一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，用于分离阿奇霉素相关杂质的流动相为：流动相A:0.003mol/L磷酸氢二钾缓冲盐溶液；流动相B:甲醇‑乙腈(250:750)，采用线性梯度洗脱法进行洗脱检测。本发明专利技术能将阿奇霉素相关杂质完全分离，降低了阿奇霉素胶囊相关杂质检测时柱压的波动，提高了色谱柱的使用寿命，避免了由于出峰时间的漂移，从而导致杂质判断出现差错。

A method for the determination of related impurities in Azithromycin Capsules

【技术实现步骤摘要】
一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种优化的阿奇霉素相关杂质的检测方法。
技术介绍
阿奇霉素(Azithromycin)化学名称为(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核-已吡喃糖基)氧]-2-乙基-3，4，10-三羟基-3，5，6，8，10，12，14-七甲基-11-[[3，4，6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木-已吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮，是一种大环内酯类抗菌药，与红霉素比较，其对酸稳定，口服不受胃酸破坏，半衰期长，感染部位组织及细胞内浓度高，对格兰氏阴性菌作用扩大，尤其对流感杆菌作用加强，抗菌谱更广，抗菌作用更强。阿奇霉素(Azithromycin)是大环内酯抗生素的第1个品种，临床上常用于治疗上、下呼吸道、泌尿生殖系统、皮肤和软组织、外科感染等。欧洲药典(EP9.0)收载的阿奇霉素相关杂质检测方法采用梯度运行，测试过程中有机相比例逐步升高，与缓冲盐浓度混合时柱压波动逐步较大，导致连续运行色谱图出峰时间易产生漂移，由于阿奇霉素杂质较多，出峰时间漂移会使杂质判断出现差错。因此亟需一种能够解决分析测试运行过程中柱压波动逐步变大的问题的检测方法，能够避免出峰时间漂移导致杂质判断出现差错的情况。
技术实现思路
基于以上现有技术的不足，本专利技术所解决的技术问题在于提供一种能够在阿奇霉素峰鉴别对照品溶液中各杂质有效分离的前提下，解决运行过程中有机相与缓冲盐混合时柱压波动引起出峰时间漂移的情况，避免了杂质判断出现差错的阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，该阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法能有效的让柱压波动较小，从而进一步可以提高色谱柱使用寿命。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，使用液相色谱法，并且包含如下步骤：将阿奇霉素溶于稀释液中，形成供试品溶液，用液相色谱法分离检测阿奇霉素及其杂质；其中，稀释液是溶液A、甲醇和乙腈体积比为7:7:6的混合溶液，其中，溶液A为pH值为10.0士0.05的0.001～0.01mol/L的磷酸二氢铵水溶液；液相色谱条件：色谱柱：C18柱；流动相A：缓冲溶液；流动相B：甲醇-乙腈(250:750)；采用梯度洗脱；柱温：60℃；检测波长：UV210nm；进样量：50μl；流速：1.0ml/min；运行时间：93min。作为上述技术方案的优选，本专利技术提供的阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法进一步包括下列技术特征的部分或全部：作为上述技术方案的改进，所述用液相色谱法分离检测阿奇霉素及其杂质过程中，空白溶液：稀释液；峰鉴别对照溶液：取阿奇霉素峰鉴别对照品8mg，加稀释液1ml，溶解后作为峰鉴别对照溶液；系统适用性对照溶液：取系统适用性对照品1瓶加稀释液1ml，溶解后作为系统适用性对照溶液；供试品溶液：取阿奇霉素0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，平行配制两份；自身对照溶液：精密量取1.0ml供试品溶液，置100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液。作为上述技术方案的改进，所述阿奇霉素峰鉴别对照品是EP对照品，含杂质A、B、C、E、F、G、I、J、L、M、N、O和P；所述系统适用性对照品含杂质F、J和H。作为上述技术方案的改进，所述杂质A、B、C、E、F、G、I、J、L、M、N、O、P和H具体名称及化学结构如下：杂质A名称：氮红霉素A(AzaerthromycmA)]，9-去氧-9a-氮杂-高红霉素A；杂质A结构式：杂质B名称：阿奇霉素B(AzithromycinB)，(2R,3S,4S,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-吡喃己糖基)氧]-2-乙基-4,10-二羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质B结构式：杂质C名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-(((2R,4R,5S,6S)-4,5-二羟基-4,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)氧)-11-(((2S,3S,4S,6R)-4-(二甲氨基)-3-羟基-6-甲基四氢-2H-吡喃-2-基)氧)-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质C结构式：杂质E名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3-氨基-3,4,6-三脱氧-β-D-木-己吡喃糖基]氧基]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质E结构式：杂质F名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-甲氨基-β-D-木-己吡喃糖基]氧基]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质F结构式：杂质G名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3-[N-(4-甲基苯磺酰基)-N-甲基氨基]-3,4,6-三脱氧-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质G结构式：杂质I名称：阿奇霉素I(3′-N-去甲基阿奇霉素，N-Demethylazithromycin),(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-吡喃己糖基)氧]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-甲氨基-β-D-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；杂质I结构式：杂质J名称：阿奇霉素J(3-O-去克拉定糖基阿奇霉素，Desosaminylazithromycin),2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，其特征在于，使用液相色谱法，并且包含如下步骤：/n将阿奇霉素溶于稀释液中，形成供试品溶液，用液相色谱法分离检测阿奇霉素及其杂质；/n其中，稀释液是溶液A、甲醇和乙腈体积比为7:7:6的混合溶液，其中，溶液A为pH值为10.0士0.05的0.001～0.01mol/L的磷酸二氢铵水溶液；/n液相色谱条件：/n色谱柱：C18柱；流动相A：缓冲溶液；流动相B：甲醇-乙腈(250:750)；采用梯度洗脱；柱温：60℃；检测波长：UV210nm；进样量：50μl；流速：1.0ml/min；运行时间：93min。/n

【技术特征摘要】
1.一种阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，其特征在于，使用液相色谱法，并且包含如下步骤：
将阿奇霉素溶于稀释液中，形成供试品溶液，用液相色谱法分离检测阿奇霉素及其杂质；
其中，稀释液是溶液A、甲醇和乙腈体积比为7:7:6的混合溶液，其中，溶液A为pH值为10.0士0.05的0.001～0.01mol/L的磷酸二氢铵水溶液；
液相色谱条件：
色谱柱：C18柱；流动相A：缓冲溶液；流动相B：甲醇-乙腈(250:750)；采用梯度洗脱；柱温：60℃；检测波长：UV210nm；进样量：50μl；流速：1.0ml/min；运行时间：93min。


2.如权利要求1所述的阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，其特征在于：所述用液相色谱法分离检测阿奇霉素及其杂质过程中，
空白溶液：稀释液；
峰鉴别对照溶液：取阿奇霉素峰鉴别对照品8mg，加稀释液1ml，溶解后作为峰鉴别对照溶液；
系统适用性对照溶液：取系统适用性对照品1瓶加稀释液1ml，溶解后作为系统适用性对照溶液；
供试品溶液：取阿奇霉素0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，平行配制两份；
自身对照溶液：精密量取1.0ml供试品溶液，置100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液。


3.如权利要求2所述的阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，其特征在于：所述阿奇霉素峰鉴别对照品是EP对照品，含杂质A、B、C、E、F、G、I、J、L、M、N、O和P；所述系统适用性对照品含杂质F、J和H。


4.如权利要求3所述的阿奇霉素胶囊相关杂质的检测方法，其特征在于：所述杂质A、B、C、E、F、G、I、J、L、M、N、O、P和H具体名称及化学结构如下：
杂质A名称：氮红霉素A(AzaerthromycmA)]，9-去氧-9a-氮杂-高红霉素A；
杂质A结构式：



杂质B名称：阿奇霉素B(AzithromycinB)，(2R,3S,4S,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-双脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-吡喃己糖基)氧]-2-乙基-4,10-二羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-(二甲氨基)-β-D-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；
杂质B结构式：



杂质C名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-(((2R,4R,5S,6S)-4,5-二羟基-4,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)氧)-11-(((2S,3S,4S,6R)-4-(二甲氨基)-3-羟基-6-甲基四氢-2H-吡喃-2-基)氧)-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；
杂质C结构式：



杂质E名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3-氨基-3,4,6-三脱氧-β-D-木-己吡喃糖基]氧基]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；
杂质E结构式：



杂质F名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-甲氨基-β-D-木-己吡喃糖基]氧基]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；
杂质F结构式：



杂质G名称：(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-核糖-己吡喃糖基)氨基]-2-乙基-3,4,10-三羟基-3,5,6,8,10,12,14-七甲基-11-[[3-[N-(4-甲基苯磺酰基)-N-甲基氨基]-3,4,6-三脱氧-β-D-木-己吡喃糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15-酮；
杂质G结构式：



杂质I名称：阿奇霉素I(3′-N-去甲基阿奇霉...

【专利技术属性】
技术研发人员：王正雄，张阳玲，朱丽君，徐金喜，肖伟平，何亚娟，
申请(专利权)人：湖北省宏源药业科技股份有限公司，武汉双龙药业有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42