一种乙型肝炎表面抗原检测方法技术

本发明专利技术提供了一种乙型肝炎表面抗原检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)制备血清样本：采集静脉血，分离得到血清，然后再将血清高速离心1‑2次，得到待检测血清样本；所述高速离心条件为：4‑10℃，10000‑15000rpm/min离心3‑8min；(2)加样：向包被有针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体的反应孔中加入待检测血清样本40‑50uL；所述单克隆抗体的克隆号为86C；(3)加酶标抗体：向反应孔中加入酶标抗体50±1uL，然后用封板膜覆盖反应板，将反应板置于37±1℃孵育35‑45min；(4)洗涤；(5)显色；(6)终止；(7)测定。上述检测方法能实现乙型肝炎表面抗原的准确检测，特别是针对高脂血症的人群的检测时，具有样本量需求少、反应孔体清晰干净，背景低的优点。

A detection method of HBsAg

【技术实现步骤摘要】
一种乙型肝炎表面抗原检测方法
本专利技术属于分子检测
，具体涉及一种乙型肝炎表面抗原检测方法。
技术介绍
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)引起的以肝脏病变为主的一种传染病。HBV基因组是双链、环形、不完全闭合DNA，由外壳与核心两部分组成。病毒最外层是病毒的外膜或称衣膜(envelope)，只含病毒表面抗原(HBsAg)，其内层为核心部分(core)，核蛋白即是核心抗原(HBcAg)。健康体检是指通过医学手段和方法对受检者进行身体检查，了解受检者健康状况，所以乙型肝炎在体检中起到至关重要的作用。目前常用的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)检测方法为酶联免疫吸附法(ELISA)，但现有常用的酶联免疫吸附法检测试剂盒的所用的血清样本的量为50uL-75uL，检测过程中孵育反应时间为2个小时。肥胖的人群和儿童(儿童配合度差)本来就不容易抽血，或者肥胖的人群由于血液粘度高，导致抽血时的样本量偏少，如果一次体检抽血时检测种类多，在乙肝检测项目时，就容易导致血清样本量不够，甚至需要再次抽血补充样本量。本专利技术的专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)制备血清样本：采集静脉血，分离得到血清，然后再将血清高速离心1-2次，得到待检测血清样本；所述高速离心条件为：4-10℃，10000-15000rpm/min离心3-8min；/n(2)加样：向包被有针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体的反应孔中加入步骤(1)获得的待检测血清样本40-50uL；所述单克隆抗体的克隆号为86C；/n(3)加酶标抗体：向反应孔中加入酶标抗体50±1uL，然后用封板膜覆盖反应板，将反应板置于37±1℃孵育35-45min；/n(4)洗涤；/n(5)显色；/n(6)终止；/n(7)测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备血清样本：采集静脉血，分离得到血清，然后再将血清高速离心1-2次，得到待检测血清样本；所述高速离心条件为：4-10℃，10000-15000rpm/min离心3-8min；
(2)加样：向包被有针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体的反应孔中加入步骤(1)获得的待检测血清样本40-50uL；所述单克隆抗体的克隆号为86C；
(3)加酶标抗体：向反应孔中加入酶标抗体50±1uL，然后用封板膜覆盖反应板，将反应板置于37±1℃孵育35-45min；
(4)洗涤；
(5)显色；
(6)终止；
(7)测定。


2.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中分离血清的条件为：3000±50rpm/min离心3-5min。


3.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中高速离心条件为：4-10℃，11000-13000rpm/min离心3-5min。


4.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰丽媛，李雨艳，周婷婷，许友强，段学成，常红叶，关宝杰，王双阁，
申请(专利权)人：吉林金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22