一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法技术

本发明专利技术公开了一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法。本发明专利技术还公开了一种粳、籼稻通用型的组织培养的培养基，所述培养基由溶质和溶剂组成，所述溶质包括硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、碘化钾、五水硫酸铜、二水钼酸钠、六水氯化钴、甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠。本发明专利技术开发的通用型组织培养基具有如下优点：1、通过大量元素、微量元素、有机物及激素的优化组合，使粳、籼稻均可实现愈伤诱导及再生出苗；2、通过农杆菌介导，粳、籼稻均可实现稳定转化。

A method of rice genetic transformation mediated by Agrobacterium

【技术实现步骤摘要】
一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法，特别涉及一种农杆菌介导的同时适用于粳稻和籼稻的遗传转化方法。
技术介绍
水稻在我国人工种植历史至少7000年，在长期进化和人工驯化下分化为籼稻、粳稻两个亚种，长期以来我国以籼稻种植为主，粳稻占比不足30％，因此在水稻遗传转化研究方面籼稻被更多的关注。但鉴于粳稻米质与口感俱佳，随着经济发展和生活水平的提高，近年城乡居民的稻米消费出现由籼转粳的趋势。据2016年水稻分品种成本受益数据显示，粳稻每亩净利润是中籼稻的1.5倍、晚籼稻的2.9倍，亩产亦与中籼稻匹敌，因此无论从产量、品质、经济价值衡量，还是从国家粮食安全角度考虑，粳、籼稻方面的研究有必要双向推进。对于水稻遗传转化的研究中，普遍认为粳稻较籼稻更易组建高效、稳定的转化体系，而籼稻较难组培、难转化，因此转化系统的组建以粳、籼品种为界。但从实际应用角度出发，若能开发出一个可兼顾粳稻、籼稻两个品种的遗传转化体系，同时满足粳稻、籼稻两个品种的遗传转化需求，无疑可降低开发成本、为技术研究、生产本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于水稻遗传转化的培养基，由溶质和溶剂组成，所述溶质包括硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、碘化钾、五水硫酸铜、二水钼酸钠、六水氯化钴、甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于水稻遗传转化的培养基，由溶质和溶剂组成，所述溶质包括硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、碘化钾、五水硫酸铜、二水钼酸钠、六水氯化钴、甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠。


2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：每升所述培养基包括所述硝酸钾2300-2850mg、所述硫酸铵380-490mg、所述磷酸二氢钾210-420mg、所述七水硫酸镁175-447.5mg、所述二水氯化钙270-550mg、所述硫酸锰15-30mg、所述七水硫酸锌6-12mg、所述硼酸5-15mg、所述碘化钾4-8mg、所述五水硫酸铜0.025-0.05mg、所述二水钼酸钠0.25-0.5mg、所述六水氯化钴0.025-0.5mg、所述甘氨酸1.2-2.5mg、所述维生素B11-1.2mg、所述维生素B60.5-1mg、所述烟酸0.5-1mg、所述肌醇0-100mg、所述七水硫酸亚铁28-55mg和所述乙二胺四乙酸二钠37-74.5mg；
或，所述硝酸钾在所述培养基中的浓度为2300-2850mg/L；
所述硫酸铵在所述培养基中的浓度为380-490mg/L；
所述磷酸二氢钾在所述培养基中的浓度为210-420mg/L；
所述七水硫酸镁在所述培养基中的浓度为175-447.5mg/L；
所述二水氯化钙在所述培养基中的浓度为270-550mg/L；
所述硫酸锰在所述培养基中的浓度为15-30mg/L；
所述硫酸锌在所述培养基中的浓度为6-12mg/L；
所述硼酸在所述培养基中的浓度为5-15mg/L；
所述碘化钾在所述培养基中的浓度为4-8mg/L；
所述五水硫酸铜在所述培养基中的浓度为0.025-0.05mg/L；
所述二水钼酸钠在所述培养基中的浓度为0.25-0.5mg/L；
所述六水氯化钴在所述培养基中的浓度为0.025-0.05mg/L；
所述甘氨酸在所述培养基中的浓度为1.2-2.5mg/L；
所述维生素B1在所述培养基中的浓度为1-1.2mg/L；
所述维生素B6在所述培养基中的浓度为0.5-1mg/L；
所述烟酸在所述培养基中的浓度为0.5-1mg/L；
所述肌醇在所述培养基中的浓度为0-100mg/L；
所述七水硫酸亚铁在所述培养基中的浓度为28-55mg/L；
所述乙二胺四乙酸二钠在所述培养基中的浓度为37-74.5mg/L。


3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述培养基为继代培养基；所述继代培养基为将权利要求1或2所述的培养基与蔗糖或麦芽糖、山梨醇、水解酪蛋白、谷氨酰胺、脯氨酸和2,4-D混匀得到的；
或，所述蔗糖或麦芽糖在所述继代培养基中的浓度为20-30g/L；
所述山梨醇在所述继代培养基中的浓度为10-20g/L；
所述水解酪蛋白在所述继代培养基中的浓度为500-800mg/L；
所述谷氨酰胺在所述继代培养基中的浓度为500-800mg/L；
所述脯氨酸在所述继代培养基中的浓度为500-800mg/L；
所述2,4-D在所述继代培养基中的浓度为1.5-2mg/L。


4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于：所述培养基为诱导培养基；所述诱导培养基为将所述继代培养基与植物凝胶混匀得到的；
所述植物凝胶在所述诱导培养基中的浓度为2.5-4g/L。


5.根据权利要求4所述的培养基，其特征在于：所述培养基为共培养培养基；
所述共培养培养基为将所述诱导培养基与乙酰丁香酮混匀得到的；
或，所述乙酰丁香酮在所述共培养培养基中的浓度为100-200uM；
或，所述培养基为恢复培养基；所述恢复培养基为将所述诱导培养基与特美汀混匀得到的；
或，所述特美汀在所述恢复培养基中的浓度为200-300mg/L；
或，所述培养基为筛选培养基；所述筛选培养基为将所述诱导培养基与特美汀和筛选剂混匀得到的；
或，所述特美汀在所述筛选培养基中的浓度为200-300mg/L；
或，所述筛选剂在所述筛选培养基中的浓度为35-65mg/L；
或，所述筛选剂为潮霉素；
或，所述培养基为再生培...

【专利技术属性】
技术研发人员：武莹，贺晓庆，宋金岭，杨进孝，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京;11