激性组合物。在一些情况下，Dectin-2刺激性组合物包含Dectin-2刺激性含糖聚合物(例如，如上所述)。在一些情况下，Dectin-2刺激性组合物包含多价Dectin-2刺激剂，例如，如上所述。还提供了刺激抗原呈递细胞(APC)的方法，并且该方法可以包括在体外或离体使APC与包含Dectin-2刺激性含糖聚合物(例如，甘露二糖糖多肽)的Dectin-2刺激性组合物以足以增强APC中Dectin-2信号传导的剂量和时段进行接触，从而产生经刺激的APC。在一些情况下，Dectin-2刺激性组合物包含多价Dectin-2刺激剂，例如，如上所述。附图说明当结合附图阅读时，根据以下详细描述可以最好地理解本专利技术。要强调的是，根据惯例，附图的各个特征未按比例绘制。相反，为了清楚起见，各种特征的尺寸被任意扩大或缩小。附图中包括下图。图1A至图1B。肿瘤相关的髓样细胞表达高水平的Dectin-2。(图1A至图1B)用指示的抗体对鼠和人(Hu)胰腺导管腺癌(PDAC)的组织进行染色，并通过荧光(图1A)或光学(图1B)显微镜法进行成像。(图1A)来自被注射LMP或Panc02鼠肿瘤细胞系的免疫活性小鼠的原发性胰腺肿瘤组织和肝转移样品。LMP细胞(最初获自Pdx1-Cre；KrasLSL-G12D/+；Trp53LSL-R172H/+小鼠，并在所有这些研究中使用)以突变体p53的累积为标志。(图1B)来自人PDAC以及PDAC的基因工程小鼠模型(GEMM)(Pdx1-Cre；KrasLSLG12D/+；Cdkn2a-/-)的原发肿瘤和转移组织。比例尺，100μm。图2A至图2G。天然的Dectin-2激动剂激活肿瘤相关的髓样细胞，并诱导抗肿瘤免疫反应。(图2A至图2C)用PDAC条件培养基培养鼠骨髓单核细胞以产生TAM样细胞。在用糠秕马拉色菌(M.furfur的细胞壁提取物(furfurman)刺激过夜后，分析细胞因子产生和共刺激分子表达。在一些实验中(图2B)，用Dectin-2-阻断性抗体预处理细胞。ND是未检测到。(图2D)在连续两天中向皮下PDAC肿瘤注射furfurman或媒介物，然后在第3天通过流式细胞术进行分析。门控肿瘤浸润免疫细胞中的总CD3+T细胞。(图2E至图2G)在肿瘤植入后第7天和第10天，对荷有皮下PDAC肿瘤的小鼠瘤内注射furfurman(+/-IFNγ)或媒介物，然后用检查点抑制剂(图2E)、吉西他滨(Gem)(图2F)或CD40激动抗体(ip，q3d，从第7天开始)全身处理。显示平均肿瘤体积±SEM(n＝3至5只小鼠/组)。通过单因素方差分析和事后Tukey检验，*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001，利用所显示的最后一个时间点的肿瘤体积的结果。图3A至图3H。天然的Dectin-2配体激活小鼠和人类细胞，并在多种肿瘤类型中具有抗癌作用。(图3A)PDACTAM用所示的抗体预处理然后用板结合的酿酒酵母(S.cerevisiae)甘露聚糖刺激过夜产生的TNFα。(图3B，图3C)人单核细胞用GM-CSF预处理然后用furfurman(图3B)或甘露聚糖(图3C)刺激产生的TNFα。显示了n＝3个供体的平均值±SEM。(图3D至图3F)从肿瘤植入后6至9天开始，用甘露聚糖(i.v.)和/或αCTLA-4与αPD-1抗体的组合(i.p.)处理荷s.c.PDAC(图3D)、肺腺癌(图3E)或CT26结肠癌的小鼠。显示了平均肿瘤体积±SEM(每组n＝3至5)。通过未配对学生t检验(图3B)或双因素方差分析和事后Tukey检验(图3D至图3F)，*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001。(图3G)在将甘露聚糖(10mg/kg，i.v.)注射入小鼠后6小时，通过PDACTAMs表达CD86和MHC-II。(图3H)Dectin-2激动剂与化学疗法和其他免疫疗法协同作用-用所示试剂处理的荷瘤的小鼠的肿瘤生长曲线。使肿瘤生长7至9天，然后Dectin-2刺激物i.t.(furfurman，10mg/kgq3dx2)或i.v.(甘露聚糖，10mg/kgq2dx3wk)单独给药或与i.p.吉西他滨(100mg/kgq3dx3wk)或激动性αCD40抗体(10mg/kgq3dx3)联合给药。通过双因素方差分析和事后Tukey检验，*，p<0.05；***，p<0.001；****，p<0.0001。图4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多价Dectin-2刺激剂，其包含：/n(a)与Dectin-2结合并刺激Dectin-2信号传导的试剂；和/n(b)抗体和/或免疫调节剂，/n其中(a)和(b)彼此缀合。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170628 US 62/526,2661.一种多价Dectin-2刺激剂，其包含：
(a)与Dectin-2结合并刺激Dectin-2信号传导的试剂；和
(b)抗体和/或免疫调节剂，
其中(a)和(b)彼此缀合。


2.根据权利要求1所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(a)是抗Dectin-2抗体或其抗原结合区。


3.根据权利要求1所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(a)是与Dectin-2结合的甘露二糖糖多肽。


4.根据权利要求3所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述甘露二糖糖多肽包括长度为20至250个氨基酸的肽。


5.根据权利要求4所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述肽是黏蛋白样肽。


6.根据权利要求3至5中任一项所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述甘露二糖糖多肽的聚糖密度为至少25％。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(b)是免疫调节剂。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(b)是选自以下的细胞因子：IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、IFN-α、IFN-β、IFNγ、G-CSF、TNFα和GM-CSF；或选自以下的免疫调节剂：抗CTLA4抗体、抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、CD40激动剂、抗CD47/SIRPA试剂和4-1BB激动剂。


9.根据权利要求1至7中任一项所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(b)是模式识别受体(PRR)的刺激配体。


10.根据权利要求9所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(b)是TLR激动剂。


11.根据权利要求10所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR激动剂是TLR7激动剂、TLR8激动剂或TLR7/8激动剂。


12.根据权利要求11所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR7/8激动剂是T785。


13.根据权利要求10所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR激动剂是TLR2激动剂。


14.根据权利要求13所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR2激动剂是Pam3Cys。


15.根据权利要求1所述的多价Dectin-2刺激剂，其中(a)包括甘露二糖糖多肽，以及(b)是TLR激动剂。


16.根据权利要求15所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR激动剂是TLR7/8激动剂或TLR2激动剂。


17.根据权利要求16所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR激动剂是T785。


18.根据权利要求16所述的多价Dectin-2刺激剂，其中所述TLR激动剂是Pam3Cys。


19.一种治疗患有癌症和/或感染性疾病的个体的方法，所述方法包括向所述个体给药有效量的Dectin-2刺激性组合物，所述Dectin-2刺激性组合物包括：
(a)Dectin-2刺激性含糖聚合物；或
(b)多价Dectin-2刺激剂，包括：
(i)抗Dectin2抗体或Dectin-2刺激性含糖聚合物；和
(ii)抗体和/或免疫调节剂，
其中(i)与(ii)缀合，其中在髓样细胞中刺激了Dectin-2信号传导，从而刺激所述个体中的免疫反应。


20.根据权利要求19所述的方法，其中，(a)或(b)的所述Dectin-2刺激性含糖聚合物包括甘露二糖糖多肽。


21.根据权利要求20所述的方法，其中所述甘露二糖糖多肽包括长度为20至250个氨基酸的肽。


22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述肽是黏蛋白样肽。


23.根据权利要求20至22中任一项所述的方法，其中所述甘露二糖糖多肽的聚糖密度为至少25％。


24.根据权利要求19至23中任一项所述的方法，其中将(b)的所述Dectin-2刺激性含糖聚合物与抗体缀合。


25.根据权利要求24所述的方法，其中(b)的所述Dectin-2刺激性含糖聚合物与免疫调节剂缀合。


26.根据权利要求24或25所述的方法，其中(b)的所述Dectin-2刺激性含糖聚合物与选自以下的细胞因子缀合：IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾斯丁·肯克尔，马修·周，雪莱·艾琳·阿克曼，埃德加·乔治·英格曼，迈克尔·纳撒尼尔·阿隆索，卡罗琳·R·贝托兹，
申请(专利权)人：小利兰·斯坦福大学托管委员会，
类型：发明
国别省市：美国;US